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大鼠膀胱成纖維細胞

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上海邦景實業(yè)有限公司(Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。


上海邦景實業(yè)有限公司(Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學,暨南大學,南京工業(yè)大學,曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務”的企業(yè)文化積極參與生物領域的技術創(chuàng)新和技術服務,力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務!


公司售后服務宗旨:有質量問題可申請退換,有技術疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務,客戶的需求也是我們不斷的更新服務。






進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 膀胱組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自膀胱組織;膀胱是一個儲尿器官,在哺乳類動物,它是由平滑肌組成的一個囊形結構,位于骨盆內,其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區(qū)肌)和黏膜層(極薄的一層移行上皮組織)。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的膀胱成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近年來,堿性成纖維細胞生長因子在膀胱癌發(fā)病過程中的作用、與生物學行為之間的關系以及治療上的應用已受到重視。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠膀胱成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

膀胱組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

卷曲螺旋結構域蛋白11抗體 卵母細胞透明帶糖蛋白2封閉多肽 人磷化糖原合成激3(pGSK-3)ELISA試劑盒

無精癥缺失基因1抗體 碘酪氨脫碘封閉多肽 人磷化肌球蛋白輕鏈(PMLC)試劑盒ELISA

嗅覺受體2A1抗體 鋅指蛋白114封閉多肽 人磷化蛋白激B(P-PKB)ELISA檢測試劑盒

膠質瘤發(fā)病相關蛋白1樣蛋白2抗體 KMO蛋白封閉多肽 人亮氨酰-半胱氨酰氨肽(LNPEP)ELISA試劑盒

少突膠質細胞跨膜蛋白抗體 磷化胰島受體底物-1封閉多肽 人亮氨富含重復絲氨/蘇氨蛋白激2(LRRK2)試劑盒ELISA

HSPC111蛋白抗體 Lon2封閉多肽 人亮氨氨基肽3(LAP3)檢測試劑盒elisa

鈣激活鉀通道蛋白α1抗體 磷化原癌基因c-Met封閉多肽 人連蛋白(zonulin)ELISA試劑盒

溶質載體家族蛋白7成員2抗體 白介-17B受體封閉多肽 人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)試劑盒ELISA

磷化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 MFSD2B蛋白封閉多肽 人粒細胞集落刺激因子(CSF3)抗體ELISA檢測試劑盒

MPRIP蛋白抗體 膜轉運蛋白XK封閉多肽 人利什曼原蟲(Leishmania)抗體(IgG)ELISA試劑盒

冠狀病毒表面S蛋白抗體 異檸檬脫氫3 beta亞基封閉多肽 人李斯特菌抗體(IgM)試劑盒ELISA

KBP蛋白抗體 磷肌醇相互作用蛋白封閉多肽 人李斯特菌抗體(IgG)檢測試劑盒elisa

G蛋白β3抗體/核苷結合蛋白β亞基3抗體 磷化肌細胞增強因子2封閉多肽 人冷誘導RNA結合蛋白(CIRBP)ELISA試劑盒

干擾誘導蛋白P78抗體 突觸核膜蛋白3封閉多肽 人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 試劑盒ELISA

EIF4E2蛋白抗體 膜蛋白EVC2封閉多肽 人類似cDNA順序BC027382 ELISA檢測試劑盒

磷化δ連環(huán)蛋白抗體 鋅指蛋白909封閉多肽 人類免疫缺陷病毒(HIV)1+2 抗體 ELISA試劑盒

癌基因RAF1抗體 二肽基肽9封閉多肽 人類肌腱蛋白c(TNC)試劑盒ELISA

英文名稱: C1QA 3號染色體開放閱讀框59封閉多肽 人類肌腱蛋白(TN)檢測試劑盒elisa
大鼠膀胱成纖維細胞GC-2 SPd(ts)小鼠精母系細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GC-2 SPd(ts)細胞專用培養(yǎng)基125ML

GC-2 SPd(ts)小鼠精母系細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GC-2 SPd(ts)細胞專用培養(yǎng)基500ML

GL-261小鼠膠質瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GL-261細胞專用培養(yǎng)基125ML

GL-261小鼠膠質瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GL-261細胞專用培養(yǎng)基500ML

GL-261+luc小鼠膠質瘤熒光標記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GL-261+luc細胞專用培養(yǎng)基125ML

GL-261+luc小鼠膠質瘤熒光標記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GL-261+luc細胞專用培養(yǎng)基500ML

GT1-1小鼠垂體瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GT1-1細胞專用培養(yǎng)基125ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 




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