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白益生物-抗體的制備方法和原理之抗血清的制備2023/05/29: 一、用于免疫的動物作免疫用的動物有哺乳類和禽類，主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等，實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學(xué)特性和所要獲得抗血清數(shù)量，如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因動物反應(yīng)良好，而且能夠提供足夠數(shù)量的血清，用于免疫的動物應(yīng)適齡，健壯，無感染性疾患，為雄性，此外還需十分注意動物的飼養(yǎng)，以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔，用純種新西蘭兔，一組三只，兔的體重以2～3kg為宜。二、免疫途徑免疫途徑有多種多樣，如靜脈

講講大鼠elisa試劑盒使用前的注意事項2023/05/11: 大鼠elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗，往預(yù)先包被大鼠組織蛋白酶捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠組織蛋白酶呈正相關(guān)，用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度，計算樣品濃度。大鼠elisa試劑盒的注意事項：1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄。2.微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請

植物安排制備基因組DNA操作方法2023/05/05: 1.ELISA試劑盒收取10~50g新鮮的植物安排。2.植物安排用冷的無菌水洗刷、吸干，放人液氮中凍結(jié)，用研缽和研杵研成細粉。3.將凍結(jié)的細粉放入250ml的離心瓶中，立即參加抽提緩沖液約每克植物5~10ml，輕輕攪拌混勻。4.參加十二烷基肌氨酸鈉使終濃度達1%，于溫育1~2h。5.用JA-14轉(zhuǎn)子4℃，5500g離心10min保存上清，必要時重復(fù)此歩驟以除掉殘渣。6.加人0.6體積yi丙醇，混合，假如看不見沉積，于-20℃放置30min，用JA-14轉(zhuǎn)子4℃，7500g離心15min，棄上清。

酶聯(lián)免疫吸附試驗2023/04/26: 酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linkedimmunesorbentassay,ELISA)是Engvall和Vanweemen于1971年提出的。該法是以固相載體吸附技術(shù)和免疫酶技術(shù)相結(jié)合建立的一種檢測方法，其操作簡便，無需特殊設(shè)備，并具有高度的敏感性和準(zhǔn)確性，所以受到大家的廣泛重視，以致在較短時間內(nèi)，于國內(nèi)外均取得了較快的進展。(一)主要的技術(shù)類型ELISA的技術(shù)類型很多，但以檢測抗體的間接法，及測定抗原的雙抗體夾心法最chang用，現(xiàn)將其操作流程分別簡介如下。1.間接法首先將已知標(biāo)準(zhǔn)抗原

酶標(biāo)記結(jié)合物2023/04/19: 結(jié)合物即酶標(biāo)記的抗體（或抗原），是ELISA中最關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性，也保持了抗體（或抗原）的免疫活性。結(jié)合物中酶與抗體（或抗原）之間有恰當(dāng)?shù)姆肿颖壤诮Y(jié)合試劑中應(yīng)盡量不含有或少含有游離的（未結(jié)合的）酶或游離的抗體（或抗原）。此外，結(jié)合物尚要有良好的穩(wěn)定性。（1）酶用于ELISA的酶應(yīng)符合以下要求：純度高，催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高，專一性強，性質(zhì)穩(wěn)定，來源豐富，價格不貴，制備成酶結(jié)合物后仍繼續(xù)保留它的活性部分和催化能力。最好在受檢標(biāo)本中不存在相同的酶。另外，它的相應(yīng)底物易

ELISA中的試劑－酶的底物相關(guān)知識！2023/04/11: 酶的底物HRP的底物HRP催化過氧化物的氧化反應(yīng)，最ju代表性的過氧化物為H2O2，其反應(yīng)式如下：DH2+H2O2D+H2O上式中，DH2為供氧體，H2O2為受氫體。在ELISA中，DH2一般為無色化合物，經(jīng)酶作用后成為有色的產(chǎn)物，以便作比色測定。常用的供氫體有鄰苯二胺(O-phenylenediamine,OPD)、四甲基聯(lián)苯胺(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS[2,2'-azino-di-(3-ethylbenziazobinesulfonat

ELISA實驗質(zhì)量控制問題2023/03/27: 1.1基本概念1.1.1質(zhì)量控制（QuailityControl,Q.C）質(zhì)量控制是監(jiān)視全過程，排除誤差，防止變化，維持標(biāo)準(zhǔn)化現(xiàn)狀的一個管理過程。這一過程是通過一個反饋環(huán)路進行的。1）確定控制的對象；2）規(guī)定控制對象的標(biāo)準(zhǔn)（預(yù)期值）；3）制定或選擇控制方法和手段；3）測量實際數(shù)據(jù)；4）比較或較對實際數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的差異，并說明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預(yù)定誤差范圍，報警系發(fā)出信號，反饋通道中斷。5）采取行動，解決差異?；謴?fù)原狀（原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)）的手段發(fā)揮作用。質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進行。質(zhì)控圖是把某

ELISA試劑盒的主要四大優(yōu)勢2023/03/24: 上海白益的ELISA試劑盒其擁有靈敏度高、特異性好等特點，一直受到眾多科研工作者的喜愛。除去公司服務(wù)與產(chǎn)品服務(wù)，我司分析出了試劑盒的主要四大優(yōu)勢：1.可以大規(guī)模測定樣品：如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。2.樣品易保存：經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。3.使用效果好①專一性強，抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原(或抗體)，使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。②靈敏度

影響細胞株凍存的因素2023/03/20: 你們細胞是怎么凍存的?求解!!!我的是4度冰箱放半小時,-20度冰箱半小時,然后轉(zhuǎn)移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1個月后,細胞復(fù)蘇就感覺狀態(tài)不太好了!!做實驗前要先學(xué)會凍存，以備自己在后面的實驗中能保持同一來源、穩(wěn)定可靠的細胞，且可減少污染或其它不利影響。影響凍存細胞活性的因素1、細胞凍存保護劑：常用的有二甲基亞砜（DMSO）和甘油，常用的濃度為5%-10%（90%小牛血清）。DMSO對二倍體細胞的毒性較甘油小。2、細胞懸液的凍結(jié)速度：慢凍時冰凍在細胞外形成，因此不致?lián)p害細胞。多數(shù)細胞以

結(jié)晶紫染色液染色原理2023/03/10: 結(jié)晶紫染色液(CrystalVioletStainingSolution)是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成深紫色的染色液。結(jié)晶紫是一種堿性染料，可以與細胞核中的核酸結(jié)合把核染成藍色。無論活細胞還是死細胞都可以染色，但要染活細胞必須控制濃度。結(jié)晶紫染色液在中性、堿性或弱酸性溶液中，細菌細胞通常帶負(fù)電荷，而堿性染料在電離時，其分子的染色部分帶正電荷(酸性染料電離時，其分子的染色部分帶正電荷)，因此堿性染料的染色部分很容易與細菌結(jié)合使細菌著色。染色后的細菌細胞與背景形成鮮明的對比，在顯微鏡

標(biāo)準(zhǔn)品（標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）簡介2023/03/07: 標(biāo)準(zhǔn)品即標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，是中藥標(biāo)準(zhǔn)對照品研究中心代理的作為一種衡量標(biāo)準(zhǔn)；用做藥物方面，則為含量測定中的標(biāo)準(zhǔn)含量。標(biāo)準(zhǔn)品包括化學(xué)計量標(biāo)準(zhǔn)品、冶金標(biāo)準(zhǔn)品和藥檢標(biāo)準(zhǔn)品。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)品是指國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中用于鑒別、檢查、含量測定、雜質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它是國家藥品標(biāo)準(zhǔn)不可分割的組成部分。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的物質(zhì)基礎(chǔ)，它是用來檢查藥品質(zhì)量的一種特殊的專用量具；是測量藥品質(zhì)量的基準(zhǔn)；也是做為校正測試儀器與方法的物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)；在藥品檢驗中，它是確定藥品真?zhèn)蝺?yōu)劣的對照，是控制藥品質(zhì)量必bu可少的工具。中

ELISA試劑盒實踐過程中的一些技巧2023/03/02: ELISA試劑盒實驗看似簡單，其實不然。記得以前一個同學(xué)*次做ELISA實驗，跟我說，ELISA實驗簡直太簡單了，到第2次在次做ELISA實驗的時候，他驚訝了，說結(jié)果差別怎么這么大（同一份標(biāo)本），第三次的時候，他決定認(rèn)真的做一次，爭取做到同一份標(biāo)本，這次讓他感受到ELISA并不是那么簡單，發(fā)覺其實挺難的。今天的文章中為大家講述一些ELISA實驗中的小技巧，希望對大家有所幫助！1.操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等，要先查

蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)問題與解答（二）2023/02/22: 8．哪些技術(shù)需要進行重復(fù)實驗，以及具體采用生物學(xué)重復(fù)還是技術(shù)重復(fù)來完成？Labelfree需要進行三次重復(fù)，而iTRAQ、TMT一般建議做3次實驗重復(fù)，如果實驗方案后期設(shè)計了大量的驗證實驗如WB或ELISA等，最好做也能做兩次重復(fù)；如果不進行重復(fù)實驗后期的驗證實驗也少，在后期發(fā)表文章的時候結(jié)果可能會受到一些審稿人的質(zhì)疑，從而影響文章的發(fā)表，特別是一些高分雜志較為突出，對于立志于發(fā)表高水平文章的研究人員建議最好進行重復(fù)實驗設(shè)計。如果是進行技術(shù)重復(fù)，各實驗結(jié)果之間的數(shù)據(jù)重復(fù)性會更好，而生物學(xué)重復(fù)由于

蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)問題與解答（一）2023/02/17: 1．為什么通過elisa、WB能檢測到的蛋白在itraq實驗中沒有檢測到？人血漿中的蛋白是有上萬種的，而一般質(zhì)譜只能檢測到五六百種，也就是說只占了其中的百分之幾，這是普遍現(xiàn)象，說明咱們的方法是不存在問題的；其次，ELISA/WB與質(zhì)譜相對來說靈敏度不一樣，前者具有放大效應(yīng)，因為其間會用到相應(yīng)的抗體，所以只要選對抗體，感興趣的蛋白基本都會被檢測到；因此，ELISA/WB檢測到的蛋白在組學(xué)中沒有被檢測到也是正常的。2．itraq的結(jié)果，用elisa驗證了兩個差異蛋白，發(fā)現(xiàn)都是陰性結(jié)果，是什么情況，出

大鼠腸內(nèi)酯（enterolactone） ELISA檢測試劑盒說明書2023/02/11: 檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被腸內(nèi)酯抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腸內(nèi)酯（enterolactone）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心1

白益生物elisa試劑盒持續(xù)改進2023/02/06: ELISA試劑盒在過去的一年銷售中創(chuàng)行業(yè)新高，真可謂是創(chuàng)造了ELISA試劑盒新紀(jì)錄，白益生物全體員工倍感欣慰，感謝這么多新老客戶的信賴和支持，后續(xù)會一直秉承嚴(yán)于律己，寬與客戶的宗旨，希望廣大客戶能夠提出寶貴的意見，大家共同發(fā)展。ELISA試劑盒移液器使用時漏液的原因有下幾方面：1、槍頭是否匹配。2、彈簧活塞是否正常。3、如果是易揮發(fā)的液體（許多有機溶劑都如此），則可能是飽和蒸汽壓的問題，可以先吸放幾次液體，然后再移液。4、如不使用，要把移液槍的量程調(diào)至zui大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈

PBS緩沖液制備和作用2023/01/04: 定義：管狀試樣容器，可帶密封蓋或壓蓋。離心管的使用方法：1.因刻度離心管是量入式量器，使用前必須清洗干凈并作干燥處理。2.讀數(shù)時，一定要正確觀察彎液面，否則將引進一定的誤差。3.使用時，離心管的數(shù)量要根據(jù)離心機的型號決定，如用雙只套管的離心機做單只試驗，必須在另一只離心管中裝入同體積的液體，以保持平衡。4.離心管與離心機套管應(yīng)相配合。管子不宜太長，否則轉(zhuǎn)動時易發(fā)生破碎。但也不易太短，太短的管子在空中轉(zhuǎn)動時不穩(wěn)定，并易引起破碎。太粗套不進，太細轉(zhuǎn)動時不穩(wěn)，圓口應(yīng)大于套管內(nèi)徑為準(zhǔn)。5.離心管套入離心

離心管的使用方法注意事項2023/01/04: 定義：管狀試樣容器，可帶密封蓋或壓蓋。離心管的使用方法：1.因刻度離心管是量入式量器，使用前必須清洗干凈并作干燥處理。2.讀數(shù)時，一定要正確觀察彎液面，否則將引進一定的誤差。3.使用時，離心管的數(shù)量要根據(jù)離心機的型號決定，如用雙只套管的離心機做單只試驗，必須在另一只離心管中裝入同體積的液體，以保持平衡。4.離心管與離心機套管應(yīng)相配合。管子不宜太長，否則轉(zhuǎn)動時易發(fā)生破碎。但也不易太短，太短的管子在空中轉(zhuǎn)動時不穩(wěn)定，并易引起破碎。太粗套不進，太細轉(zhuǎn)動時不穩(wěn)，圓口應(yīng)大于套管內(nèi)徑為準(zhǔn)。5.離心管套入離心

酶聯(lián)免疫吸附劑測定原理2022/12/29: 酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）為免疫學(xué)中的經(jīng)典實驗，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點等方面對其進行了詳細介紹。原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量測定的

胰蛋白酶作用2022/12/29: 蛋白酶是水解蛋白質(zhì)肽鏈的一類酶的總稱。按其降解多肽的方式分成內(nèi)肽酶和端肽酶兩類。前者可把大分子量的多肽鏈從中間切斷，形成分子量較小的朊和胨；后者又可分為羧肽酶和氨肽酶，它們分別從多肽的游離羧基末端或游離氨基末端逐一將肽鏈水解生成氨基酸。胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時，胰酶溶液的作用能力強。使用胰酶時，應(yīng)把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。因

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