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上海繼錦化學(xué)科技有限公司
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小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書2010/12/21
本試劑盒僅供研究使用檢測范圍:31.2ng/ml-2000ng/mlzui低檢測限:7.8ng/ml特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的小鼠PEDF,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。有效期:6個月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中PEDF含量。說明1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能
人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒使用說明書2010/12/21
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中TSGF含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的TSGF抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的TSGF抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TSGF呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)2
人內(nèi)皮抑素(ES)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書2010/12/21
本試劑盒僅供研究使用檢測范圍:0.78ng/ml-50ng/mlzui低檢測限:0.195ng/ml特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的人ES,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。有效期:6個月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中ES含量。說明1.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。2.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。3.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水
人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書2010/12/21
本試劑盒僅供研究使用檢測范圍:1.25ng/ml-80ng/mlzui低檢測限:0.3ng/ml特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的人HMGB-1,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。有效期:6個月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中HMGB-1含量。說明1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能
ELISA法檢測細(xì)胞間黏附分子-12010/12/19
細(xì)胞黏附分子(ICAM)是存在于細(xì)胞表面的一類具有復(fù)雜功能的糖蛋白,介導(dǎo)細(xì)胞之間的相互黏附,參與眾多的病理生理過程。目前,研究較多的黏附分子主要有免疫球蛋白超家族、整合素家族、選擇性家族、Cadherin家族等。細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)是黏附分子免疫球蛋白超家族中的一員,由內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和上皮細(xì)胞表達(dá),其配體是白細(xì)胞黏附分子CD18家族中的2個成員:即淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原—1[lymphocytefunction-associatedantigen-1,LFA-l(CDu
ELISA測定的常用模式--固相捕獲法測IgM抗體2010/12/19
在病原體急性感染的診斷中,通常需檢測IgM抗體,如急性甲型肝炎診斷的血清抗HAVIgM檢測、急性乙型肝炎病毒感染的血清抗HBclgM檢測和TORCH項(xiàng)目的系列IgM檢測等。IgM抗體也有使用間接法測定的,如目前在市場上可見到的有些TORCH系列的IgM檢測試劑盒。在使用間接法測IgM抗體時,由于臨床血清樣本中含有高濃度的IgG抗體,其中部分特異IgG抗體將與IgM抗體競爭與固相抗原結(jié)合,從而干擾IgM抗體的檢測。因此,在使用間接法測定IgM抗體時,通常須將血清樣本用抗人IgG抗體或SPA預(yù)處理,
ELISA法檢測腫瘤壞死因子2010/12/19
腫瘤壞死因子(TNF)是由激活的單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞受內(nèi)毒素刺激后產(chǎn)生的一種分子量為17000的蛋白質(zhì)。其中,由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的稱TNF-α,是巨噬細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒效應(yīng)的細(xì)胞因子;由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的稱TNF-β。TNF在體內(nèi)具有廣泛的生物學(xué)活性:可作為免疫應(yīng)答中的一種中間介質(zhì),既有抗病效應(yīng),又有致病效應(yīng);可引起腫瘤的出血壞死;可刺激成纖維細(xì)胞增殖;可增加HLA-A、HLA-B、HLA-C抗原的表達(dá);可激活中性粒細(xì)胞及殺傷細(xì)胞;可促進(jìn)B細(xì)胞增殖及分化、增加IL-2受體表達(dá)。肝臟是TNF的主要發(fā)源地,同時也是
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書2010/12/17
本試劑盒僅供研究使用特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的小鼠Cyclin-D3,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。有效期:6個月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中Cyclin-D3含量。說明1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響
人p53上調(diào)細(xì)胞凋亡調(diào)控因子(PUMA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒使用說明書2010/12/17
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中PUMA含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的PUMA抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的PUMA抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PUMA呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)2
人P53(P53)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書2010/12/17
本試劑盒僅供研究使用檢測范圍:0.78U/ml-50U/mlzui低檢測限:0.195U/ml特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的人P53,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。有效期:6個月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中P53含量。說明1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣
原代肝細(xì)胞分離方法2010/12/15
體外培養(yǎng)肝細(xì)胞的關(guān)鍵是如何分離得到形態(tài)完整、體外代謝活性高的肝細(xì)胞.自1953年Anderson[2]首創(chuàng)剪切法從肝臟分離肝細(xì)胞以來,各實(shí)驗(yàn)室對肝細(xì)胞的分離方法進(jìn)行了不斷改進(jìn).在眾多方法中,主要分為非灌流的方法和灌流的方法.1.1采用非灌流的方法早期的研究一般通過非灌流這種簡單的步驟分離肝細(xì)胞.1.1.1機(jī)械分離法:機(jī)械分離法是利用機(jī)械剪切及強(qiáng)力吹打等物理手段來分離肝細(xì)胞的方法[3].張頂etal[4]在分離樹鼩肝細(xì)胞的過程中,首先將樹鼩的肝臟剪成小塊,然后通過擠壓、剪碎和震蕩等機(jī)械手段,使肝細(xì)
標(biāo)本的收集與保存2010/12/15
臨床檢驗(yàn)常見的標(biāo)本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些標(biāo)本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。一、血液標(biāo)本有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整
ELISA實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制2010/12/15
從1949年美國CollegeofAmericanPathologists(簡稱CAP)首先開始研究臨床實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制(簡稱質(zhì)控)問題,美國學(xué)者Levery和Jenning于1950年發(fā)表*篇關(guān)于使用質(zhì)控圖的實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控,臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的室內(nèi)質(zhì)控工作正式拉序幕。到70年代,實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制進(jìn)入一個新的階段--全面質(zhì)量管理,推行GoodLaboratoryParctice(簡稱GLP)。進(jìn)入80年代末期,GLP的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)生了,發(fā)展到"認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室"管理階段。全面質(zhì)量管理的宗旨在于預(yù)防差錯的產(chǎn)生
酶切體系的建立2010/12/15
酶切體系的建立一、建立一個標(biāo)準(zhǔn)的酶切反應(yīng)目前大多數(shù)研究者遵循一條規(guī)則,即10個單位的內(nèi)切酶可以切割1μg不同來源和純度的DNA。通常,一個50μl的反應(yīng)體系中,1μl的酶在1XNEBuffer終濃度及相應(yīng)溫度條件下反應(yīng)1小時即可降解1μg已純化好的DNA。如果加入更多的酶,則可相應(yīng)縮短反應(yīng)時間;如果減少酶的用量,對許多酶來說,相應(yīng)延長反應(yīng)時間(不超過16小時)也可*反應(yīng)。二、選擇正確的酶不言而喻,選擇的酶在底物DNA上必須至少有一個相應(yīng)的識別位點(diǎn)。識別堿基數(shù)目少的酶比堿基數(shù)目多的酶更頻繁地切割底
動物細(xì)胞培養(yǎng)2010/12/15
半連續(xù)式培養(yǎng)1.半連續(xù)式培養(yǎng)又稱為重復(fù)分批式培養(yǎng)或換液培養(yǎng)。采用機(jī)械攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng),懸浮培養(yǎng)形式。在細(xì)胞增長和產(chǎn)物形成過程中,每間隔一段時間,從中取出部分培養(yǎng)物,再用新的培養(yǎng)液補(bǔ)足到原有體積,使反應(yīng)器內(nèi)的總體積不變。這種類型的操作是將細(xì)胞接種一定體積的培養(yǎng)基,讓其生長至一定的密度,在細(xì)胞生長至zui大密度之前,用新鮮的培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物,每次稀釋反應(yīng)器培養(yǎng)體積的1/2~3/4,以維持細(xì)胞的指數(shù)生長狀態(tài),隨著稀釋率的增加培養(yǎng)體積逐步增加?;蛘咴诩?xì)胞增長和產(chǎn)物形成過程中,每隔一定時間,定期取出部
影響ElISA實(shí)驗(yàn)效果常見問題原因分析及解決辦法2010/12/14
ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。?操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);3.加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。1.標(biāo)本為血清:將血液先自然存放12小時后,再用3000
常用試劑的性質(zhì)與制備(一)2010/12/14
常用試劑的性質(zhì)與制備純化有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常用到大量的試劑,包括無機(jī)試劑和有機(jī)試劑,市售的試劑有分析純(A.R)、化學(xué)純(C.P)、工業(yè)級(T.P)等級別,其中分析純的純度較高,工業(yè)級則帶有較多的雜質(zhì)。在某些有機(jī)反應(yīng)中,對試劑或溶劑的要求較高,即使微量的雜質(zhì)或水分的存在,也會對反應(yīng)的速率、產(chǎn)率和產(chǎn)品純度帶來一定的影響,因此掌握一些必要的試劑的純化方法是十分必要的。在實(shí)際工作中還會經(jīng)常遇到無法買到某種試劑或買不到高純度試劑的情況,影響實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行,因此,了解一些常用試劑的制備方法也是十分必要的。在
蛋白質(zhì)的定量測定實(shí)驗(yàn)2010/12/13
蛋白質(zhì)定量是生物化學(xué)、食品檢驗(yàn)和其它生命學(xué)科zui常涉及的分析內(nèi)容,是臨床診斷的重要指標(biāo),也是許多生物制品、藥物、食品質(zhì)量檢測的重要指標(biāo)。生化實(shí)驗(yàn)中,在對生化藥品,特別是蛋白質(zhì)、酶、某些多肽或蛋白質(zhì)激素的分離純化時,對蛋白質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確可靠的定量分析是非常重要的。然而蛋白質(zhì)的種類很多,結(jié)構(gòu)不均一,分子量又相差很大,功能各異,這給建立一個理想而又通用的蛋白質(zhì)定量分析的方法帶來了很大的困難。目前測定蛋白質(zhì)含量的方法有很多種,不同的方法各有其特點(diǎn)。紫外分光光度法是根據(jù)蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)來對蛋白質(zhì)進(jìn)行定量的;
Tris緩沖液不同溫度與pH的關(guān)系2010/12/10
Tris緩沖液不同溫度與pH的關(guān)系(pHvsTemperatureforTrisBuffer)Tris緩沖液的pH值(0.05M)5°C25°C37°C7.767.206.917.897.307.027.977.407.128.077.507.228.187.607.308.267.707.408.377.807.528.487.907.628.588.007.718.688.107.808.788.207.918.888.308.018.988.408.109.098.508.229.188.
幾種常用溶液的配制方法2010/12/10
1、PBS:取PBS溶于1000ml的蒸餾水中,混勻,測pH值應(yīng)在7.2~7.4之間,若偏離此范圍,請用0.1N的HCL或NaOH調(diào)整。2、TBS:2.1Tris緩沖液配方:(0.5MpH7.6)Tris(三羥甲基氨基甲烷)60.57g1NHCL約420ml雙蒸水加至1000mlTris緩沖液配制方法:先以少量雙蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(1N)將pH調(diào)至7.6,zui后雙蒸水加至1000ml。此液為儲備液,4℃冰箱中保存。2.2TBS配方:
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