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CCK-8，細(xì)胞增殖檢測較為合適的選擇2021/10/08: 什么是細(xì)胞增殖檢測？細(xì)胞增殖是細(xì)胞在周期調(diào)控的因子下，通過DNA復(fù)制等反應(yīng)，完成細(xì)胞分裂的過程。在細(xì)胞增殖中，新細(xì)胞的產(chǎn)生過程影響著體內(nèi)所有組織的發(fā)育、生長和維持，同時，它也被嚴(yán)格調(diào)控著，以防失控的細(xì)胞分裂（可出現(xiàn)在各種癌癥）導(dǎo)致腫瘤的形成和器官功能的破壞。正因為細(xì)胞增殖對生物活動的這種廣泛影響，其在各種環(huán)境中的準(zhǔn)確評估變得十分重要。腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化過程細(xì)胞增殖是通過細(xì)胞分裂引起的細(xì)胞數(shù)量增加，在整個生命周期中對正常組織發(fā)育和維持是必須的。一些類型的細(xì)胞會處于持續(xù)增殖狀態(tài)，如皮膚和骨髓細(xì)胞，但

實驗操作分享：干細(xì)胞誘導(dǎo)成骨實驗2021/10/08: 間充質(zhì)干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞，可在體外通過不同的方法干預(yù)下下誘導(dǎo)分化為骨、軟骨及其他結(jié)締組織，因其來源廣泛，分離無創(chuàng)傷，較低的免疫原性、生長周期短等特點，是組織工程種子細(xì)胞的重要來源。干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化一方面是干細(xì)胞鑒定的主要方法，另一方面也是干細(xì)胞功能學(xué)研究的主要途徑。采用體外條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)下，人間充質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)能夠分化為成脂肪、骨、軟骨細(xì)胞。成骨分化經(jīng)茜素紅染色法鑒定。實驗前準(zhǔn)備試劑：PBS，成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基，茜素紅耗材：NEST細(xì)胞培養(yǎng)皿，NEST普通吸頭，NEST微量離心管設(shè)備：CO2培

細(xì)胞為何總是抱團(tuán)生長？2021/10/08: 細(xì)胞為啥總是一言不合就抱團(tuán)生長？！是細(xì)胞污染了還是正?，F(xiàn)象？是消化不好了還是鋪板有問題？抱團(tuán)細(xì)胞越來越多，怎么樣才能讓細(xì)胞分開生長？請認(rèn)真閱讀以下干貨，看看能否幫您答疑解惑！細(xì)胞抱團(tuán)一定代表細(xì)胞狀態(tài)不好嗎？細(xì)胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長的，應(yīng)該仔細(xì)觀察每種細(xì)胞的狀態(tài)，抱團(tuán)并不一定代表不好：1、若細(xì)胞輪廓清晰，可看清楚一個個的細(xì)胞，像葡萄一樣，一串串的，就是狀態(tài)好的，說明細(xì)胞在分裂。2、但大部分細(xì)胞抱團(tuán)絕對不是一件好事！如果輪廓消失，出現(xiàn)細(xì)胞融解或細(xì)胞變灰暗、透光性變差

細(xì)胞消化知多少？2021/10/08: 每個做細(xì)胞實驗的人，不管去哪“浪”，心里都會有個牽掛：我的細(xì)胞，過兩天要傳代！大部分組織細(xì)胞離體培養(yǎng)時，會以貼壁的形式生長（除了取自血、脾或骨髓的細(xì)胞）;*培養(yǎng)基中的血清，含有許多帶陽性電荷的促細(xì)胞附著因子（層黏連蛋白Laminine、纖維鏈接蛋白Fibronectin等胞外基質(zhì)），能幫助細(xì)胞附著于帶陰性電荷的底物上（玻璃或塑料培養(yǎng)容器），并形成鍵結(jié)、貼壁伸展?！栃噪姾傻拇偌?xì)胞附著因子，能幫助細(xì)胞附著于帶陰性電荷的底物上所以當(dāng)細(xì)胞長滿需要分盤的時后，就要想辦法讓細(xì)胞和培養(yǎng)底物說再見！也就是所謂

【外泌體應(yīng)用】天然納米藥物載體2021/10/08: 外泌體是來源于細(xì)胞內(nèi)膜的30-180nm的脂質(zhì)雙層包裹的囊泡，包含有核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等生命物質(zhì)，在細(xì)胞外環(huán)境中循環(huán)，是細(xì)胞間通訊工具。外泌體在形成的過程中，會把一些蛋白質(zhì)、活性酶囊括在內(nèi)以及攜帶一系列的寡核苷酸，特別是線粒體DNA，mRNA，miRNA和許多其它非編碼RNA等。因而外泌體是天然的多功能載體，可以包裹并遞送各種生命物質(zhì)，例如小RNA、mRNA和蛋白質(zhì)等。相對于脂質(zhì)體和病毒載體，外泌體穩(wěn)定性高，生物相容性好，免疫原性低，而且可以滲透生物屏障（例如血腦屏障、胎盤屏障），故外泌體作為天

吃“激素”的原代細(xì)胞2021/09/30: 培養(yǎng)原代細(xì)胞的時候，我們會考慮該細(xì)胞生長所需要的組分，去選擇培養(yǎng)基，為此，很多商家都提供配套的*培養(yǎng)基，比如cellSystems的cultureBoost經(jīng)典細(xì)胞培養(yǎng)基，lonza的EGM系列等等，配套的培養(yǎng)基都會有一部分為細(xì)胞生長因子，一提到生長這個詞，馬上想到的就是激素，好像真的感覺也是這么回事哦，生長因子和激素歷來都是扯不開的兩個話題。廣義的生長因子除了維生素外，還包括堿基、嘌呤、嘧啶、生物素和煙酸等，有時還包括氨基酸營養(yǎng)缺陷突變株所需要的氨基酸在內(nèi)，細(xì)胞生長因子是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長與其他細(xì)胞

復(fù)蘇細(xì)胞的注意事項2021/09/30: 到了復(fù)蘇細(xì)胞開始實驗的環(huán)節(jié)了，以下是整理的一些復(fù)蘇細(xì)胞的注意事項：1.細(xì)胞儲存在液氮中，溫度達(dá)-196℃，理論上儲存時間是無限的。只要一直在液氮，凍存沒有問題，那么復(fù)蘇也不會出現(xiàn)很大的問題，不存在有效期限，細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，復(fù)蘇一定越快越好，實驗證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。2.取細(xì)胞時應(yīng)做好防護(hù)措施，帶好防凍手套，護(hù)目鏡。細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。3.必須在1-2min內(nèi)使凍存液*融化，復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷。如果凍存管的

實驗分享：血腦屏障實驗的操作步驟2021/09/30: 從19世紀(jì)末，保羅·埃爾利希在一個實驗中發(fā)現(xiàn)了這個屏障，后期科學(xué)家跟進(jìn)研究后發(fā)現(xiàn)血腦屏障（BBB）對機體發(fā)揮著重要作用。BBB結(jié)構(gòu)和功能的完整對于維持神經(jīng)元功能，使中樞神經(jīng)系統(tǒng)免受病原體、炎性因子、損傷的影響有重要意義。缺血性腦血管病的發(fā)生、發(fā)展與BBB結(jié)構(gòu)和功能的破壞密切相關(guān)。一．實驗試劑準(zhǔn)備：1.準(zhǔn)備好無鈣鎂離子PBS磷酸鹽緩沖液，cellsystems人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞（貨號：ACBRI376)建議使用無鈣鎂離子的緩沖液實驗.2.通過稀釋0.5mg/mL纖維素溶液和0.3mg/mL膠原蛋白

細(xì)胞實驗需要準(zhǔn)備些什么？2021/09/29: 1.常用的吸量管有：奧氏吸量管、移液管、刻度吸量管2.如何正確使用吸量管？答：(1)選用原則：就近原則(2)吸量管的使用：吸-擦-調(diào)-放3.如何正確使用微量加樣器？答：轉(zhuǎn)-按-吸-擦-按4.如何正確使用離心機？放置-裝管-平衡-啟動-取出5.細(xì)胞培養(yǎng)必需設(shè)備有哪些？答：細(xì)胞培養(yǎng)必需設(shè)備有超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、液氮生物容器、壓力蒸汽消毒器、無菌過濾器、電熱干燥箱、離心機、細(xì)胞計數(shù)板和冰箱等。6.無菌操作技術(shù)包括哪些內(nèi)容?答：1.保持安靜、整潔的無菌工作區(qū)域;2.保持干凈整潔的工作面

細(xì)胞培養(yǎng)無小事——細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟2021/09/29: 一個小細(xì)胞可能會把人弄得吃不下，睡不著，焦頭爛額？？？信不信還真的有這樣的事情，可能整個實驗下來計劃是三個月左右，但實際有時候出手的第一步就遇到了攔路虎，why？細(xì)胞總是養(yǎng)不好；天啊，馬上就到了三個月了，SOsad，下面我們就來看看細(xì)胞主要的培養(yǎng)步驟吧。選對培養(yǎng)基很重要：培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊话闶紫冗xMEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個好的開始，各種目的無血清培養(yǎng)最好首先選的培養(yǎng)基。G

科研實驗無小事——細(xì)胞的STR鑒定2021/09/29: 做實驗的時候才發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的種類太多，于是我們需要查詢各種文獻(xiàn)看每個細(xì)胞的特征，從而設(shè)計實驗規(guī)劃與步驟，我們在緊湊的實驗種完成了實驗，提交文章的時候，才發(fā)現(xiàn)，需要細(xì)胞鑒定。據(jù)統(tǒng)計約30%細(xì)胞系被交叉污染或錯誤辨識,因使用了交叉污染或錯誤辨識的細(xì)胞而導(dǎo)致研究結(jié)論錯誤、結(jié)果不可重復(fù)、臨床細(xì)胞治療災(zāi)難性后果……這浪費大量時間、精力和金錢。因此NIH、ATCC等機構(gòu)多次發(fā)出呼吁，要求研究者對細(xì)胞進(jìn)行鑒定，最近美媒報道1/6科學(xué)家在研究使用“假”細(xì)胞，2014年12月、2015年2月Science雜志分別發(fā)表

細(xì)胞培養(yǎng)無小事——如何選擇血清？2021/09/29: 體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基需要滿足細(xì)胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求；原代提取的時候選擇如何選擇培養(yǎng)基成了關(guān)鍵的問題，此外在細(xì)胞提取的時候因血清可以模擬個體的生存環(huán)境，在提取細(xì)胞的時候血清一定不可少。維持細(xì)胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個方面：氨基酸，單糖，維生素，無機離子與微量元素，此外還有促生長激素，滲透壓，pH值，并保證在配制試劑的時候無毒無污染。正常的培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基無非是基礎(chǔ)培養(yǎng)基加血清。血清是一個神秘的試劑，至今為止，它在細(xì)胞的生長繁殖發(fā)

細(xì)胞培養(yǎng)無小事——貼壁細(xì)胞的消化方法2021/09/29: 如何消化讓細(xì)胞生長的更好，養(yǎng)細(xì)胞關(guān)鍵還是在消化，以下介紹幾種細(xì)胞的消化方法一、酶消化法1、胰酶，這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。消化的時間根據(jù)細(xì)胞種類、操作手法，溫度等因素而變化，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶，37℃一般在消化單層貼壁的細(xì)胞一般1-5分鐘就足夠了，用血清或者含血清的*培養(yǎng)基終止。2、膠原酶，一般用于原代細(xì)胞消化，這種方法作用溫和，對細(xì)胞損傷較小，消化的時間也略長，不推薦的原因是膠原酶有點小貴而且培養(yǎng)細(xì)胞株感覺沒有多大的必要。二、離子螯合劑不破壞細(xì)胞表面分

簡單實用的原代細(xì)胞培養(yǎng)方法2021/09/28: 很多老師在設(shè)計科研實驗的時候都會很迷茫，到底用什么細(xì)胞好？越來越多的老師開始傾向于原代細(xì)胞的科研實驗，在設(shè)計實驗中，原代細(xì)胞和細(xì)胞株到底該怎么選擇呢？原代細(xì)胞的定義：原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此，較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實際上，我們通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代細(xì)胞因為可以模擬機體的功能，主要用于：生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥

內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)方法及內(nèi)皮微粒的表達(dá)2021/09/28: 內(nèi)皮細(xì)胞是每個組織中不可少的傳導(dǎo)工具，包括萬惡的腫瘤，也是在初發(fā)階段，血管先擴增一波，從而大面積進(jìn)攻組織，內(nèi)皮細(xì)胞怎么提取培養(yǎng)呢？原代內(nèi)皮細(xì)胞分離一般采用的是組織酶消化法，不要天真的以為您只要酶消化下來的細(xì)胞都是內(nèi)皮細(xì)胞了，有可能也有成纖維細(xì)胞哦，這就牽扯到怎么抑制成纖維細(xì)胞的生長，讓內(nèi)皮細(xì)胞趕快成長起來的方法了。內(nèi)皮細(xì)胞一般采用內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基來維持細(xì)胞生長，需要注意的是才分離出來的細(xì)胞一般都不會采用無血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)，因為無血清的培養(yǎng)基可能會導(dǎo)致細(xì)胞會有不貼壁的現(xiàn)象發(fā)生，需要更換無血清培養(yǎng)方

6個小細(xì)節(jié)，輕松搞定細(xì)胞“劃痕實驗”2021/09/28: 傷口愈合試驗，也通常稱為“劃痕試驗”，是一種廣泛建立的研究體外集體細(xì)胞遷移的技術(shù)。細(xì)胞劃痕（WoundHealing)是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。其實驗原理是，當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個空白區(qū)域，稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細(xì)胞會逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”愈合。條件好的實驗室可使用活細(xì)胞成像來分析創(chuàng)傷愈合實驗中角質(zhì)形成細(xì)胞或者成纖維細(xì)胞的遷移活動。結(jié)合包含的軟件分析算法，有可能延遲量化間隙表面關(guān)閉和關(guān)閉推移時間的速度，但是使用延時顯

DNA提取的8個問題解答2021/09/28: 質(zhì)粒DNA的提取是DNA技術(shù)中的必需實驗技能。分離質(zhì)粒DNA一般分為三個步驟：1、培養(yǎng)細(xì)菌使質(zhì)粒擴增2、收集和裂解細(xì)菌3、分離和純化質(zhì)粒DNA堿裂解法是較常用的提取的方法，在質(zhì)粒提取過程中，由于機械力、酸堿度、試劑等的原因，可能使質(zhì)粒DNA鏈發(fā)生斷裂。所以，多數(shù)質(zhì)粒粗提取物中含有三種構(gòu)型的質(zhì)粒：共價閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)：質(zhì)粒的兩條鏈沒有斷裂;超螺旋開環(huán)DNA(ocDNA)而在DNA提取中總會遇到各種一些問題，導(dǎo)致實驗無從下手，下面我們來分析一些常見的問題：一、為什么用無水乙醇沉淀DNA

細(xì)胞培養(yǎng)之“麻煩精”支原體的防治方法2021/09/28: 支原體是細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染，。因支原體屬于直徑介于0.2-2µm的最小原核生物，形態(tài)易變，所以即使用濾網(wǎng)給培養(yǎng)基過濾20次，它還會在已經(jīng)感染的培養(yǎng)基中“陰魂不散”，而又因為它缺少細(xì)胞壁，沒有這層外衣包裹之后的它，可以成功逃過大部分抗生素的“追殺”。在細(xì)胞培養(yǎng)液中，支原體可達(dá)到107-108CFU/mL（CFU=ColonyFormingUnit，是一種支原體的濃度測量單位）而不使培養(yǎng)液混濁及影響細(xì)胞生長，而因為在初感染時它不會給細(xì)胞帶來任何影響，這一點，估計黑膠蟲都要被它隱蔽得方式折服。那么支

懸浮細(xì)胞傳代怎么傳代，看這里！2021/09/26: 小伙伴們都知道，實驗室里培養(yǎng)的動物細(xì)胞一般可以簡單地分為兩大類，貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。貼壁細(xì)胞（adherentcells）指的是這類生長必須有可以貼附的支持物表面,只有依靠自身分泌的或培養(yǎng)基中提供的貼附因子才能在該表面上生長，繁殖的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞在該表面生長后，一般會形成兩種形態(tài)，即成纖維樣細(xì)胞或者上皮樣細(xì)胞。而另一類則是細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，這類細(xì)胞我們稱之為懸浮細(xì)胞。懸浮細(xì)胞在顯微鏡下觀察，一般是單個生長的大小均一的圓圓的，亮亮的形態(tài)規(guī)則的細(xì)胞形態(tài)，也有部分細(xì)胞聚

細(xì)胞培養(yǎng)之“黑膠蟲”的防治2021/09/26: “黑膠蟲”/“Nanobacteria”究竟是何方神圣？《生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展》雜志（PIBB）2020年第1期發(fā)表了題為細(xì)胞培養(yǎng)中“黑膠蟲”污染的檢測及防治一文。根據(jù)作者描述，“黑膠蟲”污染具有以下特征：1.培養(yǎng)基和正常培養(yǎng)基沒有區(qū)別；2.低倍鏡下它是黑色的點點和細(xì)胞碎片沒有區(qū)別3.高倍鏡下它會做運動給你看，也能模仿細(xì)胞碎片和細(xì)胞分泌物的布朗運動。還有黑膠蟲“路癡”到處跑的。4.與細(xì)胞的數(shù)量成反比，細(xì)胞越多，它越少，細(xì)胞越少它越多5.細(xì)胞狀態(tài)越養(yǎng)越差。該科研成果除了得出這些結(jié)論外，還成功的鑒

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