抗壞血酸氧化酶（AAO）測(cè)試盒

分光光度法 50 管/48 樣 

注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。 

測(cè)定意義： 

AAO 是定位于植物細(xì)胞壁的糖蛋白，屬“藍(lán)銅氧化酶”家族。細(xì)胞壁內(nèi)的抗壞血酸和AAO與細(xì)胞壁的代謝和生長(zhǎng)有著密切的聯(lián)系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質(zhì)膜上的細(xì)胞色素 b 還原，該過程中電子的跨膜運(yùn)輸能夠促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。 

測(cè)定原理： 

AAO 可直接氧化 AsA，通過測(cè)定 AsA 的氧化量，可計(jì)算得 AAO 活力。 

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備： 

低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL 石英比色皿、可調(diào)式移液器、研缽、冰、蒸餾水。 

試劑組成和配制： 

試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。 

試劑二：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。 

試劑三：粉劑×2 瓶，4℃避光保存。 

粗酶液提取： 

按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。16000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測(cè)。 

AAO 測(cè)定操作：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 265 nm，蒸餾水調(diào)零。 

2. 試劑二在 25℃水浴鍋中預(yù)熱 30 min抗壞血酸氧化酶（AAO）測(cè)試盒