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上海莼試生物技術(shù)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)Apx基因探針?lè)╭PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟2025/07/25
番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)Apx基因探針?lè)╭PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟在完成反應(yīng)體系配制后,將PCR管或96孔板短暫離心,確保液體集中于管底,避免氣泡干擾。隨后將反應(yīng)板置于qPCR儀中,按照以下程序設(shè)置擴(kuò)增條件:1.預(yù)變性階段:95℃維持30秒,充分激活DNA聚合酶并打開(kāi)模板二級(jí)結(jié)構(gòu);2.循環(huán)擴(kuò)增階段:95℃變性5秒,60℃退火/延伸30秒(根據(jù)引物Tm值可微調(diào)),重復(fù)40個(gè)循環(huán);3.熔解曲線分析(可選):從60℃緩慢升溫至95℃,每0.5℃采集一次熒光信號(hào),驗(yàn)證擴(kuò)增特異性。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需注意:-陰性對(duì)照:設(shè)置無(wú)模
水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)SPS基因染料法qPCR試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則2025/07/18
水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)SPS基因染料法qPCR試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則:1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液體
木絲霉PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則2025/06/25
木絲霉PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則:1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避
蟹源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)2025/05/29
蟹源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線
鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基傳代2025/05/15
鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基傳代1)當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到85%以上時(shí),可進(jìn)行傳代。2)在生物安全柜內(nèi),打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口,收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基;3)向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入3ml無(wú)菌的1×PBS后,水平放置培養(yǎng)瓶,使PBS能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,吸棄PBS;4)向瓶?jī)?nèi)加入消化液1ml,浸潤(rùn)底面后放入37℃CO2培養(yǎng)箱中孵育1~2min;5)孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml含10%FBS的培養(yǎng)基中,將懸液吸入15ml離心管;①準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的15m
亞巴猴腫瘤病毒病毒PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則2025/04/16
亞巴猴腫瘤病毒病毒PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則:1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔
無(wú)乳鏈球菌(StA)核酸檢測(cè)試劑盒使用方法2025/03/26
無(wú)乳鏈球菌(StA)核酸檢測(cè)試劑盒使用方法:1.樣品處理(樣本處理區(qū))1.1樣本前處理按照試劑盒操作說(shuō)明或者微生物樣品處理方法做好樣品前處理。1.2DNA提取根據(jù)您實(shí)驗(yàn)室的具體情況和樣品類型,選擇適當(dāng)?shù)奶崛〔呗苑椒?。為了使?shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定、有效、可靠,我們建議使用商品化的試劑盒進(jìn)行提取,嚴(yán)格按照對(duì)應(yīng)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,樣本核酸提取過(guò)程中應(yīng)避免污染,提取好的模板樣品如不能立即檢測(cè),建議-15℃以下保存。推薦采用我們公司研發(fā)生產(chǎn)的試劑盒:Hypure病毒基因組DNA提取試劑盒2.試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
GPCR19激動(dòng)劑(TGR5 Receptor Agonist)實(shí)驗(yàn)報(bào)告2025/03/20
GPCR19激動(dòng)劑(TGR5ReceptorAgonist)實(shí)驗(yàn)報(bào)告:一、分離與培養(yǎng):1、無(wú)菌條件下,取出1-3d齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?、往組織塊中加入4mL酶消化液(0.1%和0.1%I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10%FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10min后,按上述方法收集上清并終止消化后4
腺病毒D型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒反應(yīng)五要素2025/03/12
腺病毒D型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長(zhǎng)度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。③引物堿基:G+C含量以40-
原代人牙髓干細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)2025/02/08
原代人牙髓干細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采
乳酸桿菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒使用方法2025/01/24
乳酸桿菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒使用方法:一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DN
大鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153elisa試劑盒?操作步驟2025/01/16
大鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153elisa試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第
大鼠干擾素αelisa試劑盒洗滌方法2024/12/18
大鼠干擾素αelisa試劑盒洗滌方法:1.自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。2.手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于
小鼠神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)2024/12/04
小鼠神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用
淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)方法2024/11/01
淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)方法:1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基
油菜內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)BnACCg8基因染料法qPCR試劑盒反應(yīng)的特異性決定因素2024/10/23
油菜內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)BnACCg8基因染料法qPCR試劑盒反應(yīng)的特異性決定因素為:①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;②堿基配對(duì)原則;③TaqDNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及TaqDNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
D型-過(guò)氧化酶活化增生受體抗體?技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟2024/10/17
D型-過(guò)氧化酶活化增生受體抗體技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH
大鼠骨骼肌組織提取物操作流程2024/09/09
大鼠骨骼肌組織提取物操作流程:1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本olympusimt-413),co2孵箱(日本yamatoit-61)。1.2hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:1.2.1細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液,以1×1
小鼠心鈉肽ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟2024/09/05
小鼠心鈉肽ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
大鼠 E選擇素elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)2024/08/09
大鼠E選擇素elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).7.所有樣品,洗滌
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