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海洋微生物新發(fā)現(xiàn)或?qū)⒏膶?xiě)演化樹(shù)2011/04/09: 在過(guò)去的近300年中，生物分類(lèi)法從兩界、三界一直被擴(kuò)充到六界三域，分類(lèi)系統(tǒng)不斷被改寫(xiě)。然而，演化樹(shù)的改寫(xiě)可能還會(huì)繼續(xù)下去。美國(guó)加州大學(xué)基因中心和文特爾研究所對(duì)海洋水樣本中的DNA序列分析的合作研究發(fā)現(xiàn)，地球上可能存在著三個(gè)域之外的生物。答簡(jiǎn)單問(wèn)卷，免費(fèi)獲得羅氏第4期技術(shù)指導(dǎo)手冊(cè)。趕快點(diǎn)擊索取吧外環(huán)境入手測(cè)DNA序列這個(gè)發(fā)現(xiàn)十分驚人，其可能改寫(xiě)從上世紀(jì)90年代以來(lái)延續(xù)的主流生物分類(lèi)學(xué)法。研究是加州大學(xué)戴維斯分校基因中心的艾森（JonathanEisen）領(lǐng)頭所做。他與同事們提取了一部分海洋水樣本中

研究稱(chēng)采用更靈敏檢測(cè)技術(shù)可降低心臟病死亡率2011/04/09: 英國(guó)一項(xiàng)研究說(shuō)，采用一種靈敏度更高的血液檢測(cè)新技術(shù)能夠檢查出更多的心臟病高風(fēng)險(xiǎn)者，可以使?jié)撛诨颊呷后w的心臟病死亡率明顯降低。Illumina推出新一代高通量測(cè)序系統(tǒng)HiSeq™1000，索要技術(shù)資料目前一般通過(guò)檢測(cè)人體血液中肌鈣蛋白水平來(lái)判斷心臟病患病風(fēng)險(xiǎn)。肌鈣蛋白是心肌細(xì)胞受損時(shí)釋放出的一種物質(zhì)，因此其含量高低也就預(yù)示著心臟病患病風(fēng)險(xiǎn)的大小。英國(guó)愛(ài)丁堡大學(xué)等機(jī)構(gòu)研究人員在新一期《美國(guó)醫(yī)學(xué)會(huì)雜志》上報(bào)告說(shuō)，常規(guī)血液檢測(cè)手段為檢測(cè)肌鈣蛋白水平所設(shè)置的閾值太高，會(huì)漏掉一部分心臟病高風(fēng)險(xiǎn)人群。在本次研

千種單基因病計(jì)劃”再獲新進(jìn)展外顯子測(cè)序揭示NCSTN基因的突變可導(dǎo)致逆向性痤瘡的發(fā)生2011/04/09: 2011年3月24日，由華大基因和安徽醫(yī)科大學(xué)*附屬醫(yī)院張學(xué)軍教授科研團(tuán)隊(duì)合作研究的成果《利用外顯子測(cè)序技術(shù)發(fā)現(xiàn)并驗(yàn)證了NCSTN基因的突變可導(dǎo)致逆向性痤瘡的發(fā)生》在雜志JournalofInvestigativeDermatology上在線發(fā)表，這是我國(guó)科學(xué)家將外顯子測(cè)序技術(shù)應(yīng)用于單基因病致病基因?qū)ふ业挠忠豁?xiàng)重要成果，對(duì)NCSTN基因突變的檢測(cè)和逆向性痤瘡及其相關(guān)疾病的診斷、治療具有十分重要的意義。逆向性痤瘡（Inversaacne,AI）又名化膿性汗腺炎，是一種少見(jiàn)的常染色體顯性遺傳病，以反

Nature重大成果：腫瘤單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)2011/04/09: 生物通報(bào)道：來(lái)自冷泉港實(shí)驗(yàn)室，德州大學(xué)MDAnderson癌癥研究中心的研究人員通過(guò)單細(xì)胞測(cè)序分析了腫瘤，揭示了來(lái)自?xún)蓚€(gè)患者的乳腺癌的種群結(jié)構(gòu)，挑戰(zhàn)了傳統(tǒng)的腫瘤進(jìn)展?jié)u進(jìn)模型，對(duì)于癌癥預(yù)后及階段確定具有重要的臨床意義。這一重要的研究成果公布在昨天出版的Nature雜志上。MagSepharose磁珠讓你的蛋白純化更簡(jiǎn)單，更可靠，*5折優(yōu)惠，不容錯(cuò)過(guò)！這種單細(xì)胞測(cè)序方法即singlecellsequencing（SNS），這種方法能準(zhǔn)確定量一個(gè)單細(xì)胞核中基因拷貝數(shù)目。癌細(xì)胞中，基因組部分被刪除，或者

Cell頭條：華人學(xué)者解析新機(jī)制2011/04/09: 生物通報(bào)道：來(lái)自加州大學(xué)洛杉磯分校的研究人員發(fā)現(xiàn)胰島素能提升饑餓果蠅的嗅覺(jué)神經(jīng)靈敏度，這將有助于科學(xué)家們了解人類(lèi)饑餓的代謝變化和神經(jīng)傳遞。這一研究成果公布在昨天出版的Cell雜志封面上。如何做好蛋白研究的*步，索要Merck蛋白研究相關(guān)技術(shù)資料領(lǐng)導(dǎo)這一研究的是加州大學(xué)洛杉磯分校生物科學(xué)部神經(jīng)生物學(xué)系副教授王靜（JingWang，音譯），其研究組主要研究方向是嗅覺(jué)系統(tǒng)神經(jīng)傳遞研究，具體信息見(jiàn)下面附文。由于目前我們周遭環(huán)境呈現(xiàn)不尋常的食物充裕性，因此大部分的對(duì)于食欲的研究集中在哺乳動(dòng)物大腦的一個(gè)稱(chēng)為

Nature：三項(xiàng)華人研究組2011/04/09: 生物通報(bào)道：昨天新鮮出爐的Nature雜志發(fā)布了多篇華人科學(xué)家的研究成果，其中包括五羥色胺在哺乳動(dòng)物的性取向選擇方面的作用，新型材質(zhì)，以及糖轉(zhuǎn)運(yùn)因子的晶體結(jié)構(gòu)。*微孔板檢測(cè)相關(guān)設(shè)備服務(wù)，不容錯(cuò)過(guò)！Molecularregulationofsexualpreferencerevealedbygeneticstudiesof5-HTinthebrainsofmalemice來(lái)自北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，北京生命科學(xué)研究所的研究人員發(fā)表了論文：Molecularregulationofsexualpref

Nature：三項(xiàng)華人研究組成果2011/04/09: Nature：三項(xiàng)華人研究組成果【字體：大中小】www.ebiotrade.com時(shí)間：2011年4月8日來(lái)源：生物通------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------摘要：昨天新鮮出爐的Nature雜志發(fā)布了多篇華人科學(xué)家的研究成果，其中包括五羥色胺在哺乳動(dòng)物的性取向選擇方面的作用，

抗卵巢抗體透明帶（Zona pellucida，ZP）抗體檢測(cè)2011/03/24: 透明帶（Zonapellucida，ZP）是圍繞在卵細(xì)胞周?chē)囊蝗κ人嵝?、明膠樣結(jié)構(gòu)。ZP有很強(qiáng)的免疫原性，能誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生全身與局部的細(xì)胞與體液免疫，產(chǎn)生抗透明帶抗體（anti-zonapellucidaantibody，AZP）。AZP與女性不孕癥有關(guān)。檢測(cè)AZP的方法有免疫沉淀反應(yīng)，間接免疫熒光法，間接血凝，膠乳凝集試驗(yàn)，RIA及ELISA法等。無(wú)論何種檢測(cè)方法，均需透明帶抗原。由于豬和人卵透明帶有共同抗原，故可用豬卵透明帶抗原作試驗(yàn)。以下介紹間接ELISA法檢測(cè)AZP。1．試劑ZP精制抗原

ENA多肽抗體譜檢測(cè)2011/03/24: 核抗原有三個(gè)組成部分：組蛋白、DNA、可溶性核抗原，后者因可溶于磷酸鹽緩沖液（或生理鹽水）中，故名可提取核抗原（extractablenuclearantigen，ENA）。從分子水平識(shí)別ENA多肽抗體是20世紀(jì)80年代抗核抗體研究的重大進(jìn)展，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)這類(lèi)抗體有十余種，抗ENA抗體為其總稱(chēng)。檢測(cè)ENA抗體過(guò)去多用瓊脂雙向擴(kuò)散、對(duì)流免疫電泳，近年來(lái)也建立ELISA法?，F(xiàn)已從免疫擴(kuò)散法發(fā)展到與分子生物學(xué)有關(guān)的免疫印跡技術(shù)（1BT），且國(guó)內(nèi)已有抗ENA多肽抗體譜檢測(cè)試劑盒出售。IBT與對(duì)流電泳和雙擴(kuò)法

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定ELISA操作中標(biāo)本的收集2011/03/24: 用于ELISA測(cè)定的臨床標(biāo)本zui為常用的是血清（漿），有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測(cè)目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前使用血清（漿）標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。對(duì)用于激素和治療藥物測(cè)定的血清標(biāo)本的收集，要注意收集時(shí)間甚或體位有可能會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4：00—6：00之間，會(huì)有一峰值出現(xiàn)；生長(zhǎng)激素、促黃體激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以陣發(fā)性方式釋放，因此，在測(cè)定此類(lèi)激素時(shí)，有必要在密切相連的時(shí)間間隔

ELISA測(cè)定的常用模式--固相捕獲法測(cè)IgM抗體2011/03/24: 在病原體急性感染的診斷中，通常需檢測(cè)IgM抗體，如急性甲型肝炎診斷的血清抗HAVIgM檢測(cè)、急性乙型肝炎病毒感染的血清抗HBclgM檢測(cè)和TORCH項(xiàng)目的系列IgM檢測(cè)等。IgM抗體也有使用間接法測(cè)定的，如目前在市場(chǎng)上可見(jiàn)到的有些TORCH系列的IgM檢測(cè)試劑盒。在使用間接法測(cè)IgM抗體時(shí)，由于臨床血清樣本中含有高濃度的IgG抗體，其中部分特異IgG抗體將與IgM抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合，從而干擾IgM抗體的檢測(cè)。因此，在使用間接法測(cè)定IgM抗體時(shí)，通常須將血清樣本用抗人IgG抗體或SPA預(yù)處理，

乙肝“兩對(duì)半”應(yīng)用檢測(cè)的誤區(qū)2011/03/24: 乙肝“兩對(duì)半”的臨床檢測(cè)應(yīng)用極為常見(jiàn)，并且常將不同的陰陽(yáng)性模式與乙肝患者的臨床癥狀或過(guò)程起來(lái)，有的甚至進(jìn)行乙肝“兩對(duì)半”的定量測(cè)定，以判斷乙肝患者臨床治療的效果。這中間存在對(duì)“兩對(duì)半”結(jié)果應(yīng)用的較大的誤區(qū)，是對(duì)這些病原體感染者體內(nèi)相應(yīng)抗原抗體的發(fā)生發(fā)展以及與疾病狀態(tài)和抗病毒治療之間的關(guān)系不了解所致。目前針對(duì)感染性疾病抗病原體的藥物治療，主要有兩類(lèi)。一是殺滅，如梅毒和結(jié)核病的抗生素應(yīng)用治療；二是抑制，如乙肝和丙肝的抗病毒治療。當(dāng)治療有效時(shí)，前者表現(xiàn)為病原體的消失，后者表現(xiàn)為病原體數(shù)量的動(dòng)態(tài)性降低。

抗體與組織切片的結(jié)合2011/03/24: 因?yàn)榭乖诩?xì)胞染色時(shí)需先固定，所以，抗體與抗原的結(jié)合比在溶液中結(jié)合需要更長(zhǎng)的時(shí)間。孵育的時(shí)間可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整，但是產(chǎn)生有效結(jié)合的時(shí)間一般須超過(guò)30min。通過(guò)增加二抗?jié)舛瓤梢钥s短孵育時(shí)間。通常一些折衷辦法可使二者兼頤。產(chǎn)生強(qiáng)烈的信號(hào)往往伴有高背景的問(wèn)題。低濃度試劑產(chǎn)生的背景雖較低，但信號(hào)的強(qiáng)度也相應(yīng)較弱。一般推薦選擇相對(duì)較短的時(shí)間進(jìn)行二抗的孵育（30～60min），并應(yīng)對(duì)標(biāo)記二抗進(jìn)行滴度測(cè)定，使其產(chǎn)生較低背景并形成可接受的信號(hào)強(qiáng)度?？傊?，抗體應(yīng)該用含高濃度非特異性蛋白的緩沖液稀釋。一

石蠟組織切片的制備2011/03/24: 當(dāng)尋找適用的方法時(shí)，請(qǐng)注意下述資料是10多年經(jīng)驗(yàn)的結(jié)晶。制備1升Bouin固定液：2g苦味酸溶于500ml去離子水中，濾過(guò)，在通風(fēng)櫥中，加入20g多聚甲醛，加熱至60℃，加數(shù)滴lmol／LNaOH使其溶解；冷卻，加500ml2xPBS。大多數(shù)的組織學(xué)研究都采用多聚甲醛固定、石蠟包埋的組織標(biāo)本。因此，此類(lèi)來(lái)源的大多數(shù)的組織和器官，對(duì)抗原的定位可直接提供可靠的資料。組織學(xué)家和病理學(xué)家有豐富的組織學(xué)經(jīng)驗(yàn)，并且，對(duì)抗原表達(dá)模式的評(píng)價(jià)是很有價(jià)值的。如果固定和包埋過(guò)程粗糙，則許多抗原不能被很好地保存。固定的

細(xì)胞涂片組織標(biāo)本的制備2011/03/24: 活檢組織樣品染色可以進(jìn)行細(xì)胞涂片，如針吸活檢組織、組織刮片或新鮮切割組織：此時(shí)，將一薄層的細(xì)胞以物理方法固著在潔凈的載玻片上。要想取得理想的染色效果，zui重要的因素是涂成單層細(xì)胞。涂片雖不能保持組織結(jié)構(gòu)，但是，對(duì)證實(shí)組織標(biāo)本的病理學(xué)改變和感染性因子仍然是很有用的。1．需要的溶液丙酮、甲醇或者丙酮：甲醇為1：1的混合物，PBS。2．操作步驟（1）含液體間隙的組織或器官（脾、肝），可切一小塊組織直接輕敷于一干凈的、干燥的載玻片上。對(duì)組織刮片和針吸活檢組織，可將組織樣本放置載玻片的一端，對(duì)容易分散的

酵母菌免疫染色的操作步驟2011/03/24: 1）在細(xì)胞染色之前，制備溶于蒸餾水的lmg／m1多聚賴(lài)氨酸溶液（平均分子質(zhì)量400kDa）。將多聚賴(lài)氨酸涂于載玻片上，孵育15min。用水沖洗玻片，干燥后將玻片保存在室溫。（2）建立對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的酵母菌細(xì)胞。取出生長(zhǎng)培養(yǎng)的樣品。（3）加入5倍體積的新鮮配制的4％多聚甲醛（見(jiàn)附錄Ⅳ，但不溶于PBS中而用0．1mol／L磷酸鉀溶解，pH6．5）。（4）混均后于室溫下孵育90min。（5）用0．1mol／L磷酸鉀（pH6．5）洗細(xì)胞3次。（6）zui后將沉淀重懸于1．2m01／L、0．12mol／L磷酸

美麗線蟲(chóng)免疫染色的特殊性2011/03/24: 美麗線蟲(chóng)（caenorhabditis）抗原的免疫定位是一種比較新的方法，其基本原理遵循組織切片染色的原則，但美麗線蟲(chóng)的角質(zhì)膜透化處理給方法學(xué)帶來(lái)更大的困難。通過(guò)一系列的強(qiáng)烈固定和透化處理步驟，角質(zhì)膜的問(wèn)題亦可克服。但由于對(duì)這種線蟲(chóng)免疫組化方面的研究起步較晚，時(shí)間相對(duì)較短，目前僅有為數(shù)不多的可靠方法，能使抗體透過(guò)角質(zhì)膜。其方法學(xué)尚有待進(jìn)一步改進(jìn)和完善。1．擊破角質(zhì)膜由于角質(zhì)膜的保護(hù)作用使該類(lèi)線蟲(chóng)的染色有一定困難。在幼蟲(chóng)期這一問(wèn)題尤其突出，特別是在I。1期，此期的蟲(chóng)膜對(duì)透化作用的抗性zui強(qiáng)。通過(guò)

果蠅類(lèi)標(biāo)本發(fā)育晚期胚胎的制備2011/03/24: 1．所需溶液和特殊設(shè)備漂白劑；庚烷；含3．7％甲醛的2mmol／LPIPES（pI-17．0）；甲醇；PBS。解剖顯微鏡；探頭式超聲發(fā)生器。2．操作步驟EGTA，1mm01／L硫酸鎂，100mmol／L（1）在盛有蘋(píng)果汁或葡萄汁的平皿內(nèi)采集胚胎，用水漂洗。大多數(shù)果蠅專(zhuān)家習(xí)慣于在尼龍網(wǎng)濾器上漂洗胚胎標(biāo)本。（2）將胚胎轉(zhuǎn)入50m1三角燒瓶或類(lèi)似的玻璃容器中，以便搖動(dòng)時(shí)不會(huì)溢出。加25ml50％漂白劑以去除絨毛膜。偶爾攪動(dòng)，3min后，用水洗數(shù)次，*洗凈。用解剖顯微鏡觀察胚胎。如果絨毛膜未*去除，重復(fù)

組織切片的免疫染色方法2011/03/24: 以下4種方法一般用于組織免疫染色的準(zhǔn)備。分別是冷凍組織切片；多聚甲醛固定石蠟包埋組織切片；灌流動(dòng)物的組織切片；細(xì)胞涂片。所有這些過(guò)程zui終獲得的標(biāo)本都需固定到載玻片上，為加抗體做準(zhǔn)備。一、組織切片免疫染色過(guò)程組織切片免疫染色技術(shù)可分為3個(gè)步驟：①組織的制備和切片；②樣本與抗體結(jié)合；③檢測(cè)。樣本被固定到載玻片上后，加特異性抗體與其相應(yīng)的抗原結(jié)合，沒(méi)有結(jié)合的抗體則被洗掉；再加標(biāo)記的相應(yīng)二抗，與一抗發(fā)生特異性反應(yīng)；沖洗后，抗原的位置可以通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記的二抗而得知。二、組織標(biāo)本的制備免疫染色的組織材料主

膠體金標(biāo)記試劑的檢測(cè)2011/03/24: 產(chǎn)品編號(hào)：選擇品牌USCNLIFE搜索SearchABCDEFGHIJKLMNOPQRSTUVWXYZ膠體金標(biāo)記試劑的檢測(cè)膠體金粒子在pH值接近蛋白質(zhì)的pI時(shí)，二者容易形成牢固的結(jié)合物。膠體金粒子可以廣泛地與抗免疫球蛋白抗體、蛋白A、鏈霉親合素等結(jié)合。由于結(jié)合的蛋白可與金粒子緩慢地分離，因此，膠體金試劑在使用前應(yīng)該通過(guò)洗滌去除游離蛋白。金標(biāo)記zui初用于電子顯微鏡研究，但亦可用于光學(xué)顯微鏡，得到比酶標(biāo)記方法較高的分辨率，而且，可避免底物的準(zhǔn)備及內(nèi)源性酶活性干擾等問(wèn)題。金標(biāo)記在光學(xué)顯微鏡水平雖缺乏

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