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深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年
線粒體功能檢測(cè)方法2024/03/05
線粒體是決定細(xì)胞命運(yùn)的重要樞紐,在細(xì)胞生理變化、信號(hào)傳導(dǎo)通路和新陳代謝等方面具有重要調(diào)節(jié)功能,對(duì)細(xì)胞的增殖、分化、存活以及穩(wěn)態(tài)的維持起著重要的調(diào)節(jié)作用。線粒體參與腫瘤、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、糖尿病、免疫性疾病等眾多疾病的發(fā)生發(fā)展。線粒體與各項(xiàng)疾病研究的關(guān)聯(lián)性在于,線粒體是產(chǎn)生能量的重要細(xì)胞器,當(dāng)其機(jī)能下降時(shí),細(xì)胞的活性也會(huì)下降。線粒體參與生物的生長(zhǎng)、發(fā)育、代謝、衰老、疾病、死亡過(guò)程并進(jìn)行調(diào)控或信號(hào)傳導(dǎo),它還參與細(xì)胞內(nèi)Ca2+的穩(wěn)態(tài)調(diào)控、活性氧的產(chǎn)生以及細(xì)胞色素C的釋放等這些代謝過(guò)程,線粒體
實(shí)驗(yàn)小鼠的選擇及灌胃操作2024/03/05
一、實(shí)驗(yàn)小鼠合適周齡的選擇小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育和人相比要迅速很多,4-6周小鼠身體各個(gè)器官已逐漸成熟;6-8周可到達(dá)性成熟;3-6月小鼠步入成年期。一般情況下選擇6-8周小鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,此時(shí)小鼠身體各個(gè)器官發(fā)育成熟,生命健康指數(shù)良好,并且在之后的2-3個(gè)月的實(shí)驗(yàn)周期中,小鼠各個(gè)方面都處于很健康的狀態(tài)。注意:1.訂購(gòu)時(shí)小鼠要選比實(shí)驗(yàn)要求小1-2周的,因?yàn)橐话阈∈筮M(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后需要適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后才能開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。2.特殊情況下可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇不同周齡的小鼠,如成瘤性檢查法使用的裸鼠為4-7周齡;老年病或老
電子分析天平的使用方法2024/03/04
簡(jiǎn)介:電子分析天平是采用電磁力平衡的原理。稱盤與通電線圈相連接,置于磁場(chǎng)中,當(dāng)被稱物置于稱盤后,因重力向下,線圈上就會(huì)產(chǎn)生一個(gè)電磁力,與重力大小相等方向相反。傳感器輸出電信號(hào)。因此產(chǎn)生的電信號(hào)通過(guò)模擬系統(tǒng)后,將被稱物品的質(zhì)量顯示出來(lái)。1.天平是一種衡器,是衡量物體質(zhì)量的儀器;2.天平不是質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)器具--砝碼才是標(biāo)準(zhǔn)器具;3.天平只是計(jì)量器具,其準(zhǔn)確性由標(biāo)準(zhǔn)器具-砝碼判定;4.砝碼的校準(zhǔn)和檢驗(yàn)由天平來(lái)判斷,砝碼級(jí)別越高,對(duì)天平的重復(fù)性要求越高。二、天平安裝條件1、稱量結(jié)果準(zhǔn)確性的環(huán)境因素溫度、濕
-腫瘤壞死因子a2024/03/04
腫瘤壞死因子α(TNF-α)是一種連接炎癥和免疫系統(tǒng)的關(guān)鍵細(xì)胞因子,分子量為17kDa或26kDa。TNF可由生物體內(nèi)的多種細(xì)胞產(chǎn)生,包括活化的巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞。其中,主要由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的TNF被命名為TNF-α[1],具有細(xì)胞增殖、代謝激活、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞死亡等多種生物學(xué)功能。TNF-α的分泌與活化:TNF-α以兩種形式存在:跨膜TNF-α(tmTNF-α)和可溶性TNF-α(sTNF-α)。tmTNF-α以II型跨膜肽的形式在活化的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等表面表達(dá),該肽由233個(gè)氨
DNA復(fù)制的藝術(shù):PCR技術(shù)的演變史2024/03/01
按照PCR技術(shù)的演進(jìn),我們可以將PCR技術(shù)大致劃分為三代:傳統(tǒng)PCR技術(shù),實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和數(shù)字PCR技術(shù)。第一代:傳統(tǒng)PCR技術(shù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的基本原理是利用DNA聚合酶在特定條件下復(fù)制特定DNA片段,通過(guò)反復(fù)的循環(huán),這個(gè)特定的DNA片段可以被大量復(fù)制或放大。PCR過(guò)程主要包括以下三個(gè)步驟:變性(Denaturation):在高溫(通常為94-96°C)下,DNA雙鏈被分離成兩條單鏈。這是因?yàn)镈NA雙鏈之間的氫鍵在高溫下會(huì)斷裂。退火(Annealing):降低溫度(通常在50-
下一代減肥神藥?副作用小還不反彈,通過(guò)抑制能量攝入實(shí)現(xiàn)減肥功效2024/02/29
肥胖是一種全球性的公共衛(wèi)生問(wèn)題,可導(dǎo)致糖尿病、心血管病等多種健康危害,如何科學(xué)減肥日益引起人們關(guān)注?,F(xiàn)有的減肥方法主要包括改變生活方式、藥物及手術(shù)治療,然而飲食方式和運(yùn)動(dòng)節(jié)律并非可以輕易改變,而手術(shù)則面臨一定程度的風(fēng)險(xiǎn),因此藥物治療更加收到青睞。但是,現(xiàn)有藥物也存在效果不明顯、產(chǎn)生依賴性、伴發(fā)不良反應(yīng)等問(wèn)題,如何開(kāi)發(fā)一種效果好、副作用小的減肥藥物成為相關(guān)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)問(wèn)題。近日,在NatureCommunications上發(fā)表了一篇名為Artesunatetreatsobesityinmalem
為什么要養(yǎng)成配mix習(xí)慣?2024/02/29
問(wèn)題:為什么管數(shù)多的時(shí)候要混成Mix再使用?一定要混成Mix嗎?不混不行嗎?感覺(jué)有的時(shí)候一個(gè)一個(gè)加還塊一點(diǎn),那為什么還要混為Mix再加樣嗎?1.便于吸出微量試劑:比如;有些酶類試劑,每管只加0.1微升,這個(gè)時(shí)候擴(kuò)大體系就很重要2.避免重復(fù)性步驟:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,重復(fù)次數(shù)越多,就意味著失敗的概率會(huì)增加,所以,為了避免實(shí)驗(yàn)冗余步驟,混成Mix再一次性加樣最為合適3.保護(hù)試劑安全:再用酶類試劑舉例,如果一個(gè)一個(gè)加的話,那么試劑暴露在室溫的時(shí)間就會(huì)增加,而酶類很容易變性失活,所以,一次性吸取從而混成MIx
合成引物的dNTPs是怎么來(lái)的?2024/02/29
問(wèn)題:引物如何合成,那么這其中的原料(每種脫氧核苷酸)是怎么生產(chǎn)出來(lái)的呢?來(lái)簡(jiǎn)單回顧一下每種核苷酸在生物體內(nèi)的合成過(guò)程:脫氧腺苷酸(dA):腺苷酸(Adenosinemonophosphate,AMP)是dA的前體。在細(xì)胞內(nèi),AMP可以通過(guò)一些列酶促反應(yīng)被轉(zhuǎn)化為dAMP(脫氧腺苷酸)。這個(gè)過(guò)程涉及脫去一個(gè)羥基(OH)團(tuán),使得核糖(ribose)變?yōu)槊撗鹾颂牵╠eoxyribose)。脫氧胸腺嘧啶酸(dT):在生物體內(nèi),dT是通過(guò)一個(gè)稍微復(fù)雜的途徑合成的。首先,尿嘧啶(Uridine)被轉(zhuǎn)化為胸腺
瓊脂糖凝膠電泳的常見(jiàn)問(wèn)題&分析2024/02/29
(一)同樣大小的DNA一起跑電泳,怎么條帶不一樣大?DNA條帶不一樣大,本質(zhì)上是DNA在凝膠中的遷移率不一樣,有的跑得快,有的慢,通常情況同樣大小的DNA,遷移率是一樣的,條帶位置也會(huì)一樣。但遷移率也受很多因素影響,例如DNA的構(gòu)象。例如環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA,和同等大小的線性DNA(例如單位點(diǎn)酶切后的質(zhì)粒),前者的遷移率要高,表現(xiàn)出來(lái)就是看上去超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA分子量好像小一點(diǎn)。(二)為什么有時(shí)候加大電泳的電壓,DNA會(huì)跑得快,但有時(shí)效果卻不明顯?在較低電壓時(shí),提高電壓,DNA的遷移率也會(huì)提高
瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)2024/02/29
一、瓊脂糖凝膠的特點(diǎn)核酸分子是兩性解離分子,在高于其等電點(diǎn)的電泳緩沖液中,其堿基不解離,而磷酸基團(tuán)全部解離,核酸分子因而帶負(fù)電荷,電泳時(shí)向正極遷移。瓊脂糖主要從海洋植物瓊脂中提取而來(lái)并經(jīng)糖基化修飾,為一種聚合鏈線性分子,使用瓊脂糖凝膠作為電泳支持介質(zhì),發(fā)揮分子篩功能,使得大小和構(gòu)象不同的核酸分子的遷移率出現(xiàn)較大差異,從而達(dá)到分離的目的。因此,目前多用瓊脂糖為電泳支持物進(jìn)行平板電泳,其優(yōu)點(diǎn)如下。(1)瓊脂糖凝膠電泳操作簡(jiǎn)單,電泳速度快,樣品不需事先處理就可以進(jìn)行電泳。(2)瓊脂糖凝膠結(jié)構(gòu)均勻,含水
實(shí)驗(yàn)新手如何提高實(shí)驗(yàn)效率及質(zhì)量?2024/02/28
每一位同學(xué)步入一個(gè)新環(huán)境后,對(duì)于新鮮的事物總是抱著又期待又害怕的態(tài)度,對(duì)于新生來(lái)說(shuō),進(jìn)入新的實(shí)驗(yàn)室、課題組以后也會(huì)面臨同樣的問(wèn)題,大多數(shù)同學(xué)包括我在內(nèi)都是比較著急的想開(kāi)始自己的實(shí)驗(yàn),抱著早開(kāi)始就可以早結(jié)束的態(tài)度,但整個(gè)過(guò)程又并非像我們所想的一樣一帆風(fēng)順。那么對(duì)于新手來(lái)說(shuō),如何高效率、高質(zhì)量的做實(shí)驗(yàn),我有以下建議和大家分享,希望對(duì)于剛剛開(kāi)始的你有所幫助。融入課題組與師兄師姐建立良好的合作關(guān)系,平時(shí)跟上他們?nèi)プ鰧?shí)驗(yàn),不要擔(dān)心給別人做實(shí)驗(yàn),感覺(jué)就是浪費(fèi)時(shí)間,動(dòng)手做實(shí)驗(yàn)是讓自己最快最容易上手的過(guò)程,而且
新冠-疫苗引發(fā)13種嚴(yán)重副作用,損傷心臟和神經(jīng)!接種后身體被毀,永獲賠償2024/02/28
前言:(新冠-疫苗)后遺癥,進(jìn)一步被揭開(kāi)!與罕見(jiàn)心臟病有關(guān),還能導(dǎo)致大腦和血液疾病!澳洲最新(新冠-疫苗)研究:或與多種罕見(jiàn)疾病有關(guān)從開(kāi)始接種之初,就引發(fā)了各種后遺癥。很多澳洲人都中招受傷。就在剛剛,澳洲和新西蘭研究人員聯(lián)合的一項(xiàng)研究證實(shí):輝瑞(Pfizer)、Moderna和阿斯利康(AstraZeneca)生產(chǎn)的疫苗與多種疾病的風(fēng)險(xiǎn)顯著升高有關(guān),包括罕見(jiàn)的心臟、大腦和血液疾病,還有一種導(dǎo)致人們難以行走或思考的神經(jīng)衰弱疾病。這幾款疫苗都被發(fā)現(xiàn)會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)、血液和心臟相關(guān)疾病的發(fā)病率上升。這項(xiàng)全球
線粒體調(diào)控與鐵死亡2024/02/28
簡(jiǎn)介:鐵死亡(Ferroptosis)的發(fā)生主要依賴于機(jī)體內(nèi)的鐵離子積累與脂質(zhì)過(guò)氧化,發(fā)生鐵死亡時(shí)細(xì)胞形態(tài)特征與凋亡、自噬等其他細(xì)胞死亡方式有明顯不同,線粒體形態(tài)變化尤其突出。線粒體作為生物體重要的一種細(xì)胞器,在細(xì)胞死亡中起到關(guān)鍵的作用,如細(xì)胞凋亡、壞死性凋亡、細(xì)胞焦亡,都有明確證據(jù)表明線粒體深度參與其中。目前線粒體是否直接參與鐵死亡仍在探索階段,但越來(lái)越多的研究表明線粒體ROS、鐵、能量等代謝途徑與鐵死亡過(guò)程密切相關(guān)。圖1.線粒體參與鐵死亡過(guò)程的潛在途徑[1]線粒體ROS與鐵死亡活性氧ROS與
Trizol法提取RNA:從樣本前處理到操作步驟2024/02/28
一、實(shí)驗(yàn)原理:Trizol試劑的主要成分是苯酚,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行裂解,使細(xì)胞中的蛋白質(zhì)以及核酸物質(zhì)解聚。苯酚雖然可以有效的使蛋白質(zhì)變性,但它不能全部抑制RNA酶的活性,因此Trizol中還加入了8-羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來(lái)抑制內(nèi)源和外源RNase(即RNA酶)。存放在Trizol中的樣品可以在負(fù)八十保存半年左右。二、樣本材料及其處理方法:貼壁培養(yǎng)細(xì)胞1.吸出培養(yǎng)液,細(xì)胞用預(yù)冷的1×PBS清洗兩次。2.吸出PBS洗液,然后每1×108-2×107的培養(yǎng)細(xì)胞中加入1ml的Trizol,輕搖培
吸煙通過(guò)DNA甲基化對(duì)機(jī)體免疫產(chǎn)生長(zhǎng)期影響,戒煙十年后傷害依舊存在2024/02/28
適應(yīng)性免疫(adaptiveimmunity)是人體免疫系統(tǒng)的一部分,負(fù)責(zé)識(shí)別和記憶特定的病原體,從而再次遇到相同病原體時(shí)可以迅速且有效地應(yīng)對(duì)。個(gè)體免疫反應(yīng)差異由年齡、性別和遺傳等因素影響,吸煙也是重要因素之一。目前,吸煙在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性硬化病和其他自身免疫性疾病中的作用及其潛在機(jī)制受到廣泛關(guān)注,吸煙通過(guò)免疫調(diào)節(jié)和化學(xué)性因子暴露等多種機(jī)制影響炎癥和自身免疫性疾病。吸煙被認(rèn)為是影響人類健康的主要風(fēng)險(xiǎn)因素之一,它不僅以多種癌癥、心血管疾病和呼吸系統(tǒng)疾病相關(guān),還被發(fā)現(xiàn)可以直接影響
好導(dǎo)師的16個(gè)標(biāo)準(zhǔn)2024/02/23
“在任何學(xué)科領(lǐng)域,是否有一個(gè)好導(dǎo)師都將決定學(xué)生的研究生涯初期的成敗”,甚至影響到學(xué)術(shù)以外的人生,一個(gè)差的導(dǎo)師甚至?xí)斐扇松谋瘎。热缃谝虿豢叭淌軐?dǎo)師壓榨在實(shí)驗(yàn)室自我毀滅的南郵同學(xué),那什么樣的導(dǎo)師是才是好導(dǎo)師呢?2005年,Nature創(chuàng)立了theNatureawardsformentoringinscience,用于表彰在指導(dǎo)研究生方面卓有成效的導(dǎo)師。有關(guān)人員廣泛收集總結(jié)了學(xué)生們對(duì)其導(dǎo)師的評(píng)價(jià),總結(jié)成了給導(dǎo)師的16條建議,如對(duì)學(xué)生的智力與能力的尊重,對(duì)學(xué)生職業(yè)發(fā)展(甚至選擇非學(xué)術(shù)道路)的尊重
實(shí)驗(yàn)室天平操作及注意事項(xiàng)2024/02/23
-托盤天平-機(jī)械光學(xué)分析天平-電子分析天平天平作為實(shí)驗(yàn)的必需品,往往在整個(gè)研究生涯都離不開(kāi)它,因此學(xué)習(xí)掌握天平的使用方法顯得尤為重要。培養(yǎng)個(gè)人的科研素養(yǎng)、科研習(xí)慣也可以天平開(kāi)始。天平介紹每個(gè)人都知道,天平是定量工作中不能缺少的儀器,常見(jiàn)的有托盤天平、電子天平、機(jī)械分析天平、電子分析天平等。在生物學(xué)研究中最常見(jiàn)的天平便是電子天平和電子分析天平了。電子天平的使用范圍多在一些精確度大于0.01克的場(chǎng)景使用,而電子分析天平一般能精確稱量到0.0001克(0.1毫克),這常運(yùn)用在許多分析定量實(shí)驗(yàn)、微量試劑
不止幽門螺桿菌,這種細(xì)菌也會(huì)導(dǎo)致胃癌等胃病2024/02/22
胃癌(GastricCancer,GC)在全國(guó)為第五大常見(jiàn)癌癥,也是導(dǎo)致癌癥死亡的主要原因之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)發(fā)布的全球癌癥負(fù)擔(dān)數(shù)據(jù),2020年全球胃癌新發(fā)病例數(shù)108.9萬(wàn),死亡病例數(shù)76.8萬(wàn)。而在中國(guó),胃癌尤為嚴(yán)重,中國(guó)是全球胃癌發(fā)病人數(shù)和死亡人數(shù)最多的國(guó)家,以20%的人口貢獻(xiàn)了近50%的胃癌發(fā)病人數(shù)和死亡人數(shù)。幽門螺桿菌(Helicobacterpylori)是胃癌的主要危險(xiǎn)因素,其已被歸類為1類致癌物。幽門螺桿菌的感染可促進(jìn)胃炎、胃衰退和腸上皮化生
鐵死亡預(yù)測(cè)物被揭示,或可成性標(biāo)志為惡性腫瘤的新治療靶點(diǎn)2024/02/22
骨肉瘤(OS)是骨骼系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,約占所有骨瘤的56%。OS起源于惡性間充質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的類骨或未成熟骨,因此通常影響兒童和青少年。由于其惡性程度高、轉(zhuǎn)移早、易復(fù)發(fā)、耐藥等特點(diǎn),其死亡率高,預(yù)后差。越來(lái)越多的證據(jù)表明,誘導(dǎo)非凋亡細(xì)胞死亡是一種新型抗腫瘤策略,能用來(lái)克服現(xiàn)有的腫瘤耐藥問(wèn)題。鐵死亡是一種新發(fā)現(xiàn)的程序性細(xì)胞死亡形式,具有多種形態(tài)特征、誘導(dǎo)因子和調(diào)節(jié)機(jī)制。因此,靶向調(diào)控腫瘤細(xì)胞鐵死亡可能是治療腫瘤較有前景的方法。目前已證實(shí)在肝細(xì)胞癌、乳腺癌、黑色素瘤、卵巢癌和腎癌等不同類型的癌癥
細(xì)胞因子/生長(zhǎng)因子知多少?2024/02/22
生長(zhǎng)因子是具有刺激細(xì)胞生長(zhǎng)活性的細(xì)胞因子,是一類通過(guò)與特異性的、高親和性的細(xì)胞膜受體結(jié)合,調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)與其他細(xì)胞功能等多效應(yīng)的多胎類物質(zhì)。生長(zhǎng)因子存在于血小板和各種成體與胚胎組織及大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞中,對(duì)不同種類細(xì)胞具有一定的專一性。一、生長(zhǎng)因子的分類生長(zhǎng)因子的種類眾多,主要有表皮細(xì)胞因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGFα和TGFβ)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(αFGF、βFGF)、類胰島素生長(zhǎng)因子(IGF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、血小板來(lái)源生長(zhǎng)因子(PDGF)、促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素(EPO)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子
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