測(cè)定意義：

MDHAR催化MDHA還原生成AsA，在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。

測(cè)定原理：

MDHAR 催化 NADH 還原MDHA 生成 AsA和NAD+，NADH在340 nm有特征吸收峰，但是NAD+沒(méi)有。通過(guò)測(cè)定340 nm光吸收下降速率，來(lái)計(jì)算出MDHAR活性。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備：

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和雙蒸水

試劑組成和配置：

試劑一：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體20mL×1瓶，室溫保存。

試劑三：粉劑×1瓶（棕色），4℃保存。臨用前加入3 mL蒸餾水充分溶解。

試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.5 mL蒸餾水充分溶解。

試劑五：液體15μL×1瓶，4℃保存。臨用前加3 mL試劑二充分溶解。

粗酶液提?。?/span>

1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測(cè)。

2.. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；8000g ，4℃離心20min，取上清液置冰上混勻待測(cè)。

3.  血清等液體：直接測(cè)定。