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2021
09-07

液相色譜儀為什么會(huì)“漏液”和“漏氣”？恒譜生教你這些解決辦法！
液相色譜系統(tǒng)是一個(gè)封閉的系統(tǒng)，從最開始的溶劑瓶一直到最后的廢液瓶，期間是保持*封閉的，流動(dòng)相在系統(tǒng)內(nèi)應(yīng)該是流動(dòng)不會(huì)發(fā)生漏液或者外部氣體進(jìn)入系統(tǒng)內(nèi)部發(fā)生漏氣的現(xiàn)象。但是這是理想的液相系統(tǒng)，現(xiàn)實(shí)操作中還是會(huì)發(fā)生一些小問題、小故障從而產(chǎn)生漏液或者漏氣的現(xiàn)象。漏液的原因主要有以下幾種情況：（1）接頭處漏液一般是色譜柱接頭處漏液，可能是由于接頭損壞、松動(dòng)、接口不匹配等情況而造成漏液。這時(shí)只要檢查接頭是什么問題，就差不多了。接口損壞可以替換新的，松動(dòng)就擰緊，如果是不匹配的問題，最好是用色譜柱配套的接頭或者選
2021
08-31

高效液相色譜分析，如何避免堿性化合物的拖尾問題？
提起生物堿，制藥的小伙伴肯定不陌生，它是中草藥中最重要也*有價(jià)值的生物活性成分之一。生物堿可分為59種，它們的結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，用傳統(tǒng)的方法分離效果不佳。高效液相色譜法還沒出現(xiàn)之前，對(duì)于生物堿的分離純化一直是學(xué)者們的難題。但是，即使使用液相色譜法分離，也會(huì)存在許多問題。堿性化合物分析中顯著的難題是峰形拖尾，而且堿性越強(qiáng)的時(shí)候，就越容易發(fā)生拖尾現(xiàn)象。恒譜生和你一起探討一下峰拖尾該如何避免！1、流動(dòng)相調(diào)節(jié)流動(dòng)相也可以改善峰拖尾的現(xiàn)象，前期在選擇流動(dòng)相的時(shí)候，要考慮流動(dòng)相pH值的范圍。對(duì)堿性化合物來說，流
2021
08-28

液相色譜發(fā)展都經(jīng)歷了啥？
液相色譜柱是液相色譜分析的核心，對(duì)于填料一直是色譜界研究的熱門項(xiàng)目。液相色譜柱的研究可謂是中原逐鹿，競(jìng)爭(zhēng)十分激烈。液相色譜柱的發(fā)展都?xì)v經(jīng)了哪些變化呢？首先是柱子的柱體。從材質(zhì)上，一開始采用玻璃制作，但是我們都知道玻璃這種東西十分不耐壓，液相色譜分析的運(yùn)行壓力越來越高，甚至現(xiàn)在還有超高壓液相色譜，用玻璃的柱體是十分不合適的?，F(xiàn)在的液相色譜柱的柱管幾乎都是用金屬制作了。通常采用不銹鋼材質(zhì)，具有高強(qiáng)度、高硬度的同時(shí)，不易生銹腐蝕、適用的溫度廣泛。恒譜生的液相色譜柱柱管就是采用不銹鋼材質(zhì)制作的。并且現(xiàn)在
2021
08-24

辟謠！一些關(guān)于HPLC和UHPLC 色譜柱的誤區(qū)
誤區(qū)1：HPLC柱不可以反沖這是不正確的。通常情況下液相色譜柱所設(shè)計(jì)的耐壓值是遠(yuǎn)高于最大操作壓力的。換柱時(shí)反沖可以清洗柱頭一些具有強(qiáng)吸附性質(zhì)的物質(zhì)，我們沖洗出這些殘留物質(zhì)也是為了防止壓力增大。但是如果你購(gòu)買的色譜柱在柱頭使用了大粒度的填料，這時(shí)你反沖會(huì)沖出這一部分填料。因此你要先檢查一下自己使用的液相色譜柱再選擇是否反沖。誤區(qū)2：所有的C18（L1）色譜柱都是一樣的這是不正確的。在早期的HPLC體系中，C18是僅有的反向色譜的鍵合固定相，因此C18就作為了反向色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)。但是時(shí)代不會(huì)一直停滯腳
2021
08-23

關(guān)于色譜填料，有哪些選擇呢
色譜填料技術(shù)又稱層析分離技術(shù)或色層分離技術(shù)，是一種分離復(fù)雜混合物中各個(gè)組分的有效方法。它是利用不同物質(zhì)在由固定相和流動(dòng)相構(gòu)成的體系中具有不同的分配系數(shù)，當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，這些物質(zhì)隨流動(dòng)相一起運(yùn)動(dòng)，并在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配，從而使各物質(zhì)達(dá)到分離。如今，色譜技術(shù)廣泛應(yīng)用于工業(yè)中尤其是食品藥品行業(yè)，高效液相色譜也逐漸成為了食品藥品實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)部門的標(biāo)配。在制藥行業(yè)，色譜層析制備柱也成了抗體、糖蛋白、抗生素等產(chǎn)品主要的生產(chǎn)設(shè)備。色譜填料的選擇要點(diǎn)有哪些呢？一、硅膠基質(zhì)填料硅膠是HPLC填料普遍的基質(zhì)
2021
08-10

在進(jìn)行HPLC分析之前，如何對(duì)生物樣品進(jìn)行脫蛋白處理？
恒譜生建議各位色譜操作者在進(jìn)行液相色譜分析前，關(guān)注樣品過濾的重要性，這是為什么呢？主要是為防止蛋白質(zhì)等雜質(zhì)沉積在色譜柱上，上柱前需對(duì)生物樣品進(jìn)行去蛋白的預(yù)處理。這樣可以延長(zhǎng)色譜柱壽命并減少維護(hù)成本，從而有助于提高實(shí)驗(yàn)室通量。脫蛋白對(duì)于分析生物液體（例如血漿，血清，尿液和腦脊髓液）中的抗生素，殘留農(nóng)藥含量等也起著非常重要的影響。并且如果不將沉淀的蛋白質(zhì)從樣品中去除，會(huì)導(dǎo)致色譜柱性能下降，最終影響色譜分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。生物樣品中去除蛋白質(zhì)的處理方法有3種：利用蛋白質(zhì)脫水沉淀。采用有機(jī)溶劑如乙腈、甲醇
2021
08-09

色譜柱填料方法有哪些呢，想知道的一起來看看吧
色譜柱填料技術(shù)呈現(xiàn)二大趨勢(shì)。一個(gè)趨勢(shì)是快速液相，利用亞2?m小粒徑硅膠、核殼型硅膠;第二大趨勢(shì)是越來越豐富的選擇性。填料的粒度主要影響填充柱的兩個(gè)參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，填充柱的柱效越高；小于3μm的填料應(yīng)用，在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是位一的因素。如果固定相選擇是真確，但是分離度不夠，那么選擇更小粒度的填料是很用有的，3μm填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而，3μm的色相譜的背壓卻是5μm的2倍。與此同時(shí)，柱效提高意味著在相同條件下可以選
2021
08-06

液相色譜分析中，氣泡問題如何解決？
色譜工作者都知道，在液相色譜儀或者高效液相色譜儀工作時(shí)，不能有氣泡進(jìn)入系統(tǒng)，否則會(huì)出現(xiàn)諸如雜峰、壓力波動(dòng)不穩(wěn)定和基線噪音等問題。通常對(duì)氣泡這種問題，要預(yù)先進(jìn)行處理，如果等到氣泡進(jìn)入系統(tǒng)想要處理，可就不那么容易了。對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行提前過濾和脫氣處理，這是一個(gè)比較好的解決辦法。大家可能會(huì)想，我選擇實(shí)驗(yàn)分析的HPLC級(jí)溶劑還要過濾嘛？答案是：還是要過濾的！流動(dòng)相過濾可以選擇溶劑過濾器，過濾掉里面的雜質(zhì)和避免空氣進(jìn)入系統(tǒng)里。恒譜生溶劑過濾頭可有效濾除流動(dòng)相中的固體顆粒雜質(zhì)，不會(huì)產(chǎn)生氣泡，溶劑利用率達(dá)99%，
2021
08-04

液相色譜里理想的色譜峰長(zhǎng)什么樣？
無論氣相色譜還是液相色譜，我們最終用來分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的都是色譜峰。zui理想的色譜峰長(zhǎng)什么樣呢？它長(zhǎng)得如下圖所示，符合高斯分布的兩邊對(duì)稱的色譜峰是理想的峰形。而做色譜分析實(shí)驗(yàn)就好像買彩piao，不是每次都有理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)的。更多時(shí)候，總是會(huì)出現(xiàn)一些“奇奇怪怪”的峰型，比如峰拖尾、峰前延、倒峰、寬峰等。為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的情況呢？要針對(duì)不同的峰型來具體分析。比如峰拖尾，這是比較常見的峰型，可能有以下幾種原因：色譜柱如果受到污染，會(huì)導(dǎo)致柱效下降，影響分析效果。如果等到發(fā)現(xiàn)柱頭污染了才來更換，費(fèi)時(shí)費(fèi)力
2021
07-19

液相色譜柱填料的種類與選擇原則
如果說色譜柱在液相色譜分析中的作用好比人的“大腦”，那么色譜填料就好比我們?nèi)说摹靶呐K”。液相分析結(jié)果好壞和準(zhǔn)確性，與填料有著非常重要的聯(lián)系。液相色譜填料的種類有很多，主要分為聚合物填料、硅膠基質(zhì)填料和其它無機(jī)填料。其中，硅膠基質(zhì)的填料被廣泛應(yīng)用于各種液相色譜分析中。硅膠填料有什么好處呢？硅膠基質(zhì)純度高，pH值通常在2-8之間，有些特殊的硅膠鍵合相的ph值可以穩(wěn)定在pH1.5-10。同時(shí)還具有比較高的比表面積，高比表面積具有較強(qiáng)的保留能力、柱容量和分離度；機(jī)械強(qiáng)度大，可以保證在超高壓的操作壓力下，
2021
07-19

親水相互作用色譜（hilic）是什么？
一種新的研究方法的誕生，大多是為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足。反相液相色譜法能解決多種分析應(yīng)用問題，但對(duì)極性和親水性化合物很少或無法保留保留。如果使用正相液相色譜法，用己脘或環(huán)已脘來分析這些物質(zhì)也存在一些局限性，很多極性和親水化合物往往很難溶解，從而限制了NPLC的應(yīng)用范圍。在此基礎(chǔ)上，誕生了一種新的解決辦法—親水作用液相色譜（HILIC）。在HILIC色譜柱上，物質(zhì)的洗脫順序與RPLC恰恰相反，在RPLC柱上很難保留或根本不保留的物質(zhì)，在通常的實(shí)驗(yàn)條件下，它們?cè)贖ILIC柱上有較強(qiáng)的保留。恒譜生USH
2021
07-19

液相色譜柱該如何選擇？
可以說，色譜柱是色譜分析過程中最重要的部分，相當(dāng)于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱，需要考慮不同參數(shù)將會(huì)造成什么影響，比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。即使是液相色譜柱也分很多類型，比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素，才能結(jié)合目標(biāo)分析物的性質(zhì)、需要達(dá)到的分析效果及實(shí)驗(yàn)室條件來選擇適合的色譜柱。在設(shè)定選擇樣品分析的HPLC方法時(shí)，首先需要根據(jù)化合物的分子量大小，極性大小等因素選擇合適的分離模式，在適當(dāng)?shù)姆蛛x模式下去選擇合適的色譜柱
2021
07-19

hplc 固定相的都經(jīng)過的哪些變化？
色譜工作者都知道固定相的選擇對(duì)樣品的分離起著重要作用，不同類型的色譜采用的固定相也是不同的，正相色譜采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相)，反相色譜一般用非極性固定相（如C18、C8），離子交換色譜中的固定相是各種離子交換劑等。早期使用*泛的是10-15μm固定相的填料，到今天HPLC的固定相已經(jīng)從不規(guī)則顆粒發(fā)展到球形顆粒。HPLC固定相發(fā)展歷程：六十年代，薄殼型填料，分離效率提高；七十年代，穩(wěn)定化學(xué)鍵合固定相，高速、高效和更大樣品容量，應(yīng)用范圍擴(kuò)充；八十年代，生物色譜填料；九十年代，高
2021
07-13

2020版《中國(guó)藥典》高效液相色譜法修訂了！恒譜生帶你快速了解！
制藥行業(yè)一直是高效液相色譜法的重點(diǎn)應(yīng)用領(lǐng)域，高效液相色譜法被廣泛運(yùn)用于鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定、體內(nèi)分析等藥物分析測(cè)試與藥物質(zhì)量分析方法的建立。比如用高效液相色譜法可以測(cè)定合成藥及其制劑的含量，消除藥物中的雜質(zhì)、制劑中的附加劑及共存藥物的干擾。《中華人民共和國(guó)藥典》（簡(jiǎn)稱《中國(guó)藥典》）是藥品研制、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、使用和監(jiān)督管理等均應(yīng)遵循的法定依據(jù)。所有國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)當(dāng)符合中國(guó)藥典凡例及附錄的相關(guān)要求。2020版藥典對(duì)0512高效液相色譜法中的色譜條件參數(shù)的可調(diào)整項(xiàng)及可調(diào)整范圍做了詳細(xì)規(guī)定。固定相不得
2021
07-13

你知道uhplc操作中常見故障怎么解決嗎？
首先我們要知道UHPLC是什么，它的全稱是超高效液相色譜（Ultra-HighPerformanceLiquidChromatography），是色譜分離科學(xué)中的一個(gè)全新類別與新技術(shù)。在制造技術(shù)、擴(kuò)散體積和耐受壓力方面進(jìn)行了優(yōu)化，采用小顆粒的固相，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量，最大限度的發(fā)揮色譜性能。色譜儀器作為一種精密儀器，一些不正確的操作或者忽視的實(shí)驗(yàn)步驟，會(huì)導(dǎo)致儀器分析效果的不佳，甚至對(duì)儀器造成傷害。其中，最多出現(xiàn)的一些柱壓、漂移和峰型異常的問題，比如鬼峰、肩峰、峰型不準(zhǔn)等。故障1
2021
07-13

液相色譜法對(duì)食品標(biāo)簽的貢獻(xiàn)
中國(guó)有句古話“民以食為天”，在吃上面，中國(guó)人可謂是“花樣百出”?，F(xiàn)代快節(jié)奏的生活，很多年輕人忙于工作沒時(shí)間自己做飯，從而促進(jìn)了速食食品市場(chǎng)的蓬勃發(fā)展。有機(jī)構(gòu)數(shù)據(jù)顯示，淘寶、天貓平臺(tái)2020年方便速食市場(chǎng)總成交額達(dá)213億元，市場(chǎng)規(guī)?？捎^?！?021中國(guó)食品消費(fèi)趨勢(shì)》顯示，2021年包裝食品、自熱食品、預(yù)制菜肴等品類仍將加速成長(zhǎng)，代餐、功能食品等聚焦健康的細(xì)分品類將獲更多關(guān)注，整體消費(fèi)市場(chǎng)持續(xù)革新。人們的生活水平不斷提高，不僅市民對(duì)食品安全及營(yíng)養(yǎng)健康非常關(guān)注，國(guó)家對(duì)營(yíng)養(yǎng)及食品問題也十分重視。衛(wèi)生部
2021
07-09

為什么hplc流動(dòng)相溶劑要過濾和脫氣？
要回答這個(gè)問題，首先來了解一下什么叫流動(dòng)相。簡(jiǎn)而言之，流動(dòng)相就是載體,將物質(zhì)帶到固定相里并通過固定相的流體。流動(dòng)相可以是緩沖液與有機(jī)溶劑結(jié)合的水-有機(jī)混合物，也可以是有機(jī)-有機(jī)混合物。開始使用流動(dòng)相溶劑進(jìn)行色譜分析前，一定要檢查溶劑是否*混溶，這是非常重要的，其次是要關(guān)注它們?cè)诨旌蠒r(shí)是否會(huì)相互反應(yīng)，如果發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，會(huì)影響流動(dòng)相的使用和色譜的正確分析。有些色譜工作者可能會(huì)說，那我采用HPLC級(jí)溶劑可以直接使用嗎？恒譜生建議，即使是HPLC級(jí)溶劑也要在使用前進(jìn)行過濾！為什么呢？主要是有些懸浮顆?；?
2021
07-07

hplc在臨床實(shí)驗(yàn)室中的潛在應(yīng)用有哪些？
高效液相色譜法在臨床實(shí)驗(yàn)室中對(duì)不同體液中生物標(biāo)志物的分離和定量起了重要作用。HPLC與其他常規(guī)檢測(cè)器（例如UV，熒光和電化學(xué)檢測(cè)器）相比，更趨向于質(zhì)量敏感檢測(cè)。填充材料技術(shù)的進(jìn)步，例如亞微米表面多孔二氧化硅顆粒已經(jīng)被引入了超高壓液相色譜中，在不遇到高背壓的情況下提高了分離效率。高效液相色譜儀的系統(tǒng)壓力較高，色譜柱是產(chǎn)生系統(tǒng)壓力的主要部件，高背壓會(huì)影響很多方面比如反壓太高超過流通池的耐受壓力，會(huì)導(dǎo)致流通池的損壞。恒譜生液相色譜柱均一的粒徑保證了流動(dòng)相穩(wěn)定的流動(dòng)，并且確保色譜柱有著較低的柱壓。恒譜生
2021
07-07

什么是保護(hù)柱，它們?cè)趆plc分析中有什么作用？
HPLC系統(tǒng)能否有效運(yùn)行取決于流動(dòng)相和樣品不受化學(xué)雜質(zhì)或固體懸浮液的影響。對(duì)于HPLC流動(dòng)相的處理和使用注意事項(xiàng)討論主要圍繞在流動(dòng)相的制備和使用中應(yīng)采取的措施。對(duì)于樣品過濾的重要性討論主要圍繞在進(jìn)樣時(shí)清潔樣品的好處。HPLC色譜柱是HPLC系統(tǒng)中的重要組成部分，使用時(shí)需要細(xì)心使用，用完后要維護(hù)避免下次使用發(fā)生問題。經(jīng)常更換色譜柱是很昂貴的，因此為了節(jié)約成本，需要較大程度地延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。同時(shí)也要細(xì)心維護(hù)色譜柱，以便每次獲得結(jié)果保持準(zhǔn)確性和一致性。由于經(jīng)常使用色譜柱，化學(xué)雜質(zhì)和固體懸浮液顆粒
2021
07-06

想要hplc系統(tǒng)平穩(wěn)運(yùn)行？得學(xué)會(huì)打“預(yù)防針”！
對(duì)于液相色譜儀這種需要全天運(yùn)轉(zhuǎn)分析的儀器而言，長(zhǎng)時(shí)間地運(yùn)行很容易會(huì)產(chǎn)生故障。所以可以提前先采取一些預(yù)防性的維護(hù)措施，減少儀器出故障的幾率，保證系統(tǒng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)。就好比在制藥和食品行業(yè)中會(huì)定期質(zhì)檢把關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量，液相色譜系統(tǒng)也需要定期檢查。在使用液相色譜儀時(shí)，也應(yīng)該定期檢查，排查問題，避免一些故障的發(fā)生導(dǎo)致影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。流動(dòng)相流動(dòng)相是HPLC的生命線。我們通常用高純度等級(jí)的溶劑來當(dāng)流動(dòng)相，并且使用在線過濾器過濾流動(dòng)相以除去固體懸浮液，確保沒有固體懸浮顆粒到達(dá)色譜柱，并且始終對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理。

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