自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配置：

試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體×1 支，4℃保存。

試劑三：液體×1 瓶，4℃保存。

試劑四：液體×1 瓶，4℃保存。

試劑五：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入5 mL蒸餾水溶解，4℃保存。

試劑六：液體×1 瓶，-20℃保存。臨用前加入0.5 mL蒸餾水稀釋，4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)液：液體×1 瓶，3μmol/mL GSSG，4℃保存。

粗酶液提取：

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，

加入 1mL 試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清液（如上清不清澈，再離心 3min）100μ L，加 900μ L 的蒸餾水混勻待測(cè)。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10 4 個(gè)）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議500 萬細(xì)胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；8000g 4℃離心 10min，取上清液（如上清不清澈，再離心 3min）100μL，加900μ L 的蒸餾水混勻待測(cè)。

3. 血清等液體：直接測(cè)定。

測(cè)定操作:

1.分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長到 412 nm，蒸餾水調(diào)零。

2.試劑三置于 25℃（一般物種）或者 37℃（哺乳動(dòng)物）水浴中保溫 30min。

3.標(biāo)準(zhǔn)管：取 1 mL EP 管，加入100μL 標(biāo)準(zhǔn)液，2μL 試劑二，蓋緊后混勻，置于 37℃水浴 30min；開蓋后依次加入700μL試劑三，100μL試劑四，100μL試劑五，10μL試劑六，迅速混勻后，測(cè)定 30s 和 150s 光吸收 A1和 A2。

4.測(cè)定管：取 1 mL EP 管，加入 100μL 上清液，2μL試劑二，蓋緊后混勻，置于37℃水浴 30min；開蓋后依次加入700μL試劑三，100μL試劑四，100μL試劑五，10μL試劑六，迅速混勻后，測(cè)定30s和150s光吸收A3和 A4。

注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。