自備儀器和用品：

冷凍離心機(jī)、水浴鍋、移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、濃硫酸和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加6mL蒸餾水充分震蕩溶解。

試劑三：粉劑×1 管，4℃保存。臨用前加入蒸餾水1.5mL充分震蕩溶解。

試劑四：液體×1 瓶，室溫保存。

試劑五：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入12 mL蒸餾水，充分震蕩溶解后，緩緩加入400µL濃硫酸（自備），邊加邊攪拌。

粗酶液提?。?/span>

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血清等液體：直接測(cè)定。

GCL 測(cè)定操作：

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管：取1.5mLEp管，依次加入試劑一72µL、試劑二52µL 和試劑三12µL，混勻后蓋緊，37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)15min；再加入試劑四60µL，混勻后，室溫（25℃左右）8000g，離心10 min，取上清100µL，加入試劑五100µL，混勻后蓋緊，45℃水浴10min，冷卻后測(cè)定660nm處光吸收，記為A空白管。

3. 測(cè)定管：取1.5mL Ep管，依次加入試劑一48µL、試劑二52µL、試劑三12µL和上清液24µL，混勻后蓋緊，37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)15 min；再加入試劑四60µL，混勻后，室溫（25℃左右）8000g，離心10min，取上清100µL，加入試劑五100µL，混勻后蓋緊，45℃水浴10min，冷卻后測(cè)定660nm 處光吸收，記為A測(cè)定管。

注意：空白管只需測(cè)定一次。