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04-09hplc液相色譜系統(tǒng)準(zhǔn)備緩沖液的技巧
液相色譜是世界各地實(shí)驗(yàn)室使用的流行純化技術(shù)。如果系統(tǒng)設(shè)置和操作正確,它可以立即從混合物中分離出所需的化合物。學(xué)習(xí)如何使用和制備緩沖液和溶劑是能提高系統(tǒng)性能的重要技巧之一。準(zhǔn)確制備和正確選擇緩沖液對于在液相色譜中獲得可重復(fù)的結(jié)果至關(guān)重要。一、了解您的化合物如果您正在尋找混合物中的特定化合物,您應(yīng)該使用最能將您的分析物與其他分析物分開的緩沖液/溶劑組合。例如,了解極性和溶解度(極性或非極性)、電離、您正在尋找的紫外吸光度將有助于指導(dǎo)您使用特定的色譜柱和溶劑組。二、純度使用較低等級且成本較低的試劑來制2022
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02-28超高效液相色譜—UHPLC改進(jìn)大蛋白質(zhì)分子的分離度
初次將UHPLC用于小分子分離時(shí),能得到很好的峰形,但是蛋白質(zhì)峰的分離幾乎沒有那么好,因此通常不可能顯著縮短運(yùn)行時(shí)間。然而,最近對蛋白質(zhì)進(jìn)一步改進(jìn)讓UHPLC可以提供更好的分離度和更短的運(yùn)行時(shí)間。雖然UHPLC不能讓科學(xué)家始終看到蛋白質(zhì)之間的所有差異,但它可以讓他們看到一些差異——例如,在大體形態(tài)、二硫化物異構(gòu)體、脫氨基作用和蛋白質(zhì)折疊方面。蛋白質(zhì)研究人員使用不同的色譜模式來實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo),例如反相色譜(RPC)、離子交換色譜(IEX)和尺寸排阻(SEC)色譜。為了成功分離出蛋白質(zhì)的細(xì)微變化,可以2022
02-252022
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