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浙江聯(lián)碩生物科技有限公司
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血清中常見的幾個(gè)問(wèn)題2020/03/16
保存血清的方法?血清應(yīng)保存在-5°C至-2°C。然而,若存放于4°C時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。如何避免沉淀物的產(chǎn)生?1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20°C至4°C至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20°C至37°C),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時(shí)
血清保存的六點(diǎn)注意事項(xiàng)2020/03/13
1.需要長(zhǎng)期保存的血清有必要儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)刻切勿超過(guò)1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預(yù)留一定體積空間,不然易發(fā)作污染或玻璃瓶?jī)隽选?.一般廠商供給的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。3.瓶裝血清凍結(jié)需采用逐漸凍結(jié)法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡)
酶聯(lián)免疫吸附法2020/03/11
原理:可用于測(cè)定抗體,也可用于檢測(cè)杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反響將待測(cè)物與酶連接,然后通過(guò)酶與底物發(fā)生顏色反響,用于定量測(cè)定。酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定的對(duì)象可所以抗體也可所以抗原。3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑);②酶符號(hào)的抗原或抗體(符號(hào)物);③酶效果的底物(顯色劑)。ELISA進(jìn)程包括:抗原吸附在固相載體上,這個(gè)進(jìn)程稱為包被,加待測(cè)抗體,再加相應(yīng)酶符號(hào)抗體,生成抗原--待測(cè)抗體--酶符號(hào)抗體的復(fù)合物,再與該酶的底物反響生成有色產(chǎn)品。借助分光光度計(jì)的光吸收核算抗體的量。依
常用化學(xué)試劑保存注意事項(xiàng)2020/03/03
化學(xué)試劑在貯存時(shí)常因保管不當(dāng)而蛻變。有些試劑簡(jiǎn)單吸濕而潮解或水解;有的簡(jiǎn)單跟空氣里的氧氣、二氧化碳或分散在其間的其他氣體發(fā)作反響,還有一些試劑受光照和環(huán)境溫度的影響會(huì)蛻變。一、防蒸發(fā):1.油封2.水封3.臘封二、防潮:1.過(guò)氧化鈉應(yīng)該進(jìn)行臘封,防止吸水分解或吸水爆炸。氫氧化鈉易吸水潮解,應(yīng)該進(jìn)行臘封;硫酸鈉易吸水結(jié)狀,倒不出來(lái),以至導(dǎo)致試劑瓶決裂,也應(yīng)緊密臘封。2.碳化鈣、無(wú)水硫酸銅、五氧化二磷、硅膠極易吸水蛻變,易被氧化,然后吸水生成偏磷酸,以上各物均應(yīng)寄存在干燥器中。3.濃硫酸雖應(yīng)密閉,防止
研域課堂:胎牛血清入冬的貯存方式2020/01/14
胎牛血清入冬貯存怎么辦?根據(jù)我司的經(jīng)歷分析,胎牛血清由于其產(chǎn)品的特性,在貯存的時(shí)分需求多加留意,過(guò)錯(cuò)的操作會(huì)使胎牛血清失掉活性,在實(shí)際應(yīng)用的時(shí)分應(yīng)留意以下幾點(diǎn):1、首先在解凍和貯存的時(shí)分應(yīng)該將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。2、因此,推薦在-20℃以下貯存血清,并防止重復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。3、長(zhǎng)時(shí)間貯存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)或許聚集而形成沉淀或可見的混濁
試劑盒試驗(yàn)環(huán)境的重要性2020/01/09
1.為推遲光學(xué)部件的老化,應(yīng)避免陽(yáng)光直射。2.操作環(huán)境溫度應(yīng)在15℃至40℃之間,環(huán)境濕度在15%~85%之間。3.儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境下。4.操作時(shí)電壓應(yīng)堅(jiān)持穩(wěn)定。5.操作環(huán)境空氣清洗,避免水汽、煙塵。6.堅(jiān)持枯燥、潔凈、水平的作業(yè)臺(tái)面,以及滿足的操作空間。7.儀器應(yīng)放置在無(wú)強(qiáng)磁場(chǎng)和煩擾電壓的方位。ELISA試劑盒運(yùn)用留心:1.不相同廠家出產(chǎn)的試劑盒因出產(chǎn)工藝和操作方法略有不相同,有必要依照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則簡(jiǎn)略發(fā)生查看效果的不確定性.2.若不相同批號(hào)試劑的不相同組分(A液
在細(xì)胞傳代培育過(guò)程中的原則、注意事項(xiàng)2019/12/30
在生物醫(yī)學(xué)試驗(yàn)中常常會(huì)用到細(xì)胞系,指原代細(xì)胞培育物經(jīng)傳代成功后所繁衍的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培育細(xì)胞。細(xì)胞系是經(jīng)過(guò)細(xì)胞傳代或續(xù)代培育是將細(xì)胞從現(xiàn)有的培育物分隔或分出來(lái)開端新的培育,并參加新鮮培育液來(lái)促進(jìn)擴(kuò)增的常用手法。可是細(xì)胞系與新分離的或原代細(xì)胞的培育條件相類似,但也有一些根本不同的當(dāng)?shù)兀海?)每個(gè)細(xì)胞系需求其特定的成長(zhǎng)因子混合物(2)與原代細(xì)胞比較,它們的成長(zhǎng)需求更嚴(yán)密的監(jiān)測(cè),由于使它們無(wú)限成長(zhǎng)的突變同時(shí)也會(huì)形成它們很快到達(dá)過(guò)度成長(zhǎng)。因而,當(dāng)細(xì)胞系成長(zhǎng)到了簡(jiǎn)直覆蓋整個(gè)培育器皿底部,也
常見ELISA試劑盒試驗(yàn)技能要點(diǎn)2019/12/26
1.準(zhǔn)備好所有試驗(yàn)額定所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等;2.依據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確認(rèn)所需試劑的量;3.按闡明書將所用試劑平衡至室溫,制造所需試劑;4.標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法試驗(yàn)者,留意低溫保存。試驗(yàn)中為了確認(rèn)信號(hào)和背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)試驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí),應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的規(guī)范品的系列稀釋。按試劑闡明書慣例供給的范圍進(jìn)行操作。規(guī)范品的制造:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔
細(xì)胞呈現(xiàn)黑點(diǎn)怎么處理?2019/12/23
一旦您在細(xì)胞培育的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培育基是否混濁,然后,在鏡下觀察培育細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。假如細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁衍,培育基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包含細(xì)菌污染、支原體污染等。假如在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)呈現(xiàn)前相比。沒(méi)有任何變化,那么,黑點(diǎn)的呈現(xiàn)可能與以下幾種狀況有關(guān):1、細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老,破碎的細(xì)胞殘骸;2、血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的成果;3、制造培育基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);4、制造培育基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑
聯(lián)碩講堂:血清的一些主要作用2019/12/19
●提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)?!裉峁┘に睾透鞣N生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等?!裉峁┙Y(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用?!裉峁┐俳佑|和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷?!駥?duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨
ELISA試驗(yàn)操作失敗的主要原因2019/12/16
我們知道,ELISA測(cè)定中影響要素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在查驗(yàn)中除正常反響外,有時(shí)??梢姷揭恍┻^(guò)錯(cuò)結(jié)果(即假陽(yáng)性或假陰性),那么致使試驗(yàn)不成功的主要原因有哪些咧?一:標(biāo)本的影響:溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易發(fā)生假陽(yáng)性。或許是溶血血清中含有過(guò)氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗刷過(guò)程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍(lán)色,發(fā)生假陽(yáng)性。所以嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。二、標(biāo)本受細(xì)菌污染:因菌體
Elisa試劑盒的使用說(shuō)明2019/12/09
由于elisa辦法的操作簡(jiǎn)單,現(xiàn)在越來(lái)越的科研工作者在做試驗(yàn)時(shí)都會(huì)挑選elisa辦法,一些剛觸摸的elisa辦法的朋友們估量對(duì)elisa試劑盒不怎么了解,今日聯(lián)碩來(lái)說(shuō)明elisa試劑盒的使用說(shuō)明:1.在貯存及孵育過(guò)程中防止將試劑暴露在強(qiáng)光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸騰和污染,試劑防止遭到微生物的污染,由于蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的成果。2.小心汲取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。請(qǐng)注意在汲取標(biāo)本/規(guī)范品,酶結(jié)合物或底物時(shí),個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間距離如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵
聯(lián)碩淺談:血清熱滅活的問(wèn)題2019/12/03
血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(zhǎng)因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒(méi)有必要的。盡管如此,在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來(lái)執(zhí)行,多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒(méi)有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子,氨基酸等成分帶來(lái)的負(fù)面影響,在我們的技術(shù)熱線中常被提到的就是否該對(duì)血清進(jìn)行熱滅活,下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒(méi)有必要。Triglia和L
聯(lián)碩淺談:血清的首要效果以及鑒別方法有哪些2019/11/25
我們大家都知道血清,指血液凝結(jié)后,在血漿中除掉纖維蛋白原別離出的淡黃色通明液體或指纖維蛋白原已被除掉的血漿。那么,我們提取血清的首要目的有哪些呢?又應(yīng)該來(lái)如何鑒別血清呢?聯(lián)碩為您具體解說(shuō):血清的首要效果:1、供給基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞成長(zhǎng)有必要的物質(zhì)。2、供給激素和各種成長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(氫化ke的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。成長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞成長(zhǎng)因子、表皮成長(zhǎng)因子、血小板成長(zhǎng)因子等。3、供給結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白
胎牛血清的保存和使用2019/11/20
胎牛血清的保存方法:需要長(zhǎng)期保存的胎牛血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)被破壞,而影響血清質(zhì)量。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?。胎牛血清的使用方法?、瓶裝胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1
PeproTech細(xì)胞因子的重要價(jià)值在什么地方可以體現(xiàn)2019/09/20
PeproTech細(xì)胞因子是一組蛋白質(zhì)及多肽,是在細(xì)胞之間傳遞信息的遞質(zhì)、具有免疫調(diào)節(jié)和效應(yīng)功能的信息蛋白和小分子多肽。PeproTech細(xì)胞因子可以由多種細(xì)胞釋放,尤其重要的是先天性免疫反應(yīng)和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。細(xì)胞因子也參與免疫性疾病、炎癥及傳染性疾病的過(guò)程。PeproTech細(xì)胞因子中不含載體蛋白(CarrierProtein)或其他添加劑(如BSA、HAS或蔗糖等),并且通常以少量的鹽來(lái)進(jìn)行凍干處理,因此微量的細(xì)胞因子在凍干過(guò)程中會(huì)沉積于管內(nèi),形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品
聯(lián)碩生物:ELISA試劑盒檢測(cè)有哪些范圍呢2019/09/06
ELISA試劑盒靈敏度高是一大優(yōu)點(diǎn),而這其實(shí)也是和檢測(cè)樣本有些關(guān)聯(lián)的,我們一般說(shuō)來(lái),如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對(duì)靈敏度要求相對(duì)小一些。如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問(wèn)題。一般來(lái)說(shuō),試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時(shí),應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。那么ELISA試劑盒檢測(cè)哪些范圍呢?一般說(shuō)來(lái),診斷試劑的檢
ELISA試驗(yàn)三大常用辦法優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)2019/08/29
ELISA試驗(yàn)三大常用辦法優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)總所周知,ELISA試劑盒法可分為多種類型測(cè)定,是一種廣泛應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技能。今天,我司技能專員為您解析ELISA試驗(yàn)三大常用辦法的優(yōu)勢(shì)與劣勢(shì),一起跟著研域小編來(lái)看看吧!一、直接法將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)略,因無(wú)須運(yùn)用二抗可防止交互反響。下風(fēng):試驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào),但不是每種抗體都適合做符號(hào),費(fèi)用相對(duì)前進(jìn)。二、ELISA試劑盒間接法此測(cè)
關(guān)于ELISA試劑盒應(yīng)該注意的事項(xiàng)2019/08/26
1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液或許會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響成果。3.各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器,并常常校正其準(zhǔn)確性,以避免實(shí)驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,引薦運(yùn)用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的一起做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍
聯(lián)碩生物教您植物組織蛋白質(zhì)提取方法2019/08/16
植物蛋白是蛋白質(zhì)的一種,來(lái)源是從植物里提取的,營(yíng)養(yǎng)與動(dòng)物蛋白相仿,但是更易于消化。含植物蛋白豐富的是大豆。但在飲食中,植物蛋白和動(dòng)物蛋白要搭配食用。他們的提取方式有兩種,如下:一、植物組織蛋白質(zhì)提取方法1、根據(jù)樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據(jù)材料不同適當(dāng)加入),準(zhǔn)備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時(shí))。3、用離心機(jī)離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清液,樣品制備完成。蛋白質(zhì)提取液:300m
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