多肽測序技術(shù)解析：挑戰(zhàn)與突破檢測技術(shù)服務詳情介紹

一、什么是多肽測序？為何如此關(guān)鍵？

多肽是由2~50個氨基酸殘基組成的短鏈蛋白片段，既可能是dànbáizhì降解產(chǎn)物，也可能是功能性信號分子、生物活性藥物，甚至是疫苗抗原表位或TCR肽段。

多肽測序的主要目的包括：

• 抗體CDR區(qū)的氨基酸順序確認

• 內(nèi)源性活性肽（如激素、細胞因子）的鑒定

• 生物制劑降解產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)確認

• 多肽藥物的質(zhì)量控制與雜質(zhì)檢測

• 表位篩選與T細胞識別位點研究

由于多肽結(jié)構(gòu)短小，傳統(tǒng)dànbáizhì測序流程在此面前顯得捉襟見肘，催生了針對多肽特性的專用測序方案。

二、多肽測序的主流技術(shù)路線

當前多肽測序技術(shù)主要可分為兩大類：基于質(zhì)譜的序列分析（MS/MS）和化學降解法（如Edman）。

1、LC-MS/MS串聯(lián)質(zhì)譜測序

（1）主要流程包括：

• 樣本純化 → 去除高背景鹽離子及雜質(zhì)

• 離子化（ESI或MALDI）→ 將肽段轉(zhuǎn)為帶電粒子

• 一級質(zhì)譜篩選母離子 → jīngzhǔn挑選目標肽段

• 二級質(zhì)譜碎裂（CID/HCD/ETD） → 獲取碎片圖譜

• 序列分析：通過數(shù)據(jù)庫搜索或de novo算法重構(gòu)序列

（2）適用優(yōu)勢：

• 快速、高通量、分辨率高

• 可結(jié)合修飾識別和定量分析

2、Edman降解法

Edman降解是zuì經(jīng)典的化學測序方法，通過循環(huán)性剝離N端氨基酸殘基并逐一鑒定，獲取序列。

（1）適用優(yōu)勢：

• jīngquè度高，適用于純多肽樣品

• 對短肽段（<30 aa）解析能力較強

（2）限制：

• 不適用于N端封閉或修飾肽

• 通量低，難以自動化

隨著質(zhì)譜靈敏度與生信算法的進步，現(xiàn)代多肽測序更偏向質(zhì)譜+AI輔助序列重構(gòu)的方向發(fā)展。

三、多肽測序中的關(guān)鍵挑戰(zhàn)

盡管技術(shù)手段日益成熟，但在實際應用中，多肽測序仍面臨多個技術(shù)瓶頸：

1、修飾種類復雜，影響碎裂模式

天然或合成多肽中常見多種翻譯后修飾（PTMs），如磷酸化、羥púānsuān、N端乙?；?，這些修飾可能影響質(zhì)譜碎裂效率，干擾序列推斷。

2、同分異構(gòu)肽難以區(qū)分

多肽中存在大量同分異構(gòu)體（如Leu/Ile，Gln/Lys）無法通過質(zhì)譜直接區(qū)分，需要額外的化學驗證或AI輔助建模。

3、信號弱、背景高

多肽相較于完整蛋白更易丟失信號，尤其在復雜背景樣本中（如血漿、細胞裂解液），測序難度大幅上升。

4、N端修飾與封閉問題

某些生物樣本中的多肽具有阻斷性修飾，導致N端Edman降解失效，也會影響數(shù)據(jù)庫匹配算法的有效性。

四、技術(shù)突破與前沿發(fā)展

為應對上述挑戰(zhàn)，科研界與產(chǎn)業(yè)界已在多個維度取得重要進展：

1、高分辨率質(zhì)譜系統(tǒng)的應用

如Orbitrap Eclipse、timsTOF Pro 2 等gāoduān平臺可提供更高質(zhì)量的MS/MS譜圖，提升異構(gòu)體區(qū)分能力與低豐度信號檢測率。

2、多酶酶切與分段合成策略

通過使用多種特異性酶（如Trypsin + Glu-C + Chymotrypsin）對肽段進行補充切割，擴大測序窗口，提升序列覆蓋率。

3、AI賦能的de novo序列重建算法

深度學習模型（如DeepNovo、PointNovo、pNovo+）能夠根據(jù)碎片模式重建氨基酸順序，尤其適用于數(shù)據(jù)庫外序列或高度修飾肽段。

4、聯(lián)合結(jié)構(gòu)建模與修飾預測

結(jié)合AlphaFold結(jié)構(gòu)預測與修飾位點數(shù)據(jù)庫（如Unimod、dbPTM）輔助識別關(guān)鍵功能肽段并進行結(jié)構(gòu)確認，提升生物學解釋力。

五、百泰派克生物科技的多肽測序解決方案

在實際科研和項目開發(fā)中，多肽測序不僅要求技術(shù)精度，更需要從樣本制備到數(shù)據(jù)解讀的整體方案設(shè)計。百泰派克生物科技構(gòu)建了一套針對不同應用場景的多肽測序服務平臺，具備以下核心優(yōu)勢：

1、高靈敏度平臺：搭載Orbitrap Eclipse、timsTOF等高分辨率質(zhì)譜系統(tǒng)

2、多重酶切策略：根據(jù)肽段特性定制酶解方案，zuì大化覆蓋率

3、AI輔助分析引擎：結(jié)合數(shù)據(jù)庫比對與de novo預測，準確識別未知肽段

4、修飾位點識別能力強：支持磷酸化、乙?；⑻腔瘸Ｒ奝TM識別

5、可視化報告交付：提供序列圖譜、修飾注釋、結(jié)構(gòu)預測等直觀結(jié)果

隨著質(zhì)譜儀器的性能升級和AI算法的不斷成熟，多肽測序正在從“序列獲取”向“功能解讀”躍遷。未來的多肽測序不僅要“測得準”，更要“懂得多”——包括功能區(qū)域、修飾模式、結(jié)構(gòu)信息和生物活性。而生物信息學平臺與實驗平臺的深度融合，也將進一步推動多肽測序在藥物發(fā)現(xiàn)、免疫療法、分子機制研究中的價值釋放。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!

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