過氧化氫檢測試劑盒 BB-4703
過氧化氫檢測試劑盒
使用方法:
使用注意事項:
- 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底,避免開蓋時液體灑落。
- 試劑 A使用前需 37℃ 預(yù)溫10分鐘。
- 樣本取樣量要做預(yù)試,吸光度大于 0.8 以上則需將樣本進(jìn)行稀釋。若吸光度小于 0.05 以下,則需將取樣量增加。(標(biāo)準(zhǔn)管中的標(biāo)準(zhǔn)品工作液及空白管中的蒸餾水均要同樣量增加)
1、163mmol/L H2O2 標(biāo)準(zhǔn)品工作液的配制 :
用前按 H2O2 : 蒸餾水 = 1:9 比例稀釋。
2、測定:
A. 血清(漿)中H2O2含量測定
直接取原液檢測
B. 組織、細(xì)胞中H2O2含量測定
樣本前處理
準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積=1:9的比例,加入9倍體積的生理鹽水,冰水浴條件下機(jī)械勻漿,1000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清10勻漿待測。
試 劑 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測 定 管 | |
試劑 A(ml) | 1.0 | 1.0 | 1.0 | |
蒸餾水(ml) | 0.1 |
|
| |
163mM H2O2 標(biāo)準(zhǔn)品工作液(ml) |
| 0.1 |
| |
樣本(ml) |
|
| 0.1 | |
用旋渦混勻器充分混勻,置37℃恒溫水浴1分鐘 | ||||
試劑B(ml) | 1 | 1 | 1 | |
混勻,于波長405nm處,1cm光徑比色杯,蒸餾水調(diào)零,測各管吸光度。
3、計算:
血清(漿)中H2O2含量測定
H2O2含量(mmol/L)=(測定管OD-空白管OD)÷(標(biāo)準(zhǔn)管OD-空白管OD)×標(biāo)準(zhǔn)品濃度(163mmol/l) ×樣品稀釋倍數(shù)
組織、細(xì)胞中H2O2含量測定
H2O2含量(mmol/g)=(測定管OD-空白管OD)÷(標(biāo)準(zhǔn)管OD-空白管OD)×標(biāo)準(zhǔn)品濃度(163mmol/l) ×待測樣本蛋白濃度gprot/L
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