HPLC檢測(cè)蛋白純度的原理、優(yōu)勢(shì)與應(yīng)用場(chǎng)景檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在生命科學(xué)和生物制藥領(lǐng)域，蛋白純度是評(píng)價(jià)樣品質(zhì)量和確保下游應(yīng)用可靠性的核心指標(biāo)。高效液相色譜（HPLC）因其高分辨率、良好重現(xiàn)性和高靈敏度，成為檢測(cè)蛋白純度的重要手段。本文將介紹HPLC檢測(cè)蛋白純度的原理、優(yōu)勢(shì)及主要應(yīng)用場(chǎng)景。

一、HPLC檢測(cè)蛋白純度的原理

HPLC基于色譜分離原理，通過(guò)蛋白分子在固定相與流動(dòng)相間的相互作用差異，實(shí)現(xiàn)組分分離。核心方法包括：

• 反相色譜（RPC）：利用疏水作用分離蛋白及其異構(gòu)體，適用于結(jié)構(gòu)相似蛋白的分辨與疏水性雜質(zhì)檢測(cè)。

• 離子交換色譜（IEC）：依據(jù)蛋白分子表面電荷不同進(jìn)行分離，常用于監(jiān)測(cè)帶電雜質(zhì)及蛋白異構(gòu)體。

• 尺寸排阻色譜（SEC）：按分子大小分離蛋白，可定量分析單體、二聚體和高聚體比例，適用于聚集體分析。

HPLC中，樣品經(jīng)高壓流動(dòng)相驅(qū)動(dòng)進(jìn)入色譜柱，目標(biāo)組分依與固定相的相互作用強(qiáng)弱，依次洗脫。分離后的組分通過(guò)檢測(cè)器（如紫外或熒光檢測(cè)器）監(jiān)測(cè)，依據(jù)色譜峰面積計(jì)算純度。相較電泳或凝膠過(guò)濾等傳統(tǒng)方法，HPLC具有更高分辨率、定量準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

二、HPLC檢測(cè)蛋白純度的優(yōu)勢(shì)

1、高分辨率與重現(xiàn)性

HPLC采用高效色譜柱和jīngquè流控系統(tǒng)，確保復(fù)雜樣品在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)高分辨率分離，保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性，適應(yīng)不同蛋白分離需求。

2、靈敏度高、定量能力強(qiáng)

搭配紫外、熒光或質(zhì)譜等多種檢測(cè)模式，HPLC可對(duì)低豐度雜質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)限可達(dá)納克級(jí)，支持jīngquè定量和質(zhì)量控制。

3、自動(dòng)化與高通量分析

HPLC支持自動(dòng)進(jìn)樣、數(shù)據(jù)采集及處理，減少人工誤差，適合大規(guī)模樣品篩選和高通量分析，提升檢測(cè)效率和可靠性。

4、方法靈活，適應(yīng)性廣

可通過(guò)更換色譜柱類(lèi)型、優(yōu)化流動(dòng)相體系，針對(duì)不同蛋白理化性質(zhì)（疏水性、電荷、分子大?。╅_(kāi)發(fā)專(zhuān)屬分離方法，滿(mǎn)足多樣化蛋白純度分析需求。

三、HPLC檢測(cè)蛋白純度的典型應(yīng)用場(chǎng)景

1、生物制藥生產(chǎn)質(zhì)量控制

在重組蛋白、單克隆抗體等生物藥物生產(chǎn)中，HPLC用于監(jiān)測(cè)純化過(guò)程中的雜質(zhì)、聚集體含量和產(chǎn)品純度，確保藥品質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)。

2、dànbáizhì組學(xué)與基礎(chǔ)研究

科研中，HPLC對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行純度分析，避免雜質(zhì)影響后續(xù)功能驗(yàn)證（如酶學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)及互作研究），提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可靠性。

3、疫苗與診斷試劑研發(fā)

在疫苗和體外診斷試劑生產(chǎn)中，HPLC可用于評(píng)估抗原蛋白純度及聚集體含量，保證產(chǎn)品的免疫原性和特異性，符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

4、工藝開(kāi)發(fā)與優(yōu)化

HPLC可用于不同純化工藝（如層析步驟、緩沖體系）優(yōu)化，通過(guò)對(duì)比樣品純度和雜質(zhì)譜，篩選zuì優(yōu)純化策略，提高生產(chǎn)效率與產(chǎn)品一致性。

HPLC因其zhuóyuè的分離能力、定量精度及高通量檢測(cè)能力，已成為蛋白純度檢測(cè)的核心技術(shù)之一。百泰派克生物科技深耕dànbáizhì組學(xué)和生物制藥領(lǐng)域，整合優(yōu)良的HPLC平臺(tái)與定制化純化流程，為科研和工業(yè)客戶(hù)提供HPLC測(cè)定蛋白純度服務(wù)。依托zhuānyè的研發(fā)團(tuán)隊(duì)與完善的質(zhì)控體系，我們可根據(jù)蛋白特性?xún)?yōu)化分離策略，采用多模式檢測(cè)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)低豐度雜質(zhì)、聚集體和結(jié)構(gòu)異構(gòu)體的jīngzhǔn分析。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專(zhuān)有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶(hù)提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶(hù)提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿(mǎn)足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶(hù)的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

HPLC檢測(cè)蛋白純度的原理、優(yōu)勢(shì)與應(yīng)用場(chǎng)景檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹