蛋白質(zhì)純度分析常用方法及其原理檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在生命科學(xué)和生物制藥領(lǐng)域，dànbáizhì純度是決定實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)成功與否的關(guān)鍵因素之一。無論是用于基礎(chǔ)研究還是下游應(yīng)用，如疫苗生產(chǎn)、抗體制備及蛋白藥物開發(fā)，均需對目標(biāo)蛋白的純度進(jìn)行準(zhǔn)確評估。dànbáizhì純度分析不僅能揭示目標(biāo)蛋白是否被成功純化，還可反映潛在的雜質(zhì)組成，為工藝優(yōu)化及質(zhì)量控制提供重要依據(jù)。

一、電泳技術(shù)

??SDS-PAGE（SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳）

SDS-PAGE是廣泛應(yīng)用于dànbáizhì純度分析的技術(shù)。其核心原理是利用十二烷基硫酸鈉（SDS）對dànbáizhì的變性作用，使蛋白鏈解構(gòu)并帶上統(tǒng)一的負(fù)電荷，從而在電場作用下按分子量差異遷移。通過染色（如考馬斯亮藍(lán)或銀染），可以直觀地顯示不同分子量的蛋白帶，從而評估樣品中是否存在雜蛋白。該方法簡便直觀，適合快速檢測純度變化趨勢。

??Native-PAGE（非變性電泳）

與 SDS-PAGE不同，Native-PAGE在分析中不對蛋白進(jìn)行變性處理，保持蛋白的天然構(gòu)象和電荷狀態(tài)。此方法主要依據(jù)dànbáizhì的天然電荷和體積差異進(jìn)行分離。由于不破壞蛋白結(jié)構(gòu)，它適合用于分析蛋白復(fù)合物及聚集體的純度和穩(wěn)定性。

二、液相色譜法

??高效液相色譜（HPLC）

HPLC是dànbáizhì純度分析中常用的高分辨技術(shù)，其原理是基于不同蛋白分子的疏水性、親水性、電荷或大小差異，通過填充特定固定相的色譜柱分離樣品中的蛋白組分。反相色譜（RPC）、離子交換色譜（IEX）、親和色譜和凝膠過濾（SEC）均屬于HPLC的具體形式。HPLC不僅可用于檢測純度，還能實(shí)現(xiàn)半定量分析，為復(fù)雜樣品中目標(biāo)蛋白的含量評估提供可靠依據(jù)。

??尺寸排阻色譜（SEC，亦稱凝膠過濾色譜）

SEC是基于分子大小進(jìn)行分離的方法，通過填充多孔顆粒的色譜柱實(shí)現(xiàn)。大分子蛋白較小分子優(yōu)先流出，而小分子則會在多孔填料中滯留更長時間。SEC對聚集體、降解產(chǎn)物及寡聚體的檢測尤為敏感，因此在蛋白藥物質(zhì)量控制中占據(jù)重要地位。

三、毛細(xì)管電泳（CE）

毛細(xì)管電泳是近年來在dànbáizhì純度分析中應(yīng)用增長較快的方法之一。其原理是利用電場驅(qū)動蛋白在填充緩沖液的細(xì)毛細(xì)管中遷移，并按電荷、大小等物理化學(xué)特性分離。CE具有高分辨率、高通量和自動化程度高的優(yōu)勢，適合對蛋白雜質(zhì)、修飾形式及微量污染物進(jìn)行高靈敏度分析。

四、質(zhì)譜法

質(zhì)譜技術(shù)在dànbáizhì純度評估中通常不直接用于量化純度，而是用于深入鑒定雜質(zhì)的分子組成。通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS），可以在分子水平識別雜蛋白、截短體、修飾形式以及共純化伴隨物，補(bǔ)充其他純度分析手段的不足。近年來，質(zhì)譜結(jié)合定量策略（如biāojìdìng量、無biāojìdìng量）也開始應(yīng)用于純度評估，為復(fù)雜樣品提供了更加全面的分析視角。

五、光譜分析法

??紫外-可見吸收光譜（UV-Vis）

UV-Vis分析是zuì基礎(chǔ)的蛋白定量和純度評估手段之一。dànbáizhì在280nm處的吸光度主要由làoānsuān、sèānsuān及苯bǐngānsuān殘基吸收決定，可用于粗略估算蛋白含量。通過比對純化前后樣品吸光曲線，可初步判斷純化效果。不過，該方法對小分子雜質(zhì)、鹽離子或核酸污染物的特異性較低，適合作為初篩手段。

??圓二色光譜（CD）

CD光譜可用于評估dànbáizhì的二級結(jié)構(gòu)組成及穩(wěn)定性變化，間接反映樣品的純度和構(gòu)象完整性。雖然不直接提供雜質(zhì)信息，但在藥物開發(fā)及結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究中，可作為純度評估的輔助工具。

六、綜合策略與趨勢

目前，dànbáizhì純度分析往往采用多技術(shù)聯(lián)合的綜合策略，以實(shí)現(xiàn)定性、定量及結(jié)構(gòu)多維度評估。例如，電泳與液相色譜組合用于確認(rèn)純度和組分分離效果，再輔以質(zhì)譜進(jìn)行深入的分子特征鑒定。隨著分析需求的提升，自動化、微型化及高通量分析平臺（如 CE-MS、LC-MS）將進(jìn)一步推動純度檢測的高效化和智能化。此外，對于生物制藥領(lǐng)域，監(jiān)管法規(guī)對dànbáizhì純度的要求日益嚴(yán)格，不僅關(guān)注整體純度水平，更強(qiáng)調(diào)對雜質(zhì)性質(zhì)及來源的系統(tǒng)評估。因此，從研發(fā)到生產(chǎn)的全流程中，建立科學(xué)、規(guī)范、可靠的純度分析體系，已成為提升產(chǎn)品質(zhì)量和市場競爭力的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

dànbáizhì純度分析是生命科學(xué)和生物醫(yī)藥領(lǐng)域bùkěhuòquē的一環(huán)，其重要性不僅體現(xiàn)在保證科研數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性，還在于推動下游產(chǎn)品的質(zhì)量和安全。未來，隨著分析技術(shù)的持續(xù)創(chuàng)新，蛋白純度檢測將朝著更高靈敏度、更高通量和更高自動化方向發(fā)展，為科學(xué)研究與工業(yè)生產(chǎn)提供有力保障。在探索dànbáizhì純度分析的科學(xué)旅程中，百泰派克生物科技始終與科研工作者攜手同行，共同推動生命科學(xué)的創(chuàng)新與發(fā)展。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細(xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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