SDS-PAGE和HPLC：哪種方法更適合你的蛋白純度評估？檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在蛋白組學(xué)研究與生物制藥開發(fā)中，蛋白純度評估是確保實驗可重復(fù)性和產(chǎn)品質(zhì)量的核心環(huán)節(jié)。SDS-PAGE（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）與HPLC（高效液相色譜）是兩種常用且互補的分析方法，各具優(yōu)勢與局限。本文聚焦于它們在蛋白純度分析中的適用場景、核心技術(shù)特點及優(yōu)缺點，助力科研人員研發(fā)決策。

一、SDS-PAGE：基于分子量的電泳分離

SDS-PAGE利用SDS賦予蛋白相似的負(fù)電荷密度，使其在凝膠中按分子量分離，呈現(xiàn)清晰條帶。該技術(shù)具有以下特點：

• 操作簡便，適用廣泛：無需復(fù)雜前處理，適合多種蛋白樣品。

• 結(jié)果直觀，便于初篩：通過Coomassie藍(lán)或銀染顯色，快速判斷純度及主要雜質(zhì)。

• 成本低廉，設(shè)備要求低：適用于實驗室日常檢測及小規(guī)模樣品分析。

然而，SDS-PAGE存在分辨率有限的問題，尤其在蛋白分子量相近或豐度懸殊的樣品中。此外，其定量能力受限，染色效率和上樣量均可能影響結(jié)果準(zhǔn)確性。對于需高精度定量和低豐度雜質(zhì)分析的應(yīng)用，SDS-PAGE往往不足以勝任。

二、HPLC：基于理化性質(zhì)的高分辨分離

HPLC依靠固定相與流動相的相互作用，實現(xiàn)蛋白混合物的高效分離。關(guān)鍵優(yōu)勢包括：

• 分辨率與靈敏度優(yōu)異：可區(qū)分分子量相近或結(jié)構(gòu)相似的蛋白，適應(yīng)復(fù)雜生物樣品。

• 高精度定量：結(jié)合紫外、熒光或質(zhì)譜檢測，實現(xiàn)蛋白組分的準(zhǔn)確量化。

• 方法可擴展：通過優(yōu)化色譜條件（如反相、離子交換、尺寸排阻），適應(yīng)不同類型蛋白及分析需求。

HPLC的缺點主要包括對樣品處理和儀器維護(hù)的嚴(yán)格要求，以及高成本投入。此外，某些蛋白在高壓和有機溶劑環(huán)境下可能變性或丟失活性，需要針對性優(yōu)化方案。

三、技術(shù)比較：根據(jù)需求選擇zuìjiā方案

在蛋白純度分析中，選擇SDS-PAGE還是HPLC需綜合考慮樣品復(fù)雜度、分析目的及精度要求：

• 科研初步篩選：當(dāng)目標(biāo)是快速評估純度或優(yōu)化表達(dá)條件，SDS-PAGE因其簡單、直觀而優(yōu)勢明顯。

• 高標(biāo)準(zhǔn)純度檢測：在生物制藥質(zhì)量控制、蛋白藥研發(fā)及申報階段，HPLC以其高分辨率和定量能力，成為bùkěhuòquē的選擇。

• 聯(lián)合應(yīng)用策略：在實際應(yīng)用中，SDS-PAGE與HPLC往往協(xié)同使用。先通過SDS-PAGE進(jìn)行粗略篩選，再以HPLC確認(rèn)純度和雜質(zhì)成分，為實驗設(shè)計和產(chǎn)品質(zhì)量提供多維度數(shù)據(jù)支持。

蛋白純度不僅關(guān)乎實驗可重復(fù)性，更直接影響產(chǎn)品安全性與有效性。選擇合適的純度評估方法，不僅取決于樣品復(fù)雜度與分析需求，也離不開zhuānyè技術(shù)平臺的支撐。百泰派克生物科技致力于提供高質(zhì)量的蛋白分析服務(wù)，依托優(yōu)良的液相色譜系統(tǒng)與高分辨質(zhì)譜平臺，我們不僅能夠?qū)崿F(xiàn)復(fù)雜蛋白樣品的高精度分離與定量，還可根據(jù)客戶需求定制個性化分析方案。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭?xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

SDS-PAGE和HPLC：哪種方法更適合你的蛋白純度評估？檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹