L-半乳糖酸-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測(cè)試盒

分光光度法 50 管/48 樣 

注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。 

測(cè)定意義：L-半乳糖途徑是合成 AsA 的主要途徑。Gal LDH 位于線粒體內(nèi)膜，負(fù)責(zé)催化植物體內(nèi) AsA生物合成的最后一步，也是該途徑的關(guān)鍵酶之一，對(duì)植物體內(nèi) AsA 含量的積累起著至關(guān)重要的作用。 

測(cè)定原理： 

Gal LDH 催化 L-半乳糖內(nèi)酯還原細(xì)胞色-素 c（Cyt c），還原型 Cyt c 在 550nm 有吸收峰；測(cè)定還原型 Cyt c 增加速率，來(lái)計(jì)算 Gal LDH 活性。 

自備儀器和用品： 

臺(tái)式離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。 

試劑組成和配制： 

試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。 

試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 40mL 蒸餾水，充分溶解。 

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 5mL 蒸餾水，充分溶解。 

粗酶液提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。13000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測(cè)。

Gal LDH 測(cè)定操作：1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 550nm，L-半乳糖酸-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測(cè)試盒