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YKLDetroit562 Detroit562人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞

參考價 1200
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
產(chǎn)品標(biāo)簽

細(xì)胞細(xì)胞株貼壁細(xì)胞

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云克?。ū本?/span>生物科技有限公司是一家由資深免疫學(xué)專家創(chuàng)立的集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的生物技術(shù)公司,位于北京中關(guān)村生命科學(xué)研究院。公司致力于為生命科學(xué)研究與生物醫(yī)藥開發(fā)單位提供整體解決方案,現(xiàn)擁有抗體制備、重組蛋白表達(dá)、檢測分析以及動物評價四大技術(shù)平臺,可根據(jù)客戶需求制定個性化項(xiàng)目解決方案,一站式滿足您的不同需求。

公司始終秉承“品質(zhì)第一,信守承諾”的經(jīng)營理念,堅(jiān)持“以客戶為中心”的服務(wù)思想,恪守“不斷創(chuàng)新,追求卓越”的發(fā)展理念,不斷升級優(yōu)化現(xiàn)有技術(shù)平臺,拓展新的技術(shù)平臺,為客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)!

高效的項(xiàng)目管理模式與嚴(yán)格的知識產(chǎn)權(quán)保護(hù)制度,以及精湛的專業(yè)技術(shù)和豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),能夠極大程度的降低研發(fā)周期和費(fèi)用,是您進(jìn)行生命科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)值得信賴的合作伙伴。

天然蛋白、重組蛋白、多肽與偶聯(lián)小分子

供貨周期 一周 規(guī)格 1個T25瓶
貨號 YKLDetroit562

Detroit562人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞Detroit562人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞

密度達(dá)到傳代密度且細(xì)胞活性在90%以上時,可以凍存細(xì)胞,在超凈臺中將要凍存的細(xì)胞移入離心管,1000rpm離心5min,棄上清,用90%培養(yǎng)液+10%DMSO的混合液重懸細(xì)胞,并調(diào)整細(xì)胞密度為4-6×106/ml,將細(xì)胞懸液分裝到凍存管中(1-1.5ml/管)。

含量:>1x106 個/mL,  規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝

培養(yǎng)基:MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號41500034,添加NaHCO3 1.5g/L,Sodium Pyruvate 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度。

生長特性:貼壁生長

污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

Detroit 562人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞傳代操作步驟:

一、貼壁細(xì)胞傳代

1.提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)。

2.吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞。

3.加入適量YM,使YM的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去YM,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止YM作用。

4.Detroit 562人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡。

5.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。

二、懸浮細(xì)胞傳代

1.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min。

2.棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液。

3.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

Detroit 562人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞 培養(yǎng)的過程中,經(jīng)常見到黑色的顆?;蛐『邳c(diǎn),這種情況是怎么引起的呢?該怎么避免呢?原因:

黑點(diǎn),大概有細(xì)胞本身帶的,環(huán)境有的,還有人身上帶進(jìn)細(xì)胞間的,還有就是血清和培養(yǎng)基

1、如果小黑點(diǎn)有增殖趨勢,那么就有可能是污染了,需要處理;

2、如果小黑點(diǎn)沒有增殖趨勢,且不影響細(xì)胞生長,也不影響實(shí)驗(yàn)的話,則可能

 a、是“黑膠蟲”,黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,本身就存在爭議。有人認(rèn)為是從血清中來的一種原蟲,也有人認(rèn)為是細(xì)菌,或是真菌,也有人認(rèn)為是血清中的蛋白的結(jié)晶?!昂谀z蟲”可寄生于動物細(xì)胞,也可以生存于培養(yǎng)基中,依靠Detroit 562人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生,并隨細(xì)胞傳代而傳代。“黑膠蟲”與細(xì)胞競爭性生長,開始時對細(xì)胞并沒有什么影響,但當(dāng)黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時候, 細(xì)胞生長就會受到影響直至死亡,嚴(yán)重影響了科研活動的開展和進(jìn)行。以前(這個至少是10年以前),很多實(shí)驗(yàn)室在養(yǎng)細(xì)胞時用國產(chǎn)血清,那時的血清可能質(zhì)量不過關(guān),有所謂的“黑膠蟲”,但是也沒有明確的鑒定。但是現(xiàn)在的血清,即使國產(chǎn)的,產(chǎn)品里這種現(xiàn)象就少見了。

 b、是細(xì)胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗運(yùn)動。

 c、是核糖體,也可能是雜質(zhì)PH-pc-h111    顱蓋造骨細(xì)胞    Calvaria osteoblasts cells    形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細(xì)胞樣    培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS





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