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深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年
實(shí)驗(yàn)室常用洗滌劑的種類(lèi)及配置方法2021/10/21
在化學(xué)實(shí)驗(yàn)工作中,洗滌儀器不僅是一項(xiàng)必須做的實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作,也是一項(xiàng)技術(shù)性的工作。實(shí)驗(yàn)室儀器的潔凈程度直接影響到實(shí)驗(yàn)效果,甚至決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。由于器皿的不清潔或被污染,往往造成較大的實(shí)驗(yàn)誤差,甚至?xí)霈F(xiàn)相反的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此,對(duì)于學(xué)校、科研所、醫(yī)院和廠礦企業(yè)的各實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō),儀器的洗滌都顯得非常重要。一、洗滌劑的種類(lèi)及使用范圍:實(shí)驗(yàn)室較為常用的洗滌劑是:肥皂、肥皂液、洗衣粉、去污粉、洗液等。1、肥皂、肥皂液、洗衣粉、去污粉,用于可以用刷子直接刷洗的儀器,如燒杯,三角瓶,試劑瓶等;2、洗液多用于不
細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)技術(shù)——功能實(shí)驗(yàn)的第一步2021/10/21
轉(zhuǎn)染(transfection)是真核細(xì)胞主動(dòng)或被動(dòng)導(dǎo)入外源核酸片段(DNA或RNA)而獲得新的表型的過(guò)程。轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生重組蛋白,或者特異性的增強(qiáng)/抑制細(xì)胞中的基因表達(dá)。轉(zhuǎn)染后的檢測(cè)主要包括基因水平和蛋白水平的檢測(cè)。一定時(shí)間后收集轉(zhuǎn)染處理后的細(xì)胞,采用超聲或酶解的方法破碎細(xì)胞,離心得到上清。針對(duì)基因水平,使用普通PCR或RT-PCR進(jìn)行驗(yàn)證,蛋白水平,使用westernblot檢測(cè),簡(jiǎn)單,快速,準(zhǔn)確。轉(zhuǎn)染的類(lèi)型根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在于宿主細(xì)胞的時(shí)間長(zhǎng)短,可以分為瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)。根據(jù)轉(zhuǎn)染方式可以分為
3D細(xì)胞培養(yǎng),給細(xì)胞家的感覺(jué)2021/10/20
——“你的細(xì)胞都養(yǎng)在哪里呀?”——“都在塑料的培養(yǎng)皿里呢?!蹦阒绬幔磕壳凹?xì)胞大都是在細(xì)胞培養(yǎng)板或細(xì)胞培養(yǎng)瓶中進(jìn)行二維平面培養(yǎng)。由于二維細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境與體內(nèi)3D細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境差距較大,因此2D培養(yǎng)無(wú)法提供高質(zhì)量的細(xì)胞用于后續(xù)研究和應(yīng)用。此外,由于二維培養(yǎng)細(xì)胞擴(kuò)增還會(huì)受到2D平面表面積的限制(即細(xì)胞的生長(zhǎng)接觸限制),需要頻繁采用胰酶消化進(jìn)行細(xì)胞傳代,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增工作繁瑣。胰酶消化還會(huì)影響細(xì)胞的質(zhì)量。采用3D細(xì)胞培養(yǎng)支架,可以再較長(zhǎng)期間內(nèi)無(wú)需胰酶消化,而進(jìn)行細(xì)胞的3D擴(kuò)增,從而大大提高細(xì)胞的質(zhì)量和提
慢病毒載體——構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株的利器2021/10/20
隨著病毒生物學(xué)的發(fā)展,諸多病毒載體已成為了在各種實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行核酸轉(zhuǎn)運(yùn)的重要工具,主流的病毒載體主要包括:慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒。其中,慢病毒的應(yīng)用較為廣泛。什么是慢病毒慢病毒的英文是Lentivirus,它的命名有兩層含義。一方面,Lenti-在拉丁文中有慢的意思;另一方面,被慢病毒感染的患者早期很難觀察,大多都會(huì)經(jīng)歷一個(gè)長(zhǎng)達(dá)數(shù)年的潛伏期,之后才緩慢發(fā)病,因此這些病原微生物被稱(chēng)之為慢病毒。它是逆轉(zhuǎn)錄病毒科下的一個(gè)屬,其主要包括8種能夠感染人和脊椎動(dòng)物的病毒,原發(fā)感染的細(xì)胞以巨噬細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)附著物知多少2021/10/20
在實(shí)驗(yàn)室中,我們一般會(huì)用聚丙乙烯制成的無(wú)菌培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿或多孔板來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。它們透光性好、生長(zhǎng)面平滑、能夠提供質(zhì)地均勻、重復(fù)性好的單層培養(yǎng)物。然而由于是人工合成的,因此聚丙乙烯是疏水性的,表面不適宜細(xì)胞生長(zhǎng),故用于組織培養(yǎng)的塑料,都要經(jīng)過(guò)γ射線照射、化學(xué)處理或電離輻射,以產(chǎn)生親水的帶電表面,使細(xì)胞能夠附著。附著遇到的最大困難是如何讓細(xì)胞附著上去,而包被附著物有可能會(huì)促進(jìn)細(xì)胞的粘附。在很多時(shí)候,為了適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)的需求、解決細(xì)胞貼壁不牢的問(wèn)題,我們需要對(duì)培養(yǎng)器皿用不同的物質(zhì)進(jìn)行包被后使用。這些物質(zhì)可
細(xì)胞到貨后應(yīng)該如何處理呢?2021/10/20
剛收到細(xì)胞未開(kāi)封,疑似污染,應(yīng)當(dāng)如何處理?收到細(xì)胞后,請(qǐng)先觀察外觀是否存在漏液、破損等情況,并拍照(40X、100X、200X)。發(fā)現(xiàn)任何問(wèn)題,都請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我們的銷(xiāo)售,并提供您細(xì)胞不同倍數(shù)的照片。如詢問(wèn)后確定無(wú)明顯污染,請(qǐng)取出10ml培養(yǎng)基空培養(yǎng),細(xì)胞按照說(shuō)明書(shū)正常操作處理即可。Q:剛收到細(xì)胞,顯微鏡觀察細(xì)胞成片漂浮,該如何處理?除293系列、LNCAP、SH-SY5Y、MSTO-211H、INS-1、HT-22這些易漂浮的細(xì)胞外,大部分細(xì)胞在溫度低時(shí)細(xì)胞回縮變圓,漂浮的可能性也會(huì)增大。建議延長(zhǎng)
什么是端粒酶?2021/10/20
端粒酶(Telomerase),在細(xì)胞中負(fù)責(zé)端粒的延長(zhǎng)的一種酶,是基本的核蛋白逆轉(zhuǎn)錄酶,可將端粒DNA加至真核細(xì)胞染色體末端,把DNA復(fù)制損失的端粒填補(bǔ)起來(lái),使端粒修復(fù)延長(zhǎng),可以讓端粒不會(huì)因細(xì)胞分裂而有所損耗,使得細(xì)胞分裂的次數(shù)增加。端粒酶作用機(jī)制原理01、端粒酶可以把DNA復(fù)制損失的端粒填補(bǔ)起來(lái),藉由把端粒修復(fù)延長(zhǎng),可以讓端粒不會(huì)因細(xì)胞分裂而有所損耗,使得細(xì)胞分裂的次數(shù)增加。02、端粒酶是一種由催化蛋白和RNA模板組成的酶,可合成染色體末端的DNA,賦予細(xì)胞復(fù)制的永生性,從而使生命延續(xù)。為什么
小而美的3D細(xì)胞培養(yǎng)——類(lèi)器官2021/10/19
經(jīng)典二維細(xì)胞培養(yǎng)方法,從1885年德國(guó)科學(xué)家從雞胚中分離細(xì)胞至今,解決了許多生命科學(xué)問(wèn)題,但是和細(xì)胞能夠以最佳生長(zhǎng)狀態(tài)的體內(nèi)環(huán)境并不相同。近年來(lái),為盡可能的模仿細(xì)胞在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,得到更接近類(lèi)似于體內(nèi)生長(zhǎng)的細(xì)胞,越來(lái)越多研究人員開(kāi)始關(guān)注三維細(xì)胞、類(lèi)器官培養(yǎng)技術(shù)。20世紀(jì)80年代左右,美國(guó)勞倫斯伯克利國(guó)家實(shí)驗(yàn)室的MinaBissell和WilliamOlePeterson①在乳腺癌的研究中發(fā)明了三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),他們的研究發(fā)現(xiàn),以三維培養(yǎng)正常的乳腺上皮細(xì)胞形成了腺泡狀單層管狀結(jié)構(gòu),同時(shí)具有原
漲姿勢(shì)!細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)業(yè)名詞解析。2021/10/19
在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),我們經(jīng)常會(huì)聽(tīng)到一些專(zhuān)業(yè)名詞,原代培養(yǎng)是什么?什么是世代數(shù)?細(xì)胞系是什么?有限細(xì)胞系又代表的是什么?有的專(zhuān)有名詞搞不清楚的話,會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程也會(huì)有一定的影響。根據(jù)老師們的反饋,我們總結(jié)了以下容易混淆的概念供大家參考~原代培養(yǎng)(Primaryculture)開(kāi)始于直接取自生物體的細(xì)胞、組織或器官的培養(yǎng)稱(chēng)為原代培養(yǎng)。通常代表異質(zhì)細(xì)胞群,很難標(biāo)準(zhǔn)化和繁殖。它們的壽命一般有限,而且已知它們會(huì)隨著時(shí)間而改變其差異特征。傳代(Passage(Subculture))細(xì)胞從一個(gè)皿里轉(zhuǎn)移或傳代
細(xì)胞培養(yǎng)中如何預(yù)防老化?2021/10/19
一、防止細(xì)胞老化最主要還是要做到勤觀察、勤換液、勤傳代、勤保種,特別是傳代,不能等細(xì)胞太密了之后傳,一般細(xì)胞建議長(zhǎng)到80%融合度傳代最好;二、換培養(yǎng)液應(yīng)該根據(jù)自己細(xì)胞消耗培養(yǎng)基的情況來(lái)確定是否該換。如果感覺(jué)時(shí)間不好把握的話就多培養(yǎng)幾瓶細(xì)胞,在不同的時(shí)間換液,最后再來(lái)比較下,看什么時(shí)候換液好,得出自己的結(jié)論;三、選擇正確的血清與培養(yǎng)基:細(xì)胞對(duì)血清特別敏感,直接影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。一定要選擇適合的血清不然就會(huì)因營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不協(xié)調(diào)而導(dǎo)致細(xì)胞老化;四、在間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)必然要進(jìn)行消化,但是消化對(duì)細(xì)胞的表面蛋白
為何細(xì)胞總是老化?2021/10/19
常有用戶提到細(xì)胞狀態(tài)不好,比如:細(xì)胞不再透亮,內(nèi)部有很多細(xì)碎的小黑點(diǎn),細(xì)胞形態(tài)異常,培養(yǎng)液變黃……這時(shí),除了考慮細(xì)菌污染的問(wèn)題,細(xì)胞老化也不容忽視~何為細(xì)胞老化?1882年,德國(guó)生物學(xué)家Weismann曾大膽預(yù)測(cè)“在細(xì)胞水平存在老化現(xiàn)象”。他推測(cè):機(jī)體的壽命限制受控于體細(xì)胞的分裂能力;在遺傳進(jìn)化中,不同物種的體細(xì)胞獲得了不同分裂的潛能,從而決定了不同物種的壽命長(zhǎng)短。20世紀(jì)50年代,Swin和他的同事利用原代細(xì)胞體外培養(yǎng)試驗(yàn)證明了來(lái)源于不同物種的纖維細(xì)胞均不具備無(wú)限分裂的潛能。取得突破性進(jìn)展的還
細(xì)胞培養(yǎng)的小常識(shí)2021/10/19
細(xì)胞體內(nèi)外培養(yǎng)的差別是什么?答:細(xì)胞離體后,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響,生活在缺乏動(dòng)態(tài)平衡相對(duì)穩(wěn)定環(huán)境中,日久天長(zhǎng),易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無(wú)限生長(zhǎng)的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此,培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。實(shí)際上從細(xì)胞一旦被置于體外培養(yǎng)后,這種差異就開(kāi)始發(fā)生了。二倍體細(xì)胞有什么特點(diǎn)?答:二倍體細(xì)胞的染色體組型是2
怎么避免一些實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的安全事故?看完這六點(diǎn)你就知道了2021/10/18
實(shí)驗(yàn)室安全事故頻發(fā),那分別是什么原因造成的?又能通過(guò)哪些方式能盡可能避免、減少安全事故的發(fā)生?下面為大家整理了六個(gè)方面的內(nèi)容,幫助大家提高實(shí)驗(yàn)室安全認(rèn)識(shí),并能盡量避免實(shí)驗(yàn)室安全事故發(fā)生。一、實(shí)驗(yàn)室存在的安全風(fēng)險(xiǎn)主要包括:電器安全(如觸電、自燃等)、火災(zāi)、化學(xué)品(如腐蝕性、中毒性、爆炸性、燃燒性等)、輻射高低溫(燙傷、凍傷)、氣瓶(如燃燒、爆炸、窒息、中毒等)、漏水、三廢排放、致病菌、機(jī)械安全風(fēng)險(xiǎn)(砸傷、切割傷等)等其它安全風(fēng)險(xiǎn)。二、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)安全設(shè)備主要包括:火災(zāi)報(bào)警器、輻射報(bào)警器、滅火器、消防
化學(xué)室安全管理這8點(diǎn)你都知道嗎?(二)2021/10/18
上篇給大家講了化驗(yàn)室安全管理的前4點(diǎn),今天給大家講下后面4點(diǎn),分別是化驗(yàn)室防觸電、防爆、防環(huán)境污染、防野蠻作業(yè)。希望大家從這8點(diǎn)中能從中預(yù)防相關(guān)安全事故,切切實(shí)實(shí)做好實(shí)驗(yàn)室安全管理。5、化驗(yàn)室防觸電首先要申明一點(diǎn),就是不管在工作還是在生活中我們都要防觸電。比如從用電設(shè)施上說(shuō)起,電源插座必須接地線,大功率儀器、電器設(shè)備必須接空氣開(kāi)關(guān),實(shí)驗(yàn)室用電必須要有漏電保護(hù)開(kāi)關(guān);在使用相關(guān)電器設(shè)備時(shí)嚴(yán)禁用濕手觸摸電器開(kāi)關(guān)和電源,在使用過(guò)程中要嚴(yán)格按照電器設(shè)備的操作規(guī)程,在對(duì)儀器進(jìn)修檢修或者維護(hù)的時(shí)候必須做到“3
化學(xué)室安全管理這8點(diǎn)你都知道嗎?(一)2021/10/18
近些年來(lái),海內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室安全事故頻發(fā),我國(guó)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的安全管理也越來(lái)越重視,實(shí)驗(yàn)室種類(lèi)較多,尤其是對(duì)化驗(yàn)室的管理尤為看重。而根據(jù)化驗(yàn)室的特點(diǎn),化驗(yàn)室安全包括防水、防火、防毒、防腐蝕、防觸電、防爆、防環(huán)境污染、防野蠻作業(yè)等8個(gè)方面。因篇幅所限,本篇講解4個(gè)方面。1、化驗(yàn)室防水不管是化驗(yàn)室還是普通實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)都配有一次性水、純水、高純水或制水儀器,如蒸餾器、純水機(jī)。相關(guān)作業(yè)人員在使用的過(guò)程中有忘記關(guān)水龍頭的,或者是突然停水后打開(kāi)水龍頭忘記關(guān)閉,如果出水量過(guò)大,排水口又被堵住就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室漫水嚴(yán)重。這就需要
這三個(gè)管理要求是每個(gè)實(shí)驗(yàn)室工作人員都需要注意的!2021/10/18
要做好實(shí)驗(yàn)室管理要注意的地方太多,比如不但要做好儀器設(shè)備管理,還要做好實(shí)驗(yàn)室工作人員管理。但歸根結(jié)底,想做好實(shí)驗(yàn)室管理,要看有沒(méi)有制定規(guī)范化管理要求。今天為樂(lè)小編給大家整理了三點(diǎn):1、實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化管理要求;2、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境管理;3、實(shí)驗(yàn)室環(huán)保要求。希望能對(duì)大家有所幫助。一、規(guī)范化管理要求1要建立好嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室安全管理制度,并明確好責(zé)任和要求,以防止操作人員違規(guī)操作;2要保持實(shí)驗(yàn)室干凈整潔,做好實(shí)驗(yàn)室及設(shè)備日常清潔工作,嚴(yán)禁用掃帚掃地,盡量不用電風(fēng)扇,避免揚(yáng)塵和過(guò)分潮濕;3實(shí)驗(yàn)室相關(guān)工作人員進(jìn)入操作
醫(yī)療耗材管理這三大痛點(diǎn)有多少人知道?2021/10/18
試劑耗材因?yàn)槠浞诸?lèi)多,用量大,想管理好比較難,尤其是醫(yī)院的試劑耗材管理。醫(yī)院試劑耗材也叫醫(yī)療耗材,又分為高值耗材、低值耗材、體外診斷試劑等。為樂(lè)小編就這三個(gè)醫(yī)療耗材管理,給大家簡(jiǎn)單說(shuō)下其中存在的痛點(diǎn)和難點(diǎn)。一、高值耗材1灰色庫(kù)存灰色庫(kù)存意思即無(wú)人監(jiān)管的庫(kù)存。由于高值耗材實(shí)際需求的不確定性,導(dǎo)致醫(yī)院基本采用簡(jiǎn)單粗放的事后管理模式。而事后管理模式就是沒(méi)有驗(yàn)收、出入庫(kù)等管理,容易造成出現(xiàn)無(wú)人監(jiān)管的“灰色庫(kù)存”現(xiàn)象。2監(jiān)管缺失由于植入、介入高值耗材屬于高風(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)品,其質(zhì)量監(jiān)管?chē)?yán)格,要求全流程一碼溯源。但現(xiàn)
想做好化學(xué)試劑管理?這四點(diǎn)你都知道了嗎?2021/10/15
試劑種類(lèi)繁多,而化學(xué)試劑無(wú)疑是試劑其中一種非常重要的試劑。它是進(jìn)行化學(xué)研究、成分分析的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),是科技進(jìn)步的重要條件,可以說(shuō)是化學(xué)工作者的眼睛?,F(xiàn)化學(xué)試劑己廣泛應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)療、科學(xué)、檢驗(yàn)檢疫、環(huán)境保護(hù)、能源開(kāi)發(fā)等國(guó)民經(jīng)濟(jì)的各行各業(yè)。由此也可知化學(xué)試劑的重要性,那么怎么做好化學(xué)試劑管理顯得成為重要,今天為樂(lè)小編就從下面四點(diǎn)來(lái)給大家簡(jiǎn)單說(shuō)說(shuō)。一、統(tǒng)一存儲(chǔ)管理要做好化學(xué)試劑的安全管理,最重要的問(wèn)題是先解決化學(xué)試劑的統(tǒng)一存放問(wèn)題。而要做好統(tǒng)一存放管理,實(shí)施規(guī)范化管理來(lái)說(shuō)已是重中之重。但是,在
無(wú)菌技術(shù):細(xì)胞培養(yǎng)的第一步2021/10/15
細(xì)胞培養(yǎng)是一整套的實(shí)驗(yàn)操作體系,它涉及到實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)、無(wú)菌操作技術(shù)、實(shí)驗(yàn)安全、倫理、培養(yǎng)器皿、支持物選擇、質(zhì)量控制等多方面的理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)操作。對(duì)于剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)或日常需要和細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品打交道的服務(wù)人員來(lái)說(shuō),從0開(kāi)始掌握這些知識(shí)是比較困難的。因此,我們打算通過(guò)一系列通俗易懂的科普文章,來(lái)幫助有需要了解這方面知識(shí)的你快速入門(mén)。今天,我們先從一個(gè)最基本的概念開(kāi)始接觸細(xì)胞培養(yǎng)。微生物污染一直是組織培養(yǎng)中的一個(gè)主要問(wèn)題。也總是橫在新手面前一道頭疼的門(mén)檻,常常那些出師未捷身先死,又死得莫名其妙不得其所的失敗
qPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析基本步驟(一)2021/10/15
實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)會(huì)產(chǎn)生大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),一般可以用PCR儀自帶的軟件進(jìn)行收集、分析。但即使有了方便可靠的軟件,我們也需要對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行檢查、再分析,評(píng)估數(shù)據(jù)的質(zhì)量和可靠性。這需要三個(gè)基本的步驟。第一步,查看擴(kuò)增曲線,有必要時(shí)調(diào)整基線和閾值。Ct值由基線和閾值計(jì)算得來(lái),所以他們的值對(duì)結(jié)果影響很大。軟件會(huì)給出1個(gè)默認(rèn)的基線和閾值,但不一定是最合適的,需要我們進(jìn)行手動(dòng)調(diào)整。首*行基線的調(diào)整。一般范圍是循環(huán)數(shù)3~15,使得靶基因的擴(kuò)增信號(hào)大于背景噪聲。出現(xiàn)不正常的擴(kuò)增曲線,通常是因?yàn)樵O(shè)置了不正常的基線
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