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細胞結(jié)構(gòu)中的神奇細胞器：脂滴2024/01/30

今天我們要來聊一下細胞結(jié)構(gòu)里面的一個神秘小東西-脂滴沒錯沒錯，你沒看錯！這就是那些小小的圓圓的、像是浸泡在脂肪里的小球球！它們的外觀看起來就像是脂肪掉進了細胞里，而且它們還有著各種神奇的功能。那么，脂滴到底是什么呢？它們是由一種叫做“脂質(zhì)”的化學物質(zhì)組成的。脂滴是脂質(zhì)和能力穩(wěn)態(tài)中心的儲存細胞器。它們具有不一樣的結(jié)構(gòu)，由中性脂質(zhì)的疏水核心組成，該核心由磷脂單層包圍，磷脂單層由一組特定的蛋白質(zhì)修飾。脂質(zhì)本質(zhì)上就是脂肪酸和甘油的混合物，它們在細胞里的主要功能就是作為能量儲備。脂滴不僅僅是細胞內(nèi)的能量儲

實驗室常見有毒試劑2024/01/29

實驗室最毒的17種試劑：1DMSODMSO是二甲基亞砜，用途廣泛。用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶于水又溶于有機溶劑的極為重要的非質(zhì)子極性溶劑。對皮膚有非常強的滲透性，有助于藥物向人體滲透。也可作為農(nóng)藥的添加劑。也是一種十分重要的化學試劑。DMSO也是一種滲透性保護劑，能夠降低細胞冰點，減少冰晶的形成，減輕自由基對細胞損害，改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。但是研究表明，DMSO存在嚴重的毒性作用，與蛋白質(zhì)疏水集團發(fā)生作用，導致蛋白質(zhì)變性,

激活下丘腦中的這種神經(jīng)元，可顯著延長壽命、減緩衰老2024/01/26

近年來的研究提示，身體器官和組織之間的組織間通訊功能是衰老的關(guān)鍵調(diào)節(jié)器。當這些通訊暢通時，身體的器官和系統(tǒng)能夠很好地協(xié)同工作。但隨著年齡的增長，這些通訊會惡化，器官無法獲得正常運作所需的分子和電信號，導致各種衰老表型并限制壽命和健康壽命。在哺乳動物中，下丘腦充當高級「衰老控制中心」，抵消與年齡相關(guān)的病理生理變化，從而延長壽命，因此，維持下丘腦功能對于對抗衰老表型和延長壽命及健康壽命至關(guān)重要。這項研究發(fā)現(xiàn)，存在一條連接大腦和身體脂肪組織的關(guān)鍵通信通路，該通路似乎對全身能量產(chǎn)生至關(guān)重要，DMHPpp

多功能細胞因子IL-62024/01/24

簡介：白細胞介素-6（簡稱IL-6）是一種由免疫系統(tǒng)細胞細胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)分子，屬于細胞因子家族的一員。IL-6在免疫系統(tǒng)、炎癥反應和體內(nèi)平衡調(diào)節(jié)中起著重要作用。同時也參與了多種生理和病理過程。IL-6的作用方式與特點：免疫調(diào)節(jié)：IL-6在免疫系統(tǒng)中起著重要的調(diào)節(jié)作用，它能夠刺激白細胞（包括B細胞、T細胞和巨噬細胞）的增殖和分化，尤其是B細胞的活化，從而促進抗體產(chǎn)生。炎癥反應：IL-6作為典型的炎癥介質(zhì)，它在感染、組織損傷和炎癥過程中產(chǎn)生并釋放，從而參與調(diào)控各類炎癥反應（發(fā)熱、疼痛、紅腫和局部白細

細胞培養(yǎng)中究竟要不要加抗生素？2024/01/24

簡介：提到細胞污染，大家想到較多的是細胞中的細菌、渾濁的培養(yǎng)基、培養(yǎng)瓶中的非法入侵者等。此外，病毒和化學污染對細胞培養(yǎng)物的健康也非常重要，確保細胞株不存在交叉污染也是獲得可重復結(jié)果的關(guān)鍵因素?？刂莆廴镜年P(guān)鍵是如何檢測出污染。細菌、真菌和酵母污染物通常是肉眼可見的，或許能迅速殺死細胞，但微妙的形態(tài)可能使重要的微生物入侵者像支原體一樣難以被檢測到。相比之下，傳統(tǒng)光學顯微鏡無法檢測到病毒，因此病毒污染通常是在觀察到無法解釋的分離、細胞健康較差的其他跡象或甚至是細胞死亡時才被發(fā)現(xiàn)的?？偨Y(jié)：抗生素雖然減少

THP-1細胞的培養(yǎng)方法和注意事項2024/01/23

簡介：THP-1細胞是從急性單核細胞白血病患者外周血中分離出來的單核細胞，廣泛應用于單核細胞和巨噬細胞相關(guān)機制、信號通路等研究；形態(tài)和分化特性類似于原代單核細胞和巨噬細胞，在體外，常用PMA（phorbol12-肉豆酸酯13-乙酸酯）或1α，25(OH)2D3(1α，25-二羥基維生素D3或vD3)誘導分化THP-1細胞為巨噬細胞。因此，THP-1單核細胞已被開發(fā)為體外極化單核細胞來源的巨噬細胞的有吸引力的模型。原理：一、THP-1細胞的培養(yǎng)方法1.細胞復蘇準備工作：15/50mL的離心管，馬克

移液器的使用技巧2024/01/23

簡介：移液器是日常實驗中非常常見的儀器之一，正確使用移液器不僅可延長移液器的使用壽命，也可保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性，減少實驗誤差。目前較為常見的移液器品牌主要有德國Eppendorf移液器、法國Gilson移液器及國產(chǎn)Dragonmed移液器等，接下來就和大家分享移液器的使用方法及使用技巧供初學者參考，分享主要包括三個重要的方面，包括“使用前”、“使用中”及“使用后”。使用前：1.熟悉整個實驗流程，選擇適宜量程的移液器。常見的量程包括0.5-5ml、100-1000μl、20-200μl、10-10

細胞長不好的原因與解答！2024/01/23

細胞長不好的原因與解答：培養(yǎng)細胞不貼壁：可能原因：1.胰蛋白酶消化過度；2.支原體污染；3.培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）；4.細胞老化；5.接種細胞起始濃度太低或太高。解決方法1.縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度；2.分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物；3.使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO2；、4.啟用新的保種細胞；5.調(diào)節(jié)最佳接種細胞濃度。懸浮細胞成簇可能原因：1.培養(yǎng)液中含鈣,鎂離子；2.支原體污染；3.蛋白酶過度消化使得細胞裂解；4

Trizol法和柱式法RNA提取的實驗流程和注意事項2024/01/23

實驗原理：（一）Trizol法Trizol是一種酸性試劑，能從細胞和組織中快速分離RNA，其主要成分為異硫氰酸胍（GITC）和苯酚。裂解細胞后，GITC能使蛋白質(zhì)和RNase變性，有利于保護RNA的完整性；加入氯仿離心后，樣品分為水相和有機相，RNA存在于上層水相中，而DNA和蛋白質(zhì)則存在于中間層及下層有機相中，從而達到分離的目的。簡單來講就是裂解細胞使RNA得以釋放，加之有機溶劑使RNA與DNA、蛋白質(zhì)分離，并進一步純化得到RNA的過程。試劑、儀器與耗材：Trizol試劑、氯仿、異丙醇、75%

CHO細胞培養(yǎng)技術(shù)經(jīng)驗分享2024/01/22

簡介：CHO細胞（Chinesehamsterovarycell，CHO）一個轉(zhuǎn)化細胞系，1957年從中國倉鼠卵巢細胞得到。CHO細胞目前是現(xiàn)代制藥企業(yè)進行研發(fā)、生產(chǎn)生物治療藥物(單抗、酶、激酶和激素等)中常用的非人類哺乳動物細胞系。原理：培養(yǎng)基無特殊要求，可有多種選擇,一般用DMEM（高糖）培養(yǎng)基+10%胎牛血清+2%雙抗。置于37℃,5%CO2的培養(yǎng)箱培養(yǎng)。每隔48h換液，或當培養(yǎng)基呈現(xiàn)熒光黃色及時換液，否則細胞會出現(xiàn)大規(guī)模脫落和變形死亡。當單層培養(yǎng)細胞匯合達90%以后(兩天左右)，棄去培養(yǎng)

用于μ細胞培養(yǎng)載玻片的架子2024/01/22

用于存儲和處理µ-Slides的架子µ-Slide底部不會被劃傷可輕松將載玻片從培養(yǎng)箱和工作臺之前來回移動油浸顯微鏡檢查后的理想儲存可放置八張載玻片技術(shù)特點：并行處理最多八張µ-Slide可堆疊允許通過µ-Slides底部輕松進行氣體交換規(guī)格：長*寬：215*90平方毫米高度：24.5毫米可堆疊：是的兼容于：ibidiu-Slides顯微鏡載玻片材料：陽極氧化鋁消毒：可高壓滅菌，酒精應用：µ-載玻片在培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)儲存實驗期間u-slides的處理深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的

細胞培養(yǎng)如何杜絕污染？2024/01/22

下表列出了幾乎所有的需要注意的細節(jié)，大家可以對照自己的操作和習慣進行檢查，也可以將圖片下載保存或者收藏，等到自己成為大師兄，就有材料“教育“小師弟啦！工作區(qū)域：1.細胞培養(yǎng)通風櫥設置是否正確？2.細胞培養(yǎng)通風櫥所在區(qū)域有無氣流和直接出入通道？3.工作臺面是否整潔？4.是否僅僅放置了實驗所需的物品？5.開始工作前用70%乙醇擦拭工作臺面了嗎？6.是否定期對培養(yǎng)箱、冰箱、冰柜及其他實驗設備進行清潔和消毒？個人衛(wèi)生：1.您洗手了嗎？2.您穿戴個人防護設備了嗎？3.如果您留了長發(fā)，頭發(fā)是否扎在后面了？4

細胞爬片免疫組化染色實驗步驟2024/01/22

原理：免疫組織化學技術(shù)：檢測組織原位表達的肽類、激素、神經(jīng)遞質(zhì)、細胞因子、受體、表面抗原等抗原性物質(zhì)。（一）組織和細胞標本的準備組織標本的取材-取材新鮮，固定及時，形態(tài)完好。細胞標本的準備（1）活體細胞標本：印片法、穿刺吸取法、沉淀法（2）培養(yǎng)細胞標本：①細胞涂片:將細胞制成懸液（10^6）涂在涂有切片粘合劑的載玻片上，晾干后固定（細胞甩片）。②細胞爬片:將細胞直接培養(yǎng)在蓋玻片上將細胞直接培養(yǎng)在6孔或9孔板上。3.固定(1)保持形態(tài)：終止和抑制外源性和內(nèi)源性酶活性，防止組織細胞的死后變化，防止自

H22細胞培養(yǎng)流程及注意事項2024/01/18

簡介：小鼠肝癌細胞H22（武漢普諾賽）又稱Hepatoma-22或Hepatoma22，其分離自Balb/c小鼠腹水，由大連醫(yī)科學院建立。H22細胞為懸浮細胞，細胞形態(tài)呈淋巴母細胞樣。H22細胞常用于小鼠肝癌組織造模，在評估抗腫瘤藥物的療效、探究腫瘤微環(huán)境對肝癌進展的影響、揭示肝癌發(fā)生發(fā)展中的分子機制等方面的研究中有著廣泛應用。主要耗材及儀器：15ml離心管、50ml離心管、凍存管、巴氏滴管、培養(yǎng)瓶、封口膜、CO2培養(yǎng)箱、離心機、顯微鏡、生物安全柜、RPIM-1640、胎牛血清（FBS）、青-鏈

小鼠骨髓細胞染色體標本制作實驗2024/01/18

實驗原理：在小鼠骨髓細胞中，有絲分裂旺盛，因此可以直接得到中期細胞而不必像血淋巴細胞那樣要經(jīng)過體外培養(yǎng)。骨髓細胞具有高度的分裂活性，經(jīng)秋水仙素（秋水仙堿）處理后，使分裂細胞阻斷在有絲分裂中期，再經(jīng)低滲處理、固定、滴片、染色等步驟，可制作較好的骨髓細胞的染色體標本。通過骨髓得到染色體是比較簡便的，一般也無需無菌操作。在臨床上多用于白血病的研究，在實驗條件下，這種染色體是機體內(nèi)真實情況的反映，而且用骨髓制片的方法易于觀察毒性物質(zhì)在體內(nèi)對細胞和染色體的影響。實驗方法和步驟：(一)秋水仙素處理取骨髓前3

細胞培養(yǎng)時的三個常見小問題2024/01/18

三個常見小問題：細胞培養(yǎng)用的培養(yǎng)基是不是必須加雙抗？血清在使用之前是不是一定要滅活？往培養(yǎng)基里加細胞因子又是什么操作？要不要加雙抗？在培養(yǎng)基中添加抗生素是一種常見的操作，其主要作用是抑制或殺死培養(yǎng)物中的某些細菌或真菌，從而避免它們對目標細胞的干擾和污染。在培養(yǎng)實驗中，選擇適當濃度和種類的抗生素，可以有效地消除或減少雜菌、污染菌或其他不需要的微生物，保證培養(yǎng)物的純度和穩(wěn)定性。同時，添加抗生素還可以用來篩選或檢測耐藥性菌株，評估其對抗生素的敏感性和耐受性。但是，添加抗生素并不能確保你的細胞一定不被微

ibidi 載玻片|優(yōu)化活細胞培養(yǎng)2024/01/18

簡介：免疫熒光技術(shù)是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術(shù)的基礎上建立起來的一項技術(shù)。傳統(tǒng)實驗方法用小玻片，先泡酸、再晾干、再coating、再種細胞、染色、封片成像。本文章使用新方法，我們將描述在通道載玻片內(nèi)培養(yǎng)大鼠成纖維細胞（Rat1）的單個實驗案例。然后，我們用AlexaFluor®488鬼筆環(huán)肽染色F-肌動蛋白細胞骨架，并用DAPI對細胞核進行復染。實驗步驟：培養(yǎng)，固定，染色，成像培養(yǎng)：1.在無菌條件下打開ibidiμ-Slide并將其放在μ-Slide架（80003）上。將Rat1細胞懸浮液加

大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)原代培養(yǎng)經(jīng)驗總結(jié)2024/01/17

簡介：BMSCs即為骨髓間充質(zhì)干細胞，是骨髓中基質(zhì)細胞，是骨髓的支持結(jié)構(gòu)，并可作為滋養(yǎng)層支持骨髓中造血干細胞的生長，因此也被稱為骨髓基質(zhì)干細胞。作為干細胞的一種，它同樣具有多向分化潛能，在一定的環(huán)境和細胞因子的作用下，可被誘導分化為骨細胞、神經(jīng)元樣細胞、脂肪細胞、軟骨細胞、心肌細胞等。其可被定義為具有多分化能力并且能自我更新復制的骨髓間質(zhì)細胞。其各項優(yōu)點，使得它在臨床干細胞移植治療中顯示出極大的應用場景。目前已廣泛使用在修復軟骨損傷、神經(jīng)細胞再生等領(lǐng)域。材料與儀器:燒杯、眼科剪、鑷子、紗布、巴氏

貼壁細胞和懸浮細胞如何傳代？2024/01/17

1.貼壁細胞如何進行傳代？去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次;棄PBS，再加1.5ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4ml左右（血清）細胞培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min;棄上清，細胞沉淀用（血清）細胞培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8)，每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5

CO-IP實驗操作及注意事項2024/01/16

原理：CO-IP（免疫共沉淀）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X，那么與X結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來。從原理示意圖可見，免疫共沉淀利用抗原（紅三角）與蛋白(藍圓柱)的特異性結(jié)合，再通過連接著樹脂的抗體(紫圓球)去識別抗原，從細胞裂解液或者蛋白混合物中捕獲與抗原相作的蛋白。之后通過進一步洗脫，獲取抗原-蛋白復合物，再對蛋白進行檢測。一、蛋白樣品制備裂解提取出免疫沉淀需要的蛋白樣品，以下為HEK293T細胞樣品的處理方法，其余的樣品