小鼠表皮角化上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠表皮角化細胞分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。表皮角化細胞（KC）是構成表皮的主要細胞成分，在體內處于不斷增殖過程中，分裂的角化細胞主要位于其基底層，少數位于棘細胞層。隨著向表層的推移，細胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠表皮角化上皮細胞先蛋白酶消化、后蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠表皮角化上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

CTLL-2細胞，T細胞 人胰腺癌細胞,JF-305細胞 CM-M016小鼠胰腺星狀細胞FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液   RSC, 大鼠雪旺細胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細胞 COS-7(SV40 小鼠原代破骨細胞 兔原代牙髓干細胞

MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3 0.5mgMAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關蛋白輕鏈3抗原

GUCA1A Protein Human 重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 標簽)

KLRK1重組食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 標簽) Protein

PTN Protein Mouse 重組小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白 (Fc 標簽)

FCGR3B重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白 Protein

大鼠周期素依賴性激酶2(CDK2)試劑盒 ，英文名： CDK2 ELISA Kit

Mouse proliferating cell nuclear aigen aibody (PCNA) ELISA Kit 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒

MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanInvolucrin,iNVELISAKit人套膜蛋白

微型RNA(miRNA)表達載體細胞轉染試劑盒10次

ELISAKitMIP-1β/CCL4大鼠巨噬細胞癥蛋白1β

兔血管生成素2(ANG-2)試劑盒   96T/48T

兔血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒   96T/48T

兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)試劑盒   96T/48T

兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒   96T/48T

小鼠表皮角化上皮原代細胞小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat glycated hemoglobin A1c (GHbA1c) ELISA Kit 大鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)試劑盒

HumanFreeThyroxine,FT4ELISAKit 人游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancoagulationfactorⅡ,FⅡ試劑盒人Ⅱ(FⅡ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙?；?span>5(HDAC5)活性比色法定量試劑盒20次

Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit人結合蛋白4(RBP-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

PTPRC重組小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (aa 453-1152, His & GST 標簽) Protein

鈣結合蛋白(CR)重組蛋白 Recombinant Calretinin (CR)

CRIPT重組人 CRIPT / cysteine-rich PDZ-binding 蛋白 Protein

CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽)

IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。