外泌體整體實(shí)驗(yàn)

1、提供外泌體整體實(shí)驗(yàn)方案：客戶根據(jù)課題標(biāo)書(shū)及需做實(shí)驗(yàn)的主體內(nèi)容，擬定并提供初步的項(xiàng)目方案，含課題申請(qǐng)書(shū)，實(shí)驗(yàn)方案，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)思路，實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)等與實(shí)驗(yàn)相關(guān)等內(nèi)容和資料?；蛘哂杉蚊缹?shí)驗(yàn)協(xié)助實(shí)驗(yàn)委托者完成外泌體整體實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)。

2、項(xiàng)目評(píng)估報(bào)價(jià)：公司技術(shù)團(tuán)隊(duì)根據(jù)客戶提供的相關(guān)資料，綜合評(píng)估項(xiàng)目可行性，與客戶共同確定準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目執(zhí)行方案，給出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)價(jià)格。嘉美實(shí)驗(yàn)協(xié)助設(shè)計(jì)的課題直接給出準(zhǔn)確的報(bào)價(jià)。
3、簽訂服務(wù)協(xié)議：簽署服務(wù)協(xié)議并預(yù)付部分費(fèi)用，做好實(shí)驗(yàn)初步準(zhǔn)備及項(xiàng)目預(yù)安排。
4、執(zhí)行服務(wù)項(xiàng)目：正式啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，全面展開(kāi)實(shí)驗(yàn)，確保項(xiàng)目有效執(zhí)行。
5、溝通項(xiàng)目進(jìn)展：及時(shí)溝通反饋實(shí)驗(yàn)的Newest進(jìn)展，隨時(shí)了解掌控實(shí)驗(yàn)的Newest動(dòng)態(tài)。

6、完成項(xiàng)目交付：支付剩余尾款，交付實(shí)驗(yàn)結(jié)果，正確應(yīng)用實(shí)驗(yàn)結(jié)果，提供售后服務(wù)。

一、外泌體介紹
外泌體（Exosome），一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，直徑約為40-100nm。20世紀(jì)80年代，外泌體被描述為一種從網(wǎng)織紅細(xì)胞分泌的內(nèi)體來(lái)源的囊泡。在近些年的實(shí)驗(yàn)研究中，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸，能介導(dǎo)體內(nèi)不同細(xì)胞類(lèi)型之間的細(xì)胞間通訊，從而影響正常和病理狀態(tài)。

近的研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞外囊泡（EVs，包括 Exosomes和Microvesicles等）已經(jīng)成為細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)，參與原核生物和高等真核生物細(xì)胞之間的生物信號(hào)傳遞，以調(diào)節(jié)不同范圍的生物過(guò)程。細(xì)胞外囊泡在很多生理病理上也起著重要的作用，如免疫中抗原呈遞、腫瘤的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等。此外，未修飾和工程化的細(xì)胞外囊泡可能在大分子藥物遞送中具有應(yīng)用價(jià)值。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，能很好的保護(hù)其包被的物質(zhì)，且能靶向特定細(xì)胞或組織，因此是一種很好靶向給藥系統(tǒng)（targeted delivery system）。

外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn)，由于它在體內(nèi)存在的廣泛性和獲取的便捷性，已經(jīng)成為了疾病診斷治療的潛在有效方式，在精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)發(fā)展上有著光明的前景。

二、外泌體部分單項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目
1、外泌體粒徑分析

從細(xì)胞上清、外周血、尿液、腹水等提取分離的外泌體，通常需要對(duì)其粒徑進(jìn)行檢測(cè)，已確定不同來(lái)源外泌體的粒徑范圍。根據(jù)Stokes-Einstein原理，外泌體顆粒的布朗運(yùn)動(dòng)會(huì)導(dǎo)致動(dòng)態(tài)光散射效應(yīng)，散射光波動(dòng)隨時(shí)間發(fā)生變化，檢測(cè)器將散射光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電流信號(hào)并做運(yùn)算處理，通過(guò)外泌體的溶液擴(kuò)散系數(shù)得出其粒徑分布。嘉美實(shí)驗(yàn)提供優(yōu)質(zhì)可靠的外泌體粒徑分析服務(wù)，作為外泌體整體研究服務(wù)的一項(xiàng)重要內(nèi)容，確保了后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。

2、外泌體表面蛋白標(biāo)記檢測(cè)
從細(xì)胞上清、外周血、尿液或腹水等中提取的外泌體，常見(jiàn)的特異性標(biāo)記蛋白為CD63 和CD81，使用熒光直標(biāo)抗體和流式細(xì)胞儀檢測(cè)，能夠統(tǒng)計(jì)出提取分離之后外泌體的陽(yáng)性百分比，從而判斷外泌體的純度。嘉美實(shí)驗(yàn)提供外泌體表面標(biāo)記物檢測(cè)服務(wù)，作為外泌體整體研究服務(wù)的一項(xiàng)重要內(nèi)容，確保了后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。

3、外泌體Small RNA測(cè)序
  1）服務(wù)優(yōu)勢(shì)
    （1）patent外泌體抽提技術(shù)，配合*微量RNA建庫(kù)方法，提供miRNA測(cè)序整體服務(wù)
    （2）采用3個(gè)外泌體或囊泡數(shù)據(jù)庫(kù)，注釋信息更完善，為深入挖掘結(jié)果提供佐證
    （3）提供腫瘤研究的臨床數(shù)據(jù)分析，使得分析結(jié)果更加飽滿
    （4）4個(gè)Newest數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)靶基因，結(jié)果更準(zhǔn)確
 

 2）外泌體中miRNA常見(jiàn)功能
Small RNA主要包含miRNA、piRNA、tsRNA和snoRNA等RNA分子。小RNA參與基因表達(dá)與調(diào)控、RNA的加工與剪切、蛋白質(zhì)翻譯、遺傳“入侵”抑制、配子發(fā)生等重要生物學(xué)過(guò)程，是生命活動(dòng)中不可少的調(diào)控因子。微小RNA（microRNA，簡(jiǎn)稱(chēng)miRNA）是小RNA的主要部分，已被證明與包括癌癥、心血管疾病、免疫系統(tǒng)疾病在內(nèi)的多種疾病密切相關(guān)。如：miRNA可以被外泌體運(yùn)輸?shù)狡渌?xì)胞組織，為癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移創(chuàng)造合適的微環(huán)境，從而促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移。此外，外泌體miRNA也可以作為疾病的生物標(biāo)志物，廣泛應(yīng)用于疾病診斷、個(gè)性化治療和預(yù)后等領(lǐng)域。高通量測(cè)序技術(shù)可以在單次測(cè)序中獲得樣品中所有小RNA的序列信息，從而分析不同疾病狀態(tài)、不同樣品來(lái)源、不同處理?xiàng)l件下小RNA的表達(dá)水平，并精確比較其之間的小RNA表達(dá)差異，從而為后續(xù)研究小RNA的生物學(xué)意義提供指引。

  3）外泌體研究全面技術(shù)路線

 
  4）高通量測(cè)序與分析流程

  5）生物信息學(xué)分析項(xiàng)目

4、外泌體 lncRNA 測(cè)序
  1）服務(wù)優(yōu)勢(shì)
    （1）patent外泌體抽提技術(shù)，配合*微量RNA建庫(kù)方法，提供lncRNA測(cè)序整體服務(wù)
    （2）采用3個(gè)外泌體或囊泡數(shù)據(jù)庫(kù)，注釋信息更完善，為深入挖掘結(jié)果提供佐證
    （3）多種差異表達(dá)計(jì)算方法，可根據(jù)項(xiàng)目情況靈活選擇算法，展現(xiàn)更*的數(shù)據(jù)
    （4）全新的比對(duì)軟件，分析速度更快，結(jié)果更準(zhǔn)確
    （5）提供腫瘤研究的臨床數(shù)據(jù)分析，使得分析結(jié)果更加飽滿。

  2）外泌體研究全面技術(shù)路線

 
3）高通量測(cè)序與分析流程

 
4）生物信息學(xué)分析項(xiàng)目

三、外泌體整體實(shí)驗(yàn)成果展
1、華中科技大學(xué)的郭安源教授和李秋柏教授合作發(fā)布FRIST大樣本量的細(xì)胞外膜泡miRNA數(shù)據(jù)庫(kù)
Liu, T., et al. (2018). "EVmiRNA: a database of miRNA profiling in extracellular vesicles." Nucleic Acids Res.  IF=11.561

2、中山大學(xué)腫瘤防治中心謝丹教授等：外泌體中的circRNA-PRMT5通過(guò)miR-30c海綿促進(jìn)膀胱尿路上皮癌的轉(zhuǎn)移并誘導(dǎo)EMT
Chen, X., et al. (2018). "PRMT5 Circular RNA Promotes Metastasis of Urothelial Carcinoma of the Bladder through Sponging miR-30c to Induce Epithelial-Mesenchymal Transition." Clin Cancer Res.  IF=10.199

3、東南大學(xué)中大醫(yī)院馬坤嶺教授：血小板微粒介導(dǎo)早期糖尿病腎病的腎小球內(nèi)皮損傷
Zhang, Y., et al. (2018). "Platelet Microparticles Mediate Glomerular Endothelial Injury in Early Diabetic Nephropathy." J Am Soc Nephrol 29(11): 2671-2695.  IF=8.655
腎小球內(nèi)皮功能障礙在早期糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制中起著至關(guān)重要的作用，這可能是由循環(huán)代謝異常引起的。血小板微粒、從活化的血小板釋放的細(xì)胞外囊泡，近已被發(fā)現(xiàn)是血管功能障礙的新型調(diào)節(jié)劑。該報(bào)道通過(guò)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病大鼠和原代大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞研究了血小板微粒對(duì)早期糖尿病腎病腎小球內(nèi)皮損傷的影響。通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)測(cè)量分離的血小板微粒。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，糖尿病大鼠血漿血小板微粒明顯增加，阿司匹林治療的動(dòng)物受到抑制。在培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞中，血小板微粒誘導(dǎo)活性氧的產(chǎn)生，降低一氧化氮水平，抑制內(nèi)皮一氧化氮合酶和SOD的活性，增加腎小球內(nèi)皮屏障的滲透性，以及減少內(nèi)皮表層的厚度。相反，阿司匹林對(duì)體內(nèi)血小板微粒的抑制改善了腎小球內(nèi)皮損傷。進(jìn)一步分析表明，血小板微粒激活了腎小球內(nèi)皮細(xì)胞中mTORC1通路；雷帕霉素或raptor siRNA對(duì)mTORC1途徑的抑制在體內(nèi)和體外顯著保護(hù)免受微粒誘導(dǎo)的腎小球內(nèi)皮損傷。此外，血小板微粒來(lái)源的趨化因子配體7（CXCL7）促成腎小球內(nèi)皮損傷，并且使用CXCL7中和抗體或用CXCR1和CXCR2的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑阻斷CXCL7受體來(lái)拮抗CXCL7顯著減弱了這種損傷。這些研究結(jié)果證明了血小板微粒在腎小球內(nèi)皮功能障礙中的致病作用，并提出了一種潛在的治療靶點(diǎn)CXCL7，用于治療早期糖尿病腎病。

4、武漢大學(xué)謝敏教授、許昱教授：通過(guò)ZnO納米線涂覆的三維支架芯片裝置檢測(cè)外泌體
Chen, Z., et al. (2018). "Detection of exosomes by ZnO nanowires coated three-dimensional scaffold chip device." Biosens Bioelectron 122: 211-216.  IF=8.173
外泌體有可能成為用于非侵入性癌癥診斷的新型生物標(biāo)志物。然而，在常規(guī)臨床環(huán)境中經(jīng)濟(jì)有效地檢測(cè)外泌體仍然具有挑戰(zhàn)性。該報(bào)道提出了ZnO納米線涂覆的三維（3D）支架芯片裝置，用于有效的免疫捕獲和外泌體的經(jīng)典可視化比色檢測(cè)。芯片器件由自立式ZnO納米線陣列覆蓋的3D聚二甲基硅氧烷（PDMS）支架組成。3D支架的互連微孔誘導(dǎo)具有混沌或渦旋特征的流體流動(dòng)，并且ZnO納米線陣列提供用于固定外泌體特異性抗體的大表面積以及用于保留外泌體的尺寸排阻樣效應(yīng)。這些協(xié)同且顯著增強(qiáng)了外泌體在高流速下的捕獲。通過(guò)辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗體檢測(cè)捕獲的外泌體，其可以啟動(dòng)基于四甲基聯(lián)苯胺（TMB）的比色檢測(cè)。外泌體的定量讀數(shù)很容易通過(guò)紫外-可見(jiàn)光譜法或酶標(biāo)儀實(shí)現(xiàn)，線性范圍為2.2×10（5）至2.4×10（7）個(gè)顆粒/μL，小可檢測(cè)濃度為2.2×10（4）個(gè)顆粒/μL。該芯片裝置適用于臨床樣品，其中癌癥患者與健康個(gè)體相比顯示出外泌體數(shù)量在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著增加。因此，該芯片設(shè)備具有成本效益且易于使用，便于可見(jiàn)和比色測(cè)定，對(duì)臨床應(yīng)用具有高靈敏度。

5、南方醫(yī)科大學(xué)：通過(guò)Au Nanoflare探針原位檢測(cè)血漿外泌體miRNA-1246用于乳腺癌診斷
Zhai, L., et al. (2018). "In Situ Detection of Plasma Exosomal MicroRNA-1246 for Breast Cancer Diagnostics by a Au Nanoflare Probe." ACS Appl Mater Interfaces.  IF=8.097
乳腺癌是女性癌癥死亡的第二個(gè)原因。早期檢測(cè)、治療和轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)對(duì)于預(yù)后非常重要。盡管傳統(tǒng)的診斷方法，例如乳房X射線乳房攝影和圖像定位活組織檢查可準(zhǔn)確檢測(cè)，但它們可能對(duì)患者造成放射性或侵入性損傷。液體活檢作為一種非侵入性方法，便于在臨床癌癥預(yù)后、轉(zhuǎn)移評(píng)估和復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)中重復(fù)采樣。包裹在循環(huán)外泌體中的微小RNA由于其癌癥特異性表達(dá)譜而有希望成為候選癌癥生物標(biāo)志物。該研究報(bào)告通過(guò)核酸功能化的Au nanoflare探針在人血漿外泌體中原位檢測(cè)miR-1246作為乳腺癌生物標(biāo)志物。由于該方法從血漿樣品中分離外泌體不需要耗時(shí)太長(zhǎng)且叫廉價(jià)，也不需轉(zhuǎn)染手段，Au納米熒光探針可以直接進(jìn)入血漿外泌體特異性靶向miR-1246以定量地產(chǎn)生熒光信號(hào)。用探針?lè)跤?小時(shí)只需要40 μL血漿，使信號(hào)足夠靈敏，可以將乳腺癌樣本與正常對(duì)照區(qū)分開(kāi)來(lái)。使用該測(cè)定法檢測(cè)的血漿miR-1246水平作為標(biāo)記物，從28個(gè)健康對(duì)照中區(qū)分46個(gè)乳腺癌患者，在optimum截止值下具有100％的靈敏度和92.9％的特異性。Au納米熒光探針的這種簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、靈敏且經(jīng)濟(jì)的液體活檢有效地被開(kāi)發(fā)為用于臨床適應(yīng)的非侵入性乳腺癌診斷測(cè)定。

6、【綜述】山東大學(xué)：藥物納米制劑靶向腦的Newest進(jìn)展
Khan, A. R., et al. (2018). "Recent progress of drug nanoformulations targeting to brain." J Control Release 291: 37-64.  IF=7.877
這是一篇關(guān)于跨越血腦屏障（BBB）向腦組織遞送藥物的綜述文章。

7、南京醫(yī)科大學(xué)：外泌體傳遞的lncRNA PTENP1抑制膀胱癌進(jìn)展
Zheng, R., et al. (2018). "Exosome-transmitted long non-coding RNA PTENP1 suppresses bladder cancer progression." Mol Cancer 17(1): 143.  IF=7.776


8、江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院：腫瘤來(lái)源的外泌體誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞的N2極化以促進(jìn)胃癌細(xì)胞遷移
Zhang, X., et al. (2018). "Tumor-derived exosomes induce N2 polarization of neutrophils to promote gastric cancer cell migration." Mol Cancer 17(1): 146.  IF=7.776
 

9、山東大學(xué)：尿液中外泌體lncRNA的表達(dá)特征作為膀胱癌診斷和復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)的新型非侵入性生物標(biāo)志物
Zhan, Y., et al. (2018). "Expression signatures of exosomal long non-coding RNAs in urine serve as novel non-invasive biomarkers for diagnosis and recurrence prediction of bladder cancer." Mol Cancer 17(1): 142.  IF=7.776
近，已有很多報(bào)道提出外泌體長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA）的表達(dá)特征作為癌癥檢測(cè)的潛在的非侵入性生物標(biāo)志物。這項(xiàng)研究的目的是開(kāi)發(fā)一種尿外泌體（UE）衍生的lncRNA組，用于膀胱癌（BC）的診斷和復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)。進(jìn)行定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）以篩選和評(píng)估訓(xùn)練組（208個(gè)尿液樣品）和驗(yàn)證組（160個(gè)尿液樣品）中8個(gè)候選lncRNA的表達(dá)。建立由三種不同表達(dá)的lncRNA（MALAT1、PCAT-1和SPRY4-IT1）組成的組用于訓(xùn)練組中的BC診斷。隨后，在驗(yàn)證組中進(jìn)一步驗(yàn)證了該組的性能。此外，Kaplan-Meier分析表明，PCAT-1和MALAT1的上調(diào)與非肌肉浸潤(rùn)性BC（NMIBC）的無(wú)復(fù)發(fā)生存率（RFS）無(wú)關(guān)，多變量Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析顯示，外泌體PCAT-1過(guò)表達(dá)是NMIBC RFS的獨(dú)立預(yù)后因素?？傊芯拷Y(jié)果表明，UE衍生的lncRNAs在BC的診斷和預(yù)后中具有相當(dāng)大的臨床價(jià)值。

10、武漢大學(xué)人民醫(yī)院：腫瘤來(lái)源的外泌體miR-155激活腫瘤相關(guān)的惡病質(zhì)發(fā)生終促進(jìn)腫瘤進(jìn)展
Wu, Q., et al. (2018). "Tumour-originated exosomal miR-155 triggers cancer-associated cachexia to promote tumour progression." Mol Cancer 17(1): 155.  IF=7.776
武漢大學(xué)人民醫(yī)院：腫瘤來(lái)源的外泌體miR-155激活腫瘤相關(guān)的惡病質(zhì)發(fā)生終促進(jìn)腫瘤進(jìn)展

11、【綜述】鄭州大學(xué)一附院：外泌體miRNA對(duì)癌癥生物學(xué)和臨床應(yīng)用的影響
Sun, Z., et al. (2018). "Effect of exosomal miRNA on cancer biology and clinical applications." Mol Cancer 17(1): 147.  IF=7.776

12、香港城市大學(xué)：利用3D等離子體光子晶體生物傳感器高度靈敏地檢測(cè)外泌體
Zhu, S., et al. (2018). "Highly sensitive detection of exosomes by 3D plasmonic photonic crystal biosensor." Nanoscale 10(42): 19927-19936.  IF=7.233

13、中科院生物物理所&東南大學(xué)：用于白血病源外泌體的靈敏熒光生物傳感的雙信號(hào)放大平臺(tái)
Huang, L., et al. (2018). "A dual-signal amplification platform for sensitive fluorescence biosensing of leukemia-derived exosomes." Nanoscale.  IF=7.233

14、南京醫(yī)科大學(xué)：外泌體介導(dǎo)自發(fā)性高血壓大鼠外膜成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)移ACE（血管緊張素轉(zhuǎn)換酶）促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞遷移
Tong, Y., et al. (2018). "Exosome-Mediated Transfer of ACE (Angiotensin-Converting Enzyme) From Adventitial Fibroblasts of Spontaneously Hypertensive Rats Promotes Vascular Smooth Muscle Cell Migration." Hypertension 72(4): 881-888.  IF=6.823
血管平滑肌細(xì)胞（VSMC）的遷移是高血壓血管重塑的關(guān)鍵。血管外膜成纖維細(xì)胞（AF）在血管結(jié)構(gòu)的穩(wěn)態(tài)中很重要。本研究旨在探討AF外泌體（AFE）在VSMC遷移和基礎(chǔ)機(jī)制中的作用。從自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）和Wistar-Kyoto（WKY）大鼠的主動(dòng)脈獲得原代VSMC和AF。用Boyden室測(cè)定法和傷口愈合測(cè)定法評(píng)估VSMC遷移。來(lái)自SHR的AFE得到促進(jìn)，但來(lái)自WKY大鼠的AFE對(duì)VSMC遷移沒(méi)有顯著影響。通過(guò)外泌體抑制劑GW4869、AT1R（Ang II [血管緊張素II] 1型受體）拮抗劑氯沙坦或ACE（血管緊張素轉(zhuǎn)換酶）卡托普利的抑制劑來(lái)抑制AFE對(duì)VSMC遷移的影響。SHR的AFE含量和活性遠(yuǎn)高于WKY大鼠。來(lái)自SHR的AFE和來(lái)自WKY大鼠的AFE之間的Ang II和AT1R mRNA和蛋白質(zhì)水平?jīng)]有顯著差異。來(lái)自SHR的AFE增加WKY大鼠和SHR的VSMC中的Ang II和ACE含量和ACE活性?？ㄍ衅绽深A(yù)防Ang II含量和ACE活性的變化。AF中的ACE敲低降低了SHR中AFE的ACE含量和活性，并抑制了AFE誘導(dǎo)的WKY大鼠和SHR大鼠VSMC的遷移。這些結(jié)果表明，來(lái)自SHR的AF的外泌體將ACE轉(zhuǎn)移至VSMC，其增加Ang II水平并激活VSMC中的AT1R，從而促進(jìn)VSMC遷移。

15、武漢大學(xué)：黑色素瘤細(xì)胞分泌的外泌體miR-155-5p通過(guò)SOCS1/JAK2/STAT3信號(hào)通路誘導(dǎo)癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的促血管生成
Zhou, X., et al. (2018). "Melanoma cell-secreted exosomal miR-155-5p induce proangiogenic switch of cancer-associated fibroblasts via SOCS1/JAK2/STAT3 signaling pathway." J Exp Clin Cancer Res 37(1): 242.  IF=6.217
背景：癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAF）促進(jìn)腫瘤血管生成已被廣泛報(bào)道。然而，CAF的促血管生成的潛在機(jī)制仍然知之甚少。本研究旨在闡明CAF促血管生成的機(jī)制。用B16和B16F10衍生的外泌體處理NIH/3T3細(xì)胞。然后通過(guò)RT-PCR和Western印跡檢測(cè)CAFs標(biāo)記和促血管生成因子。進(jìn)行CCK-8測(cè)定、transwell遷移測(cè)定，管形成測(cè)定和體內(nèi)Matrigel栓測(cè)定以確定CAF的促血管生成能力。Western blot和AG490用于研究JAK2/STAT3信號(hào)通路在CAF促血管生成中的作用。使用生物信息學(xué)分析，熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定，microRNA模擬物和抑制劑以及異種移植物模型來(lái)研究mmu-miR-155-5p（miR-155）在CAF的促血管生成中的作用。結(jié)果顯示黑色素瘤細(xì)胞分泌的外泌體可以誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞重編程為CAFs，并且外泌體miR-155可以觸發(fā)CAF的促血管生成。通過(guò)直接靶向細(xì)胞因子的抑制劑，機(jī)制上可將外泌體miR-155遞送到成纖維細(xì)胞中并通過(guò)靶向SOCS1促進(jìn)促血管生成因子的表達(dá)，包括VEGFa、FGF2和MMP9。SOCS1的下調(diào)激活JAK2/STAT3信號(hào)傳導(dǎo)途徑并提高成纖維細(xì)胞中VEGFa、FGF2和MMP9的表達(dá)水平。用含有過(guò)表達(dá)miR-155的外泌體處理可以促進(jìn)血管生成，并且黑素瘤細(xì)胞分泌的外泌體中miR-155的減少在體外和體內(nèi)減緩血管生成。這些結(jié)果表明，通過(guò)SOCS1/JAK2/STAT3信號(hào)通路促進(jìn)受體成纖維細(xì)胞中促血管生成因子的表達(dá)，黑素瘤細(xì)胞分泌的外泌體miR-155可誘導(dǎo)CAF的促血管生成。盡管腫瘤血管生成受各種因素的調(diào)節(jié)，但外泌體miR-155可能是控制黑素瘤血管生成的潛在靶標(biāo)，并可用于建立治療黑素瘤的新策略。

16、清華大學(xué)：基于通用Ti3C2 MXenes的自標(biāo)準(zhǔn)比率熒光共振能量轉(zhuǎn)移平臺(tái)用于高靈敏度檢測(cè)外泌體
Zhang, Q., et al. (2018). "Universal Ti3C2 MXenes Based Self-Standard Ratiometric Fluorescence Resonance Energy Transfer Platform for Highly Sensitive Detection of Exosomes." Anal Chem.  IF=6.042
外泌體作為疾病預(yù)測(cè)和診斷的新型非侵入性生物標(biāo)志物，在監(jiān)測(cè)與癌癥相關(guān)的公共衛(wèi)生問(wèn)題方面顯示出了令人著迷的前景。該研究將*的Cy3標(biāo)記的CD63適體（Cy3-CD63適體）/Ti3C2 MXenes納米復(fù)合物構(gòu)建為用于定量檢測(cè)外泌體的自標(biāo)準(zhǔn)比率熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）納米探針。Cy3-CD63適體可以通過(guò)適體和MXenes之間的氫鍵和金屬螯合物相互作用選擇性地吸附到Ti3C2 MXene納米片上，并且由于Cy3和MXenes之間的FRET，來(lái)自Cy3-CD63適體的熒光信號(hào)被快速淬滅。加入外泌體后Cy3的熒光大大恢復(fù)，外泌體可以與適體特異性結(jié)合，并且由于適體和CD63蛋白在外泌體表面上的高親和力而從Ti3C2 MXenes的表面釋放。同時(shí)，MXenes在整個(gè)過(guò)程中的自發(fā)熒光信號(hào)變化不大，可作為標(biāo)準(zhǔn)參考?；谧詷?biāo)準(zhǔn)開(kāi)啟的FRET生物傳感平臺(tái)，外泌體的檢測(cè)極限為1.4×10（3）顆粒mL（-1），比常規(guī)ELISA方法低1000倍以上。該熒光傳感器還可結(jié)合熒光共聚焦掃描顯微鏡圖像用于鑒定外泌體表面上的多種生物標(biāo)志物和不同種類(lèi)的外泌體。所提出的策略不僅為外泌體提供了通用的納米平臺(tái)，而且可以廣泛地?cái)U(kuò)展到多種生物標(biāo)記物檢測(cè)，這可能有望使MXenes成為生物學(xué)領(lǐng)域的強(qiáng)大候選者。

17、湖北中醫(yī)藥大學(xué)：基于適體納米探針的外泌體表面蛋白質(zhì)分析和檢測(cè)新方法——ExoAPP
Jin, D., et al. (2018). "ExoAPP: Exosome-Oriented, Aptamer Nanoprobe-Enabled Surface Proteins Profiling and Detection." Anal Chem.  IF=6.042
攜帶親代細(xì)胞遺傳分子標(biāo)記的腫瘤外泌體正在作為癌癥診斷中的細(xì)胞“替代物”出現(xiàn)。外泌體的分子譜和檢測(cè)提供了對(duì)癌癥進(jìn)展?fàn)顟B(tài)的*途徑，但在技術(shù)上仍然具有挑戰(zhàn)性。該研究報(bào)告了一種外泌體導(dǎo)向，基于適體納米探針的分析（ExoAPP）測(cè)定，以鑒定表面蛋白質(zhì)表型和量化癌癥外泌體。ExoAPP將石墨烯氧化物（GO）與靶向響應(yīng)適配體連接，通過(guò)補(bǔ)充酶輔助的外泌體再循環(huán)來(lái)分析五種細(xì)胞類(lèi)型的外泌體標(biāo)記，揭示異質(zhì)模式。該測(cè)定實(shí)現(xiàn)了低至1.6 x 10（5）粒子的檢測(cè)限/mL，比其他同類(lèi)方法降低了幾個(gè)數(shù)量級(jí)。這種靈敏的ExoAPP測(cè)定可通過(guò)異質(zhì)外泌體監(jiān)測(cè)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)變，而不涉及經(jīng)常在基于GO的貨物遞送中發(fā)生的細(xì)胞內(nèi)化。使用ExoAPP分析來(lái)自前列腺癌患者的血液樣本，發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)表面PSMA鑒定靶外泌體，表明它們?cè)谂R床診斷中的潛力。

18、清華大學(xué)：從血漿中快速分離和可視化檢測(cè)腫瘤來(lái)源的外泌體
Chen, J., et al. (2018). "Rapid Isolation and Visible Detection of Tumor-derived Exosomes from Plasma." Anal Chem.  IF=6.042
外泌體是從多種細(xì)胞釋放的納米級(jí)細(xì)胞外囊泡（30-120 nm），其為癌癥的非侵入性診斷提供了有希望的生物標(biāo)志物。然而，傳統(tǒng)的外泌體分離方法繁瑣，非標(biāo)準(zhǔn)化，并且需要龐大的儀器，因此限制了其臨床應(yīng)用。本文*提出了一種基于陰離子交換（AE）的分離方法，在30分鐘內(nèi)通過(guò)AE磁珠直接從血漿和細(xì)胞培養(yǎng)基中分離外泌體。通過(guò)AE磁珠分離的外泌體具有比UC更高的回收效率（> 90％）和更少的蛋白質(zhì)雜質(zhì)。然后，*用適體封端的Fe3O4納米顆粒以可視化、無(wú)標(biāo)記和定量方式檢測(cè)血漿中的前列腺癌（PCa）外泌體。PCa外泌體的線性范圍估計(jì)為0.4×10（8）至6.0×10（8）個(gè)顆粒/mL，檢測(cè)限為3.58×10（6）個(gè)顆粒/mL。本研究為外泌體的快速分離和可視化檢測(cè)提供了一種有效而實(shí)用的方法，有望用于早期診斷PCa。

19、南京醫(yī)科大學(xué)一附院：微小RNA和長(zhǎng)鏈非編碼RNA在抗癌治療中的潛在調(diào)節(jié)作用
Xie, M., et al. (2018). "Potential Regulatory Roles of MicroRNAs and Long Noncoding RNAs in Anticancer Therapies." Mol Ther Nucleic Acids 13: 233-243.  IF=5.66

20、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)：外泌體15-LO2在體內(nèi)和體外介導(dǎo)缺氧誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈高壓
Zhang, M., et al. (2018). "Exosomal 15-LO2 mediates hypoxia-induced pulmonary artery hypertension in vivo and in vitro." Cell Death Dis 9(10): 1022.  IF=5.638

21、南京醫(yī)科大學(xué)：DNA甲基化介導(dǎo)的miR-486-5p沉默通過(guò)激活PLAGL2信號(hào)通路促進(jìn)結(jié)直腸癌增殖和轉(zhuǎn)移
Liu, X., et al. (2018). "DNA-methylation-mediated silencing of miR-486-5p promotes colorectal cancer proliferation and migration through activation of PLAGL2/IGF2/beta-catenin signal pathways." Cell Death Dis 9(10): 1037.  IF=5.638

22、安徽醫(yī)科大學(xué)：hsa-miR-500a-3P通過(guò)靶向腎上皮細(xì)胞中MLKL介導(dǎo)的壞死性凋亡來(lái)減輕腎損傷
Jiang, L., et al. (2018). "hsa-miR-500a-3P alleviates kidney injury by targeting MLKL-mediated necroptosis in renal epithelial cells." FASEB J: fj201801711R.  IF=5.595

23、鄭州大學(xué)：間充質(zhì)干細(xì)胞衍生的外泌體通過(guò)下調(diào)脊髓損傷中磷酸化的NFkappaB P65亞基來(lái)減少A1星形膠質(zhì)細(xì)胞
Wang, L., et al. (2018). "Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes Reduce A1 Astrocytes via Downregulation of Phosphorylated NFkappaB P65 Subunit in Spinal Cord Injury." Cell Physiol Biochem 50(4): 1535-1559.  IF=5.5

24、南京大學(xué)：在外泌體上進(jìn)行Lectin介導(dǎo)的原位滾環(huán)擴(kuò)增，用于探測(cè)癌癥相關(guān)的聚糖模式
Feng, Y., et al. (2018). "Lectin-mediated in situ rolling circle amplification on exosomes for probing cancer-related glycan pattern." Anal Chim Acta 1039: 108-115.  IF=5.123

25、南京醫(yī)科大學(xué)&東南大學(xué)：外泌體——癌細(xì)胞耐藥性的新型介質(zhì)
Zhang, H. D., et al. (2018). "Exosome: a novel mediator in drug resistance of cancer cells." Epigenomics.  IF=4.979

26、中山大學(xué)第三附屬醫(yī)院：MSC衍生的外泌體通過(guò)在海綿體神經(jīng)損傷的大鼠模型中減輕海綿體平滑肌細(xì)胞凋亡來(lái)改善勃起功能障礙
Ouyang, X., et al. (2018). "MSC-derived exosomes ameliorate erectile dysfunction by alleviation of corpus cavernosum smooth muscle apoptosis in a rat model of cavernous nerve injury." Stem Cell Res Ther 9(1): 246.  IF=4.963

27、中山大學(xué)*附屬醫(yī)院：源自miR-92a-3p過(guò)表達(dá)人間充質(zhì)干細(xì)胞的外泌體通過(guò)靶向WNT5A增強(qiáng)軟骨形成并抑制軟骨降解
Mao, G., et al. (2018). "Exosomes derived from miR-92a-3p-overexpressing human mesenchymal stem cells enhance chondrogenesis and suppress cartilage degradation via targeting WNT5A." Stem Cell Res Ther 9(1): 247.  IF=4.963

28、天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院：過(guò)表達(dá)IL-35的間充質(zhì)干細(xì)胞——一種新的免疫抑制策略和誘導(dǎo)移植耐受的治療靶點(diǎn)
Guo, H., et al. (2018). "Mesenchymal stem cells overexpressing IL-35: a novel immunosuppressive strategy and therapeutic target for inducing transplant tolerance." Stem Cell Res Ther 9(1): 254.  IF=4.963

29、同濟(jì)大學(xué)：表征三種不同類(lèi)型的細(xì)胞外囊泡及其對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響
Yu, S., et al. (2019). "Characterization of three different types of extracellular vesicles and their impact on bacterial growth." Food Chem 272: 372-378.  IF=4.946

30、蘇州大學(xué)一附院：具有缺血心肌靶向肽的工程化外泌體用于心肌梗死的靶向治療
Wang, X., et al. (2018). "Engineered Exosomes With Ischemic Myocardium-Targeting Peptide for Targeted Therapy in Myocardial Infarction." J Am Heart Assoc 7(15): e008737.  IF=4.45

 31、第四軍醫(yī)大學(xué)：外泌體介導(dǎo)的腫瘤進(jìn)展中的細(xì)胞通訊
Wan, Z., et al. (2018). "Exosome-mediated cell-cell communication in tumor progression." Am J Cancer Res 8(9): 1661-1673.  IF=3.998
 

32、南昌大學(xué)二附院：外泌體調(diào)節(jié)癌癥干細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化
Xu, J., et al. (2018). "Exosomes Regulate the Transformation of Cancer Cells in Cancer Stem Cell Homeostasis." Stem Cells Int 2018: 4837370.  IF=3.989

33、蘇州大學(xué)：間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體遞送miRNA-132促進(jìn)心肌梗死中的血管生成
Ma, T., et al. (2018). "MicroRNA-132, Delivered by Mesenchymal Stem Cell-Derived Exosomes, Promote Angiogenesis in Myocardial Infarction." Stem Cells Int 2018: 3290372.  IF=3.989

34、【綜述】昆山*人民醫(yī)院：外泌體在病原體感染中的潛在功能
Wang, J., et al. (2018). "Host derived exosomes-pathogens interactions: Potential functions of exosomes in pathogen infection." Biomed Pharmacother 108: 1451-1459.  IF=3.457

35、吉林大學(xué)：外泌體介導(dǎo)mir-193b對(duì)RAB22A的調(diào)節(jié)抑制乳腺癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移
Sun, L., et al. (2018). "Regulation of RAB22A by mir-193b inhibits breast cancer growth and metastasis mediated by exosomes." Int J Oncol.  IF=3.333
 

36、南京市六合區(qū)人民醫(yī)院：MSC外泌體通過(guò)lncRNA-KLF3-AS1/miR-206/GIT1軸在骨關(guān)節(jié)炎中促進(jìn)增殖并抑制軟骨細(xì)胞凋亡
Liu, Y., et al. (2018). "MSC-derived exosomes promote proliferation and inhibit apoptosis of chondrocytes via lncRNA-KLF3-AS1/miR-206/GIT1 axis in osteoarthritis." Cell Cycle.  IF=3.304
 
37、山東大學(xué)齊魯醫(yī)院：子宮內(nèi)膜異位癥的正位間質(zhì)細(xì)胞通過(guò)外泌體途徑促進(jìn)Nerve and blood vessels生成。
Sun, H., et al. (2018). "Eutopic stromal cells of endometriosis promote neuroangiogenesis via exosome pathway." Biol Reprod.  IF=3.184

38、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)：外泌體microRNA-29a介導(dǎo)肥胖相關(guān)性心肌病的心功能不全和線粒體失活
Li, F., et al. (2018). "Exosomal microRNA-29a mediates cardiac dysfunction and mitochondrial inactivity in obesity-related cardiomyopathy." Endocrine.  IF=3.179

39、武漢大學(xué)：口腔扁平苔蘚中循環(huán)外泌體microRNAs表達(dá)譜的差異
Peng, Q., et al. (2018). "Differentially circulating exosomal microRNAs expression profiling in oral lichen planus." Am J Transl Res 10(9): 2848-2858.  IF=3.061