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2022
02-14

簡(jiǎn)述hplc色譜柱與hplc的區(qū)別？
由于高效液相色譜具有速度快、分離效果好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，因此應(yīng)用越來(lái)越廣泛。HPLC色譜柱是HPLC系統(tǒng)的重要組成部分。使用時(shí)需謹(jǐn)慎使用，使用后必須進(jìn)行保養(yǎng)，以免下次使用出現(xiàn)問(wèn)題。色譜柱的頻繁更換是非常昂貴的，因此為了節(jié)約成本，需要更大程度的延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。同時(shí)，必須小心維護(hù)色譜柱，以保持每次獲得結(jié)果時(shí)的準(zhǔn)確性和一致性。深圳恒譜生總結(jié)了7個(gè)關(guān)于色譜柱的誤區(qū)，希望能延長(zhǎng)使用壽命。誤區(qū)一：HPLC色譜柱不能反吹一般情況下，液相色譜柱的設(shè)計(jì)耐壓值遠(yuǎn)高于ZUI大工作壓力。更換柱子時(shí)，反吹可以清除柱
2022
02-11

hplc色譜柱老化的問(wèn)題如何解決？
在氣相分析過(guò)程中，hplc色譜柱是氣相色譜儀的“心臟”，在組分的定性和定量分析中起著至關(guān)重要的作用。今天我們來(lái)分享一下關(guān)于hplc色譜柱老化的問(wèn)題。色譜柱老化，簡(jiǎn)而言之，就是通過(guò)高溫烘烤柱子，用載氣將不穩(wěn)定的固定相、可能存在的雜質(zhì)和污染物帶出柱子，恢復(fù)柱效的過(guò)程。需要對(duì)色譜柱進(jìn)行時(shí)效處理的條件有哪些？1、新購(gòu)柱：對(duì)于新柱，在初次使用前，老化處理可以去除柱內(nèi)鍵合不穩(wěn)定的固定液或填充柱內(nèi)殘留的溶劑，保證新柱性能的穩(wěn)定性。2、對(duì)于長(zhǎng)期閑置需要重新啟動(dòng)的色譜柱，色譜柱老化可以去除色譜柱長(zhǎng)期放置造成的污染
2022
02-10

疏水相互作用色譜（HIC）
經(jīng)常做蛋白質(zhì)純化分離實(shí)驗(yàn)的色譜工作者，對(duì)于疏水色譜（Hydrophobicinteractionchromatography，簡(jiǎn)寫(xiě)HIC）肯定不陌生，血清蛋白、膜結(jié)合蛋白、核蛋白、受體、重組蛋白等化合物純化都需要用HIC色譜法。HIC在是利用樣品分子與固定相的疏水力作用的不同，用流動(dòng)相洗脫時(shí)，各組分遷移速度不同而達(dá)到分離的目的。疏水相互作用色譜法具有對(duì)蛋白質(zhì)的回收率高，蛋白質(zhì)不失活，蛋白質(zhì)變性可能性小等優(yōu)點(diǎn)。疏水作用色譜固定相的非極性比較弱，流動(dòng)相多采用高濃度鹽緩沖液進(jìn)行梯度洗脫。溫和的分離條件
2022
01-22

高效液相色譜故障排除
泄漏是HPLC分析中的常見(jiàn)問(wèn)題。為了最大限度地減少系統(tǒng)中的泄漏，請(qǐng)盡量選擇相同制造商的硬件。如果安裝不兼容的接頭，分離過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題，重復(fù)連接可能最終導(dǎo)致接頭泄漏。如果需要更換，請(qǐng)使用適當(dāng)?shù)倪m配器并在實(shí)驗(yàn)之前檢查所有連接是否泄漏。色譜柱篩板堵塞是另一個(gè)常見(jiàn)的HPLC故障問(wèn)題，想要從一開(kāi)始就盡量減少此問(wèn)題，請(qǐng)使用柱前過(guò)濾器和色譜保護(hù)柱。恒譜生的液相在線(xiàn)過(guò)濾器和保護(hù)柱預(yù)柱能夠過(guò)濾掉流動(dòng)相中的污染物，保護(hù)色譜柱免受樣品溶液中析出沉淀物的危害。平時(shí)要清潔進(jìn)樣口，首先斷開(kāi)并反轉(zhuǎn)色譜柱，將其連接到泵（
2022
01-18

如何生成真實(shí)的液相色譜分析結(jié)果？
作為一名液相色譜工作者，您最關(guān)心的還是生成真實(shí)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù)可以在任何其他實(shí)驗(yàn)室的相同條件下被普遍接受和重現(xiàn)。如果忽視*的規(guī)范，即使使用最復(fù)雜的工具也無(wú)法達(dá)到目的。系統(tǒng)適用性是在化學(xué)分析中生成有效數(shù)據(jù)的關(guān)鍵。液相色譜法，是從事制藥、食品、法醫(yī)學(xué)、聚合物、生命科學(xué)和環(huán)境研究的實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用廣泛的技術(shù)。數(shù)以千計(jì)的高效液相色譜儀在制藥行業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室工作，每天都會(huì)產(chǎn)生大量數(shù)據(jù)，這有助于開(kāi)發(fā)安全有效的藥物。在根據(jù)此類(lèi)數(shù)據(jù)做出決策之前，HPLC系統(tǒng)應(yīng)滿(mǎn)足系統(tǒng)適用性的要求至關(guān)重要。什么是系統(tǒng)適用
2022
01-12

色譜柱是什么？
色譜法是一種分離混合物中各組分的分析技術(shù)。色譜柱是色譜中使用的儀器的一部分。使用柱的五種色譜方法是氣相色譜（GC），液相色譜（LC），離子交換色譜（IEC），尺寸排阻色譜（SEC）和手性色譜。色譜的基本原理可以應(yīng)用于所有五種方法，今天我們分享其中兩種方法——?dú)庀嗌V柱和高效液相色譜柱。氣相色譜柱在氣相色譜中，流動(dòng)相是氣體。氣相色譜柱的長(zhǎng)度通常在1至100米之間。氣相色譜法（GC）：液相固定相結(jié)合或吸附到毛細(xì)管柱的表面上，或結(jié)合到柱內(nèi)填充的固體載體上。匹配分析物和固定相的極性?xún)烧呔哂邢嗨频臉O性，固
2022
01-12

高通量液相色譜中進(jìn)樣的注意事項(xiàng)
近年來(lái)，為減少分析時(shí)間和提高分析通量而誕生的超高效液相色譜技術(shù)取得了令人矚目的發(fā)展。超高效液相色譜儀器能夠承受更高系統(tǒng)壓力和流速，并且分析速度和效率大大提升；檢測(cè)器模塊的改進(jìn)和新的數(shù)據(jù)處理算法也有效提升信號(hào)采集的速率；現(xiàn)代色譜柱技術(shù)的發(fā)展，即使是很短的柱長(zhǎng)也能提供足夠高效色譜分離效率，比如恒譜生液相色譜柱有30、50、75、100、150、200、250和300mm等多種長(zhǎng)度。高效的分離技術(shù)歸功于液相硅膠色譜填料，通過(guò)恒譜生的先進(jìn)的技術(shù)處理，金屬含量極低的99.9%超高純度球型多孔硅膠在孔徑、孔
2022
01-07

液相色譜柱柱壓突然升高的常見(jiàn)原因分析和解決辦法
液相色譜柱在工作的時(shí)候常見(jiàn)的就是色譜柱柱子壓力增高，如果液相色譜柱是在工作使用的過(guò)程中緩慢增加的話(huà)，那么屬于正?，F(xiàn)象，如果色譜柱柱壓是突然一下子就增加了，我們先排除管路堵塞或者壓力傳感器故障除外，可能會(huì)是下面幾個(gè)原因：1、液相色譜柱頭的過(guò)濾篩板堵塞或污染；2、液相色譜柱頭的填料被樣品污染；3、流動(dòng)相PH值過(guò)大或過(guò)小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解；4、液相色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機(jī)溶劑，形成結(jié)晶析出。針對(duì)以上四大原因，我們提出了以下四大解決方案：1、如確定是液相色譜柱頭的過(guò)濾篩板被污染
2021
12-29

淺析反相色譜柱使用和維護(hù)
反相色譜柱是我們應(yīng)用廣泛的色譜柱類(lèi)型，反相色譜柱鍵合相主要包括：C18、C8、C4、Phenyl、aQ、等。對(duì)于以上色譜柱，我們?cè)谑褂眉熬S護(hù)的時(shí)候可以按照同樣的操作方式：1、在條件允許情況下，在使用前最好對(duì)新色譜柱按照說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行柱效測(cè)試。以確保色譜柱的正常。2、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃。3、樣品最好將樣品溶解在流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，最好使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過(guò)濾。樣品溶液如
2021
12-28

來(lái)看看色譜柱填料都有哪些種類(lèi)
現(xiàn)代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，首先必須對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。下面將對(duì)幾種常見(jiàn)的色譜柱填料極其各種的性能做各一個(gè)簡(jiǎn)要的介紹。（1）硅膠填料硅膠填料主要應(yīng)用正相色譜及反相色譜柱中，正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團(tuán)，如胺基團(tuán)(NH2,APS)和氰基團(tuán)（CN，CPS）的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其他團(tuán)的極性較強(qiáng)，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小，即極性強(qiáng)弱
2021
12-28

如何維護(hù)超高效液相色譜柱？
使用高效液相色譜(HPLC)來(lái)分析樣品被廣泛應(yīng)用于藥物組分分析、食品添加劑測(cè)定和環(huán)境樣品測(cè)試等。由于液相色譜柱是許多實(shí)驗(yàn)室的核心設(shè)備且成本高昂，因此保護(hù)柱子免受損壞是延長(zhǎng)色譜柱壽命和降低成本的首要考慮因素。維護(hù)良好的色譜柱還能產(chǎn)生一致且準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，為可靠的分析結(jié)果提供支持。如何提高分析色譜柱性能？色譜柱性能取決于多種因素，包括樣品特性、不溶性顆粒的存在以及使用后的清潔維護(hù)等。但是在使用過(guò)程中，并不是所有實(shí)驗(yàn)條件都是理想條件。例如，某些樣品具有苛刻但必要的pH條件。因此，對(duì)于液相分析柱的預(yù)防性維護(hù)
2021
12-28

HPLC級(jí)溶劑在HPLC分析中的重要性
液相色譜儀除了日常維護(hù)保養(yǎng)外，使用高純度溶劑不僅能保護(hù)液相系統(tǒng)，也能增加結(jié)果的可靠性。HPLC級(jí)表示化學(xué)試劑的純度，是可在高效液相色譜中使用的試劑的純度，制備色譜法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC級(jí)試劑。樣品在注入液相系統(tǒng)前，必須選擇一種合適的HPLC溶劑。在反相高效液相色譜中，當(dāng)樣品溶劑與流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度有差異,尤其是前者的洗脫強(qiáng)度較強(qiáng)時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生峰的變形及柱效的降低。解決該問(wèn)題有效的方法是使用流動(dòng)相作為溶劑溶解樣品,這樣既可以避免樣品溶劑和流動(dòng)相之間任何強(qiáng)度或粘度的不匹配，也可以
2021
12-21

HPLC、UHPLC 樣品制備時(shí)該注意些什么？
樣品過(guò)濾是制備色譜分析樣品的關(guān)鍵步驟。實(shí)驗(yàn)前如果不過(guò)濾樣品會(huì)導(dǎo)致色譜柱篩板堵塞等問(wèn)題，從而導(dǎo)致背壓增高和色譜柱性能下降。最終，這會(huì)增加花在色譜儀故障排除和維護(hù)上的時(shí)間，浪費(fèi)時(shí)間也增加科研人員的工作量。對(duì)于大多數(shù)類(lèi)型的樣品，過(guò)濾處理相對(duì)比較簡(jiǎn)單。在進(jìn)樣前用溶劑進(jìn)樣口過(guò)濾器對(duì)流動(dòng)相過(guò)濾。這一步也非常重要，用色譜過(guò)濾頭可有效濾除流動(dòng)相中的固體顆粒雜質(zhì)；未經(jīng)過(guò)濾的溶劑或溶劑瓶中生長(zhǎng)的微生物都會(huì)降低液相色譜柱和泵的性能。使用一段時(shí)間后需要定期清洗或更換溶劑入口濾頭。在食品和飲料行業(yè)分析時(shí)，一些濃糖漿、果肉
2021
12-21

分析規(guī)模和制備規(guī)模的HPLC有何不同？
HPLC一般指高效液相色譜，是一種多功能的分析方法，可對(duì)各種化合物進(jìn)行分離和定量。它廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用、藥物分析、食品分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、精細(xì)化工產(chǎn)品分析等眾多領(lǐng)域。HPLC的技術(shù)都具有基本原理，比如樣品引入，色譜柱中樣品組分的分離以及最后使用多種檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。想了解制備型HPLC要先對(duì)分析型HPLC進(jìn)行初步研究，兩種技術(shù)之間的基本區(qū)別是操作規(guī)模，下面將重點(diǎn)介紹區(qū)別：明確分析的目標(biāo)在進(jìn)行分析之前，你應(yīng)該對(duì)分析目標(biāo)有清楚的了解。你是希望獲得有關(guān)樣品成分純度的信息然后進(jìn)行定性，還是希望能快
2021
12-14

液相色譜分析使用秘訣，你學(xué)會(huì)了嗎？
液相色譜儀是比較常用的實(shí)驗(yàn)室儀器，但是即使是經(jīng)驗(yàn)豐富的人也容易忽略一些小細(xì)節(jié)，別小看這些被忽略的細(xì)節(jié)，很可能會(huì)影響你的色譜儀器或者是分析結(jié)果！一些小故障也是由于不注重細(xì)節(jié)產(chǎn)生的，色譜新手也需要注意！流動(dòng)相一定要過(guò)濾！有些色譜操作者可能會(huì)想，我不是用的分析級(jí)的純水流動(dòng)相嗎？為什么還要過(guò)濾呢？答案是：新制備好的流動(dòng)相，在室內(nèi)靜置幾天后，容易滋生細(xì)菌。特別是南方，夏季炎熱更容易滋生細(xì)菌污染了流動(dòng)相！恒譜生建議：流動(dòng)相即配即用，如果要用間隔時(shí)間比較久的流動(dòng)相，一定要過(guò)濾！否則滋生細(xì)菌會(huì)堵塞色譜柱填料里的
2021
12-13

藥物溶出度儀過(guò)濾器該如何選擇？
藥物溶出度儀過(guò)濾器是藥物質(zhì)量控制(QC)和藥物開(kāi)發(fā)中藥物溶出測(cè)試的重要部件。當(dāng)樣品從溶出容器中取出時(shí)，溶出度測(cè)試通過(guò)測(cè)量在特定時(shí)間點(diǎn)溶解的活性藥物成分(API)的量來(lái)確定藥物從劑型中釋放的速度。過(guò)濾在溶出度測(cè)試中起著關(guān)鍵作用，藥物溶出度儀過(guò)濾器的效率取決于未溶解的藥物顆粒大小，可以攪拌樣品促使藥物顆粒溶解。使用過(guò)濾器可以有效避免藥物顆粒進(jìn)入管路系統(tǒng)，也能避免因取樣高度差異引起的實(shí)驗(yàn)誤差。像恒譜生不銹鋼溶出度儀在線(xiàn)過(guò)濾器對(duì)樣品無(wú)吸附，這對(duì)藥物分析是非常重要的，并且恒譜生溶出度儀過(guò)濾頭采用新穎的全流
2021
12-09

反相高效液相色譜柱的使用注意事項(xiàng)
在使用反相高效液相色譜柱的過(guò)程中，操作是否得當(dāng)，維護(hù)是否到位會(huì)直接影響色譜柱的使用壽命和效果，因此了解反相高效液相色譜柱使用與維護(hù)的注意事項(xiàng)十分重要。為盡可能減少日常中不正確色譜操作對(duì)反向液相色譜柱的損壞，以下收集了目前對(duì)反相高效液相色譜柱的適用與維護(hù)注意事項(xiàng)：1.反相高效液相色譜柱在進(jìn)行安裝拆卸以及更換時(shí)，對(duì)接口處要擰緊但動(dòng)作要輕，力量要適度，盡可能防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng)，以避免安裝等步驟出現(xiàn)機(jī)床空隙。2.溫度和壓力的突然變化和機(jī)械震動(dòng)會(huì)影響反向高效液相色譜柱的填充狀況，因此要控制好溫度以及壓力的
2021
12-08

色譜人看過(guò)來(lái)！HPLC和GC之間的相同點(diǎn)不可不懂！
在前幾期文章中，我們討論了HPLC和GC的不同之處—?dú)庀嗌V（GC）和高效液相色譜（HPLC）有何不同？（點(diǎn)擊可查看原文）在這期文章中我們將討論HPLC和GC之間相同的功能，再一次深入學(xué)習(xí)他們之間的共通性。1.基本原理相同分離混合物的成分，對(duì)其進(jìn)行識(shí)別和定量是這兩種技術(shù)的共同基本目標(biāo)。最大的相同點(diǎn)就是：它們都是利用物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中分配系數(shù)不同而分離的。2.流動(dòng)相的作用HPLC和GC儀器使用時(shí)都需要用到流動(dòng)相，流動(dòng)相起著相同的作用：將需要檢測(cè)的組分以順序的方式運(yùn)輸?shù)綑z測(cè)器。雖然它們按照相同的
2021
12-04

如何分析高效液相色譜圖？
高效液相色譜法中，對(duì)色譜圖分析是很重要的。你可以將色譜圖看成一個(gè)橫縱坐標(biāo)為時(shí)間與數(shù)據(jù)的二維圖。固定相則是像海綿一樣的柱子，里面很多孔洞讓樣品流動(dòng)，由于每個(gè)樣品物質(zhì)的吸附能力不同，在色譜圖中會(huì)有不同的峰形。保留時(shí)間是樣品通過(guò)高效液相色譜柱所需要的時(shí)間，你在使用相同的流動(dòng)相和色譜柱分析同一樣品時(shí)，出現(xiàn)的保留時(shí)間應(yīng)該是固定的。如果保留時(shí)間不同可能是里面有雜質(zhì)造成影響。在液相色譜分離過(guò)程中，容易出現(xiàn)色譜圖中未出峰、一個(gè)或者多個(gè)峰是負(fù)峰、寬峰、雙峰、拖尾峰等問(wèn)題，我們稱(chēng)之為鬼峰。鬼峰來(lái)源復(fù)雜且多樣，主要來(lái)
2021
11-30

HPLC溶劑選擇中的關(guān)鍵考慮因素
選擇用作HPLC分析流動(dòng)相的溶劑是色譜分析過(guò)程的關(guān)鍵步驟。到現(xiàn)在為止，沒(méi)有一種能夠滿(mǎn)足所有分析需求的通用溶劑，而且根據(jù)分析要求所使用的溶劑組合會(huì)變得更多。選擇合適的溶劑是根據(jù)其物理性質(zhì)以及與樣品、色譜柱固定相的相容性。流動(dòng)相溶劑選擇的一般要求是：溶劑應(yīng)當(dāng)是高純度，溶劑與固定相不互溶，并能保持色譜柱的穩(wěn)定性，建議使用純水或者液相色譜專(zhuān)用的溶劑；溶劑的性能與使用的檢測(cè)器應(yīng)當(dāng)匹配；溶劑對(duì)樣品應(yīng)有足夠的溶解能力，樣品要*溶于流動(dòng)相。如果有不溶的樣品將導(dǎo)致流動(dòng)相分離或懸浮，會(huì)導(dǎo)致后續(xù)一系列的操作問(wèn)題；溶劑

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