IPEC豬小腸上皮細(xì)胞

IPEC豬小腸上皮細(xì)胞

種屬：豬

生長類型：貼壁生長

生長周期：3-4天

發(fā)貨周期：1-2周

收貨處理方法:
貼壁生長的細(xì)胞:
1、貼壁生長的細(xì)胞用T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶發(fā)貨,收到細(xì)胞后,拆開包裝T25瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒。
2、消毒后用顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài),并拍下細(xì)胞照片。
3、將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境。
4、平衡后將T25瓶中培養(yǎng)基吸出用離心管裝好備用。
5、如細(xì)胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6mL培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。

懸浮生長的細(xì)胞:
1、懸浮細(xì)胞發(fā)貨復(fù)蘇后用離心管發(fā)貨,拆開包裝離心管的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒。
2、然后用顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)。
3、將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上。
4、平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細(xì)胞,棄上清。
5、用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)常見注意事項:
1、收貨時,如不能在收到細(xì)胞后及時操作處理細(xì)胞,T25及離心管發(fā)貨的細(xì)胞可以消毒后在培養(yǎng)箱過夜,干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未wan全升華時將細(xì)胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰wan全升華,需即刻復(fù)蘇細(xì)胞;T25瓶及離心管發(fā)貨的細(xì)胞收貨后在37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再開始處理細(xì)胞,平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境。
2、部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中,由于不斷震蕩及環(huán)境不適,可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡,從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下,平衡后,貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍在加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可;懸浮細(xì)胞可以離心(1000rpm,3min)收集細(xì)胞,并用PBS重懸后再離心一次,再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。<第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。
3、細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)胞請于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),大部分細(xì)胞是37℃,5% CO2,濕度100%環(huán)境下培養(yǎng)的。有極少部分細(xì)胞培養(yǎng)條件不一致,請仔細(xì)閱讀相應(yīng)的細(xì)胞說明書,使用正確的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件。細(xì)胞于培養(yǎng)瓶或皿中培養(yǎng),加入適量說明書上標(biāo)注的細(xì)胞相應(yīng)wan全培養(yǎng)基(一般液面高度2-3mm即可)。