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上海源葉生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
免疫熒光標(biāo)記樣品2012/02/25
用于流式細(xì)胞儀檢測的常用熒光素有FITC、TRITC、Cy3、Cy5，PE和PI，在以上各種熒光染料中，PE熒光zui強(qiáng)，適用于弱表達(dá)抗原；FITC*，適用于強(qiáng)表達(dá)抗原，適用范圍廣。1．直接免疫熒光標(biāo)記法取一定量的細(xì)胞懸液（濃度約l×l06個(gè)／m1），直接加入熒光素標(biāo)記抗體進(jìn)行免疫反應(yīng)（如做雙重標(biāo)記或多重標(biāo)記染色，可把幾種標(biāo)記有不同熒光素的抗體同時(shí)加入）。4℃孵育15～30分鐘后，用l／15mol／LPBS（pH7．2～7．4）洗l～2次，加入緩沖液重懸，上機(jī)檢測。本方法操作簡便，結(jié)果準(zhǔn)確，易于
抗神經(jīng)元細(xì)胞核抗體自身抗原2012/02/18
ANNA—l靶抗原是一組特異地表達(dá)于神經(jīng)元和相關(guān)腫瘤上的35—40kD堿性蛋白。分子克隆研究提示，這組蛋白抗原由三種*的基因：HuD、HuC／ple21和Hel—N1編碼。其中HuD基因位于lp34，HuC／ple21和Hel-N1分別位于19和9號(hào)染色體上。ANNA-2靶抗原分別為55k．D和80kD的兩種神經(jīng)元蛋白。Hu抗原是果蠅基因Elav的一種同源基因產(chǎn)物，Elav與果蠅神經(jīng)元分化密切相關(guān)。Elav表達(dá)于神經(jīng)母細(xì)胞的細(xì)胞周期末期，其突變會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元分化的停滯和神經(jīng)母細(xì)胞無限制增殖。由于H
抗神經(jīng)元細(xì)胞核抗體自身抗體2012/02/18
副瘤性腦脊髓炎(Paraneoplasticencephalomyetitis)及感覺神經(jīng)元疾病是與小細(xì)胞肺癌相關(guān)的罕見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病。雖然這些疾病少見，但其確診提示肺部腫瘤存在可能性。機(jī)制可能是肺部腫瘤抗原與正常表達(dá)于中樞或周圍神經(jīng)系統(tǒng)抗原存在交叉反伴有小腦功能紊亂的腫瘤患者，血清中存在高滴度的PCA—1表明小腦功能紊亂是副腫瘤性質(zhì)引起。若患者并不是發(fā)生乳腺癌或卵巢癌，或腫瘤未表達(dá)YO抗原，則需進(jìn)一步進(jìn)行乳腺和婦科腫瘤檢查。在非副瘤性小腦變性患者或健康個(gè)體中，未發(fā)現(xiàn)PCA-1。不伴PCD的卵巢
抗糖脂自身抗體自身抗體2012/02/02
早在1874年，研究證實(shí)腦組織的主要磷脂成分是糖脂。早期對(duì)血型抗原研究(ABH，Lewis，F(xiàn)orssman，P組)證實(shí)糖脂中的碳水化合物成分參與抗原決定簇的形成。在中樞(CNS)和外周神經(jīng)系統(tǒng)(PNS)炎性脫髓鞘疾病如多發(fā)性硬化，運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病和格林—巴利(Guillain-Barre)綜合征中，發(fā)現(xiàn)了抗神經(jīng)元糖脂的自身免疫反應(yīng)。在正常免疫網(wǎng)絡(luò)中存在天然抗糖脂自身抗體，可能在清除細(xì)胞碎片、一線抗微生物的宿主抵御機(jī)制(吞噬和內(nèi)化)、調(diào)節(jié)造血、改進(jìn)糖脂在細(xì)胞信號(hào)中的效應(yīng)中起作用。磷脂和糖類成分均可
抗髓磷脂堿性蛋白抗體自身抗體2012/02/02
致病作用雖然：MS的病因不清楚，但有證據(jù)表明，細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答均與脫髓鞘疾病的病因有關(guān)。EAE是一種實(shí)驗(yàn)性脫髓鞘自身免疫性疾病，由MBP特異性CD4*T細(xì)胞介導(dǎo)。過繼轉(zhuǎn)移MBP特異性T細(xì)胞給健康的嚙齒動(dòng)物(小鼠和大鼠)可有效誘發(fā)EAE?？埂狹BP和抗—LPL自身抗體出現(xiàn)于EAE血清中，具有脫髓鞘活性，但抗：MBP、PLP和MAG的多克隆抗體在培養(yǎng)的CNS組織中不能引起脫髓鞘作用。對(duì)EAE動(dòng)物模型僅進(jìn)行過繼轉(zhuǎn)移’MBP特異性抗體也不能引起發(fā)病。B細(xì)胞作為抗原呈遞細(xì)胞(APC)在·EAE發(fā)病中也起
鈣離子通道自身抗體2011/12/10
1．致病作用患者血清中L型VGCC抗體的效價(jià)與疾病進(jìn)展有一定的相關(guān)性，提示該抗體可能存在病理作用。采用表達(dá)L、N—和P—型VGCCs的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)顯示，IgG型VGCC抗體具有介導(dǎo)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷作用。此外，將ALS患者的免疫球蛋白注人小鼠將產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的特異性改變，包括細(xì)胞內(nèi)鈣增加和細(xì)胞損傷的跡象。2．檢測方法許多ALS患者血清中存在幾種VGCCs自身抗體，但實(shí)際上只有兩種形式的VGCCs抗原能夠用于生化方法檢測血清中的相應(yīng)的自身抗體。①從兔骨骼肌中分離純化的L型VG
促甲狀腺激素受體抗體自身抗原2011/12/10
促甲狀腺激素受體（Thyrotropinreceptot，TSHR）抗體在被發(fā)現(xiàn)以前，認(rèn)為是引起Grave疾?。℅D）的原因。1956年，Adams等在研究一例垂體外因素GD患者時(shí)發(fā)現(xiàn)一種被稱作長效甲狀腺刺激物（LATS）的異常甲狀腺刺激物可引起GD。LATS屬IgG免疫球蛋白，具有刺激甲狀腺功能的作用。LATS作用頗似TSH，均可與TSHR相作用刺激甲狀腺功能。通過Grave病患者的IgG對(duì)”‘PTSH與TSH受體結(jié)合的競爭抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果，證實(shí)LATS為抗TSHR自身抗體。1．定義經(jīng)過多年研究，
甲狀腺非肽激素自身抗原2011/12/03
早在1956年發(fā)現(xiàn)了接受131I治療的甲狀腺乳頭狀癌患者血清中的T+可與人γ球蛋白結(jié)合。1967年檢測出6名橋本淋巴細(xì)胞甲狀腺炎患者血清中存在抗甲狀腺激素自身抗體（THAA）。此后有越來越多的甲狀腺疾病、非甲狀腺疾病患者或無明顯疾病的健康人血清中發(fā)現(xiàn)抗T4或抗T3自身抗體。1．定義甲狀腺產(chǎn)生的碘化糖蛋白——甲狀腺球蛋白被水解形成T3和T4釋放人循環(huán)。甲狀腺球蛋白（Tg）是THAA中代表性的自身抗原，未變性和變性（熱、酸或堿）的Tg都具有免疫原性，其分子結(jié)構(gòu)中的碘是抗原活性所必需的。血清中99．9
甲狀腺非肽激素自身抗體2011/12/03
1．致病作用甲狀腺激素在游離狀態(tài)下沒有免疫原性，但當(dāng)與血清蛋白如白蛋白結(jié)合時(shí)，可作為抗原與抗體反應(yīng)。在動(dòng)物體內(nèi)尤其當(dāng)注射*福氏佐劑時(shí)，Tg能誘導(dǎo)抗甲狀腺激素抗體的產(chǎn)生。Tg是甲狀腺激素的前身，是富含碘的甲狀腺素大分子，通常不存在于血液中，一旦甲狀腺組織受損被釋放入血，則被視為外來的物質(zhì)誘發(fā)自身免疫病。2．檢測方法THAA的檢測有幾種不同的方法，所有方法都包括THAA與標(biāo)定的放射標(biāo)記的甲狀腺激素（或類似物）共孵育、分離和放射性的測定，更為重要的是去除內(nèi)源性甲狀腺激素，以提高分析的靈敏度和精密度。在
甲狀腺過氧化物酶抗體檢測方法臨床意義2011/11/26
特異的TPO自身抗體檢測的方法有：IIF法、ELISA法、放射免疫法，結(jié)合TPO的鼠單克隆抗體固相競爭法，TPO包被捕獲自身抗體法，和TPO化學(xué)發(fā)光法，其中IIF法為較為常用的篩查方法，以靈長類動(dòng)物甲狀腺冷凍切片為抗原基質(zhì)的熒光圖形為腺泡上皮細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)呈斑塊狀著染，核陰性。不僅自身免疫性甲狀腺炎患者存在TPO自身抗體，而且無明顯甲狀腺疾病的患者如出現(xiàn)TPO抗體，預(yù)示將有發(fā)生甲·狀腺疾病的可能。TPO自身抗體的效價(jià)與甲狀腺炎組織病理變化有很好的相關(guān)性。然而由于甲狀腺功能在促甲狀腺激素的作用下有很
抗甲狀腺球蛋白抗體自身抗原2011/11/26
1．定義甲狀腺球蛋白是甲狀腺濾泡中腺質(zhì)的主要成分，在碘的儲(chǔ)存及碘化甲狀腺激素T3和T4合成中*。Tg為一種660kD蛋白，由兩個(gè)330kD單體聚合組成。人Tg基因位于8號(hào)染色體上，其mR—NA由8448bp組成，為2767個(gè)氨基酸片段，其中67個(gè)是酪氨酸（每分子是134個(gè)），當(dāng)經(jīng)碘化后這些酪氨酸就是組成甲狀腺激素的惟一的碘化氨基酸。除了進(jìn)一步糖基化外，Tg還要經(jīng)過翻譯后的修飾，包括磷酸化、硫酸化和碘化。2．特性Tg氨基酸結(jié)構(gòu)含三種結(jié)構(gòu)域。N端含有一段重復(fù)10次的約60個(gè)氨基酸的序列，色氨酸、脯氨
抗甲狀腺球蛋白自身抗體2011/11/16
1956年Witebsky和Rose以免甲狀腺球蛋白（Thyroglobulin，Tg）免疫其他的兔子時(shí)，發(fā)現(xiàn)被免疫的兔子體內(nèi)可產(chǎn)生與兔Tg反應(yīng)的抗體。隨后的研究發(fā)現(xiàn)橋本甲狀腺炎、甲狀腺癌以及一些與甲狀腺相關(guān)的疾病中存在抗Tg抗體。在自身免疫性甲狀腺病中Tg抗體出現(xiàn)較TPO抗體早，因而Tg抗體是甲狀腺發(fā)生自身免疫損傷的一個(gè)較好的血清標(biāo)志物。Burek于1982年對(duì)家族中青少年甲狀腺炎的調(diào)查結(jié)果支持這一觀點(diǎn)，認(rèn)為Tg自身抗體很可能是*個(gè)自身免疫標(biāo)志物，隨后是微粒體抗體。致病作用通過轉(zhuǎn)輸T淋巴細(xì)胞，
抗甲狀腺球蛋白抗體檢測方法臨床意義2011/11/16
過去用于檢測Tg自身抗體的方法有：沉淀試驗(yàn)、間接免疫熒光（11F）、血凝試驗(yàn)、ELISA和放射定量分析。目前常用IIF法和ELISA法。IIF法熒光圖形為在甲狀腺濾泡腔內(nèi)出現(xiàn)波浪狀著染。在甲狀腺炎患者中抗TPO抗體檢測方法的靈敏度稍遜于抗Tg抗體，但實(shí)際上兩者的檢出率不相上下。用高靈敏度方法檢測Tg，可能會(huì)降低與疾病相關(guān)的特異性。一些評(píng)估Tg自身抗體特異性的研究表明，甲狀腺功能正常的個(gè)體與自身免疫性甲狀腺炎免疫應(yīng)答之間存有一定的差別。正常人亦可產(chǎn)生能識(shí)別相同或具有交叉反應(yīng)性抗原表位的抗體。另一方
抗谷氨酸脫羧酶自身抗體2011/11/05
1．致病作用目前尚無證據(jù)表明GAD與SMS的發(fā)病·相關(guān)。40％的SMS患者GAD抗體陰性，抗體陽性及陰性的SMS患者癥狀無差異。少數(shù)GAD抗體陰性患者存在抗其他突觸小泡神經(jīng)元抗原的自身抗體。這些患者均為女性，并伴有乳腺腫瘤，表明可能有自身免疫性副癌綜合征。尸檢結(jié)果發(fā)現(xiàn)少數(shù)患者腦干和脊髓組織有炎癥反應(yīng)，但大多數(shù)患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)沒有免疫反應(yīng)性。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)60％GAD抗體陽性的SMS患者伴有1型糖尿病、橋本甲狀腺炎、Grave病等自身免疫性疾病；而GAD抗體陰性的SMS患者中僅少數(shù)與自身免疫性疾
谷氨酸脫羧酶自身抗體1型糖尿病自身抗原2011/11/05
1．定義分子量為65kD和67kD的兩個(gè)異構(gòu)體GAD被稱作GAD65和GAD67，由各自的基因編碼，在氨基酸水平上有65％的同源性和80％的相似性，zui大差異位于NGAD67端110個(gè)氨基酸處（圖5-9）。酶的激活需要在C末端附近結(jié)合5，磷酸化的吡哆醛輔因子，GAD65作為脫輔基酶存在，GAD67作為結(jié)合P-5-P的全酶存在。2．組織來源大腦中GAD含量zui高，其次為胰島郎罕細(xì)胞，大腦垂體、性腺、腎、腎上腺和肝內(nèi)。在1型糖尿病中GAD作為一種自身抗原已被廣泛研究。在人、大鼠和小鼠的胰腺胰島中
胰島素抗體檢測方法臨床意義2011/10/29
IAA可用放射免疫及直接ELISA法檢測。早期因方法學(xué)不同導(dǎo)致IAA的檢測結(jié)果差異較大，目前已有檢測IAA的標(biāo)準(zhǔn)，此外，液相法檢測IAA對(duì)IDDM的預(yù)后價(jià)值較ELISA法更優(yōu)，有實(shí)驗(yàn)室證實(shí)胰島素分子經(jīng)一價(jià)碘化作用將增加IAA對(duì)胰島素的競爭性，有些抗體親和力可增加1000倍，然而并非每位患者血清中抗體均如此。由于新診斷的糖尿病患者IAA的陽性率較低，因而有人認(rèn)為IAA的診斷價(jià)值不大。但重要的是IAA的滴度、檢出率與年齡成反比，IAA在成人型糖尿病中檢出率僅4％，但在不足4歲發(fā)病的幼年型患者中幾乎1
抗腎上腺皮質(zhì)抗體2011/10/29
（一）自身抗原腎上腺皮質(zhì)抗體的靶抗原主要有以下兄種：①21—羥化酶，該抗原被認(rèn)為是腎上腺組織特異性蛋白；②細(xì)胞色素p450側(cè)鏈分裂酶，該抗原存在于腎上腺、性腺及胎盤；③17—α—羥化酶，該抗原存在于腎上腺和性腺。（二）自身抗體1。同義詞腎上腺抗體（adrenalantibodies），腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞抗體（antibodiestoasrenoeorticalcells，asrenalcorticalantibodies）。2．臨床意義自身免疫性Addison病患者中，60％～70％抗腎上腺皮質(zhì)抗體
抗精子抗體自身抗體2011/10/22
1982年Shulman等報(bào)道約9％的男性不育者可檢出AsAb。另據(jù)世界衛(wèi)生組織人類生殖研究、發(fā)展和研究培訓(xùn)特別規(guī)劃署1988年的報(bào)道，6407例男性不育病例中有2．9％的患者病因?yàn)榈鞍踪|(zhì)的因素。近10余年來隨著蛋白質(zhì)印跡技術(shù)、DNA重組技術(shù)的發(fā)展，人們對(duì)精子抗原的認(rèn)識(shí)有子一定的提高。精子抗原種類繁多，到目前已發(fā)現(xiàn)100多種。按其來源特異性分為精子特異性抗原和精子非特異性抗原。按其與生育力的關(guān)系分為生育相關(guān)精子包被抗原、膜固有抗原、胞質(zhì)抗原和核抗原。近幾年，許多與受精和早期胚胎發(fā)育有關(guān)的精子抗原
抗卵巢抗體檢測方法臨床意義2011/10/22
（一）研究簡史LuborskyJL等報(bào)道，部分患者年齡不到40歲而閉經(jīng)，血FSH、LH等升高，在排除放射化療，染色體異常等原因后，外周血測得AOA升高。一些自身免疫性疾病如Addison，甲狀腺炎患者體內(nèi)有AOA存在，部分不明原因性不孕癥婦女體內(nèi)非特異性自身抗體滴度增加，多種現(xiàn)象說明卵巢功能的改變與自身免疫性疾病之間有關(guān)聯(lián)，因此這方面研究逐漸增多。（二）自身抗原抗卵巢抗體具有多種性，它包括抗透明帶抗體，抗顆粒細(xì)胞抗體，抗內(nèi)膜細(xì)胞抗體等。（三）自身抗體1．致病作用AOA可多方面地影響卵巢的功能，包
抗子宮內(nèi)膜抗體檢測方法臨床意義2011/10/15
（一）自身抗原子宮內(nèi)膜抗體所針對(duì)的靶抗原主要存在于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞胞液中，是一種孕激素依賴蛋白，在分泌期子宮內(nèi)膜中的含量遠(yuǎn)較增殖期內(nèi)膜含量非富。獲自子宮內(nèi)膜異位癥（EMT）患者血清和（或）腹腔液中的EMAb能與患者子宮內(nèi)膜和異位植灶中的34、42、82、94、110、120和140kD等7種蛋白發(fā)生特異反應(yīng)，而與EMAb發(fā)生反應(yīng)的正常子宮內(nèi)膜抗原為25、27、56、60（62）和75kD，提示誘導(dǎo)EMAb產(chǎn)生和抗原可能與正常子宮內(nèi)膜抗原不同。（二）自身抗體1。致病作用EMAb與子宮內(nèi)膜中的靶抗
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