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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第14年
撫生試劑- 抗Clq抗體自身抗體2014/05/12
抗Clq抗體自身抗體1.檢測(cè)方法過去通常使用經(jīng)典的:ELISA方法能與Clq的CLR區(qū)結(jié)合的自身抗體,但條件是必須有足夠濃度的CLR(1~10ug/ml)以保證與抗CLR抗體結(jié)合,因?yàn)檠逯锌乖瓭舛鹊牟煌瑫?huì)導(dǎo)致不同的結(jié)合程度,比如,SLE中抗體與抗原的結(jié)合力就要低于HUSV中的結(jié)合力。另一種檢測(cè)方法是利用在1.0MNaGl的緩沖液中IgG與Clq的球形區(qū)的結(jié)合會(huì)大大減少,但抗CLR.與Clq的結(jié)合物穩(wěn)定存在的原理。這種利用Clq固相分析法檢測(cè)復(fù)合物的方法的特殊之處就在于在血清的溫育和洗脫過程中使
撫生試劑- 結(jié)核病的病理變化2014/05/09
結(jié)核病的病理變化結(jié)核病由于牲畜種類和感染途徑不同,其病變發(fā)生部位和表現(xiàn)形式也有差異,分述如下。(1)豬結(jié)核病宰后檢驗(yàn)時(shí)比較常見的是頭頸部淋巴結(jié)結(jié)核,尤以頜下淋巴結(jié)和咽后淋巴結(jié)zui為常見;其次是腸系膜淋巴結(jié)和支氣管淋巴結(jié)結(jié)核?;疾×馨徒Y(jié)呈不同程度的腫大、堅(jiān)實(shí)、切面有粟粒大小至高梁米粒大結(jié)節(jié),中心干酪化或鈣化。因病變表現(xiàn)略有不同,所以常見有:結(jié)核性干酪性淋巴結(jié)炎(因淋巴組織除殘存固有的小粱外,都發(fā)生干酪樣壞死,故切面見干酪樣壞死呈放射狀,此時(shí),整個(gè)淋巴結(jié)表現(xiàn)高度腫大),彌漫性、增生性、結(jié)核性淋巴結(jié)
撫生試劑-夾心ELISA檢測(cè)與鑒定熱不穩(wěn)定腸毒素2014/05/08
夾心ELISA檢測(cè)與鑒定熱不穩(wěn)定腸毒素此法的包被物可用抗LT抗體或LT受體成分(GM神經(jīng)節(jié)背脂)兩種。試驗(yàn)時(shí),先用1:5O稀釋的粗制兔抗LT血清或5O/lg/mlGM神經(jīng)節(jié)背脂包被塑料板。包被后,加入待檢菌的37℃振搖培養(yǎng)18h的腦心浸液培養(yǎng)物濾液2OOμL,每份樣品平行加2孔,按常法溫育,洗滌后,加1:500稀釋的粗制羊抗LT血清,孵育,洗滌,再加1:4OO的兔抗羊IgG堿性磷酸酶復(fù)合物,以六水合物(hexahydrate)作底物顯色,測(cè)OD450值,以O(shè)D450≥0.2O判為陽性。據(jù)Klip
撫生試劑- 豬繁殖與呼吸綜合征流行病學(xué)特征2014/05/07
豬繁殖與呼吸綜合征流行病學(xué)特征1.傳染源病豬和帶毒豬是該病的主要傳染源,亞臨床感染的豬群是PRRSV不明傳播的潛在來源。病豬、無癥狀的帶毒豬、康復(fù)豬、病母豬所產(chǎn)的仔豬,以及被污染的環(huán)境和用具等均具有傳染性。感染豬在臨床癥狀消失8周后仍可排毒,且PRRSV可在豬上呼吸道和扁桃體存活相當(dāng)長的時(shí)間(≥5個(gè)月),因此帶毒豬是病毒傳播的重要來源?;疾」i的精液也是傳播源。仔豬可成為自然帶毒者。病豬分泌物和排泄物污染飼料和飲水、死產(chǎn)胎兒、胎衣及子宮排泄物含有PRRSV,可污染環(huán)境成為傳染源。zui近報(bào)道鼠類
撫生試劑- ELISA試劑盒的包被條件與封閉2014/05/06
ELISA試劑盒的包被條件與封閉包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時(shí)間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)的特點(diǎn)和材料的性質(zhì)而選定??贵w和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置,37℃中保溫2小時(shí)被認(rèn)為具有同等的包被效果。包被的zui適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過實(shí)驗(yàn)與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/
撫生試劑- 單克隆抗體的純化2014/05/05
單克隆抗體的純化大量單克隆抗體的方法主要有以下兩種。1.體外使用旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)管大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從中獲取單克隆抗體。但此方法產(chǎn)量低,一般培養(yǎng)液內(nèi)抗體含量為10—60ug/ml,如果大量,費(fèi)用較高。小鼠可獲5一l0ml腹水。也可用注射器抽提腹水。2.體內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞,制備腹水或血清。(1)實(shí)體瘤法:對(duì)數(shù)生長期的雜交瘤細(xì)胞按(1—3)×107/ml接種于小鼠背部皮下,每處注射o.2ml,共2~4點(diǎn)。待腫瘤達(dá)到一定大小后(一般10~20d)則可采血,從血清中獲得單克隆抗體的含量可達(dá)到1—10rug/m
撫生試劑- 抗體能與廣泛的化學(xué)結(jié)構(gòu)結(jié)合并能區(qū)分類似的化合物2014/05/04
抗體能與廣泛的化學(xué)結(jié)構(gòu)結(jié)合并能區(qū)分類似的化合物結(jié)合位點(diǎn)的微環(huán)境能夠適應(yīng)各種高電荷和疏水性分子。由碳水化合物、脂質(zhì)、核酸、氨基酸和各種合成的有機(jī)化學(xué)物質(zhì)組成的表位已被確定。可能的結(jié)合位點(diǎn)數(shù)量巨大,而且針對(duì)新化合物的特異性抗體容易獲得??贵w的特異性已通過大量實(shí)驗(yàn)證實(shí),即表位結(jié)構(gòu)很小的改變就能夠阻止抗原識(shí)別。例如,已經(jīng)分離出能夠區(qū)別不同構(gòu)型蛋白質(zhì)抗原的抗體,檢定單個(gè)氨基酸的替代物或通過穩(wěn)定的轉(zhuǎn)換形式作為弱效酶發(fā)揮作用。
撫生試劑- 膠體金的質(zhì)量鑒定2014/04/25
膠體金的質(zhì)量鑒定膠體金制備好后,應(yīng)進(jìn)行顆粒直徑的測(cè)定及金顆粒間大小的均勻度鑒定。1.膠體金顆粒直徑測(cè)定用預(yù)先處理好的覆有Formvar膜的300目鎳網(wǎng)浸入膠體金溶液內(nèi),取出放在空氣中干燥或37℃烤干。于透射電鏡下觀察其顆粒大小及均勻度,計(jì)算平均直徑。如電鏡放大10萬倍,照片放大2.5倍,則10萬×2.5=250000=25nm。理想的金顆粒大小基本相等,均勻一致,無橢圓形及多角形的金顆粒存在。2.膠體金顆粒均勻度的測(cè)定一般需測(cè)量100個(gè)以上的膠體金顆粒,然后用統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,計(jì)算膠體金顆粒的平均直徑
撫生試劑-酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法(ELISA)測(cè)定植物激素含量2014/04/24
酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法(ELISA)測(cè)定植物激素含量一、原理植物激素(planthormone)免疫定量主要有放射免疫分析(RIA)和酶聯(lián)吸附免疫分析(ELISA),由于前者操作上欠安全等原因,目前常采用后一種類型。在ELISA中,抗原抗體反應(yīng)的檢測(cè)依靠酶標(biāo)記物來實(shí)現(xiàn),常用的酶有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酯酶。酶可直接標(biāo)記激素分子,稱為酶標(biāo)植物激素,也可標(biāo)記于第二抗體(識(shí)別抗激素抗體Fc片段的抗體或金黃色葡萄球菌A蛋白),稱為酶標(biāo)二抗。這兩類標(biāo)記物分別用于固相抗體型和固相抗原型ELISA。A.固相抗體
撫生試劑-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)基本原理2014/04/23
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)基本原理【摘要】:基本原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,相關(guān)專題ELISA免疫實(shí)驗(yàn)技術(shù)基本原理
撫生試劑-ELISA [酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)]原理與分類2014/04/22
ELISA[酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)]原理與分類【摘要】:1.ELISA的原理ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗相關(guān)專題ELISA免疫實(shí)驗(yàn)技術(shù)1.elisa的原理ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶
撫生試劑-試劑盒的用途及特點(diǎn)2014/04/21
試劑盒的用途及特點(diǎn)用途:用固相化的、已標(biāo)記的餌蛋白或標(biāo)簽蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),從細(xì)胞裂解液中釣出與之有相互作用的蛋白質(zhì)。酵母雙雜交后,驗(yàn)證已知的“誘餌”蛋白與釣出蛋白或已純化的相關(guān)蛋白間的相互作用關(guān)系。從體外轉(zhuǎn)錄或翻譯體系中檢測(cè)出蛋白質(zhì)相互作用。特點(diǎn):提供了可用于發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)相互作用的一套完整、易用、經(jīng)濟(jì)的方案。用普通的試驗(yàn)儀器和試劑(如離心機(jī)、Mini-Gel、蛋白質(zhì)染色)即可完成整個(gè)實(shí)驗(yàn)。適用于單個(gè)或多個(gè)樣品。靈活的“誘餌-捕獲”方式,鹽離子、變性劑濃度可調(diào),對(duì)于弱的蛋
撫生試劑-揭示炎癥性腸病新突破2014/04/18
揭示炎癥性腸病新突破那些有害的細(xì)菌,如大腸桿菌,為什么會(huì)在炎癥性腸病患者的腸道內(nèi)大肆生長,并引起嚴(yán)重的腹瀉呢。如今,UCDavis的研究員們找到了答案,而這意味著我們?cè)诟玫刂委熝装Y性腸病的道路上邁出了*步。研究員們發(fā)現(xiàn)了一種生物學(xué)機(jī)制,在這種機(jī)制下有害細(xì)菌在炎癥性腸病患者體內(nèi)生長,逐步排擠有益細(xì)菌,并損傷腸道。這一新的發(fā)現(xiàn)被刊登在2月8日一期的《科學(xué)》Science雜志上,并可能會(huì)幫助研究者發(fā)明治療炎癥性腸病的新方法,減少現(xiàn)有治療所帶來的副作用。當(dāng)有益的細(xì)菌被免疫系統(tǒng)誤殺時(shí),炎癥性腸病便會(huì)產(chǎn)生
撫生試劑-使ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)更穩(wěn)定的方法2014/04/17
使ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)更穩(wěn)定的方法應(yīng)留意以下原理:因?yàn)榈鞍踪|(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用,ELISA試劑盒這種物理吸附長短特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。還有有的包被原可能不是蛋白,對(duì)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被,親和素生物素:先親和素先包
撫生試劑-做好免疫組化染色必須注意的問題2014/04/16
做好免疫組化染色必須注意的問題一、為達(dá)到免疫組織化學(xué)技術(shù)的要求,組織固定越新鮮越好。在免疫組化zui后結(jié)果的判斷時(shí),??梢姷骄鶆蛞黄乃品翘禺愋匀旧默F(xiàn)象,經(jīng)多方研究認(rèn)為,它是一種假性非特異性的染色。因?yàn)槟[瘤組織中含有的抗原較易發(fā)生擴(kuò)散彌散,腫瘤細(xì)胞無限制的生長和生長過速,導(dǎo)致腫瘤中間部分組織血液供給困難,造成缺血壞死,壞死細(xì)胞中的抗原由于機(jī)體的作用,可以被均勻地散布于細(xì)胞與細(xì)胞間的間質(zhì),這是抗原發(fā)生彌散的一種方式。另一種抗原彌散的方式就是,由于組織沒有及時(shí)的固定所引起的。離體的組織不及時(shí)固定,
撫生試劑-大鼠TRH ELISA試劑盒注意事項(xiàng)2014/04/15
大鼠TRHELISA試劑盒注意事項(xiàng)ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。大鼠TRHelisa試劑盒注意事項(xiàng):★試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存?!餄庀礈煲嚎赡軙?huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影
撫生試劑-PEG分子治療濃度對(duì)融合率有明顯影響2014/04/14
PEG分子治療濃度對(duì)融合率有明顯影響PEG的分子質(zhì)量和濃度對(duì)融合率有明顯影響,相對(duì)分子質(zhì)量在400~6000,濃度在10%~60%均可促融。但相對(duì)分子質(zhì)量和濃度越大,促融率越高的同時(shí),黏度和對(duì)細(xì)胞的毒性也越大。常用濃度為40%~50%,低于30%融合率較低,高于50%則毒性較大。實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)表明,Merck公司的相對(duì)分子質(zhì)量為4000的PEG促融合效果。配制方法:取PEG2g沸水中煮30min或高壓15min,冷卻至50~60℃時(shí)加入37℃預(yù)溫的不*培養(yǎng)液2ml,混勻后4℃保存。2)融合的關(guān)鍵除了無
撫生試劑-核酸擴(kuò)增工藝的優(yōu)化和質(zhì)量控制工藝優(yōu)化2014/04/11
核酸擴(kuò)增工藝的優(yōu)化和質(zhì)量控制工藝優(yōu)化核酸擴(kuò)增工藝在整個(gè)核酸檢測(cè)試劑中zui重要,其涉及的試劑及原材料多,反應(yīng)參數(shù)設(shè)定復(fù)雜,是整個(gè)檢測(cè)反應(yīng)的核心。具體包括檢測(cè)試劑的配制與反應(yīng)參數(shù)的設(shè)置。其中檢測(cè)試劑主要由以下組分組成:引物、探針、Taq酶、UNG酶等;反應(yīng)參數(shù)包括引物與探針濃度、*Tm值、信號(hào)采集溫度等。以HIV-1熒光定量PCR檢測(cè)試劑為例進(jìn)行說明。工藝優(yōu)化1.引物探針的設(shè)計(jì)與優(yōu)化引物探針的設(shè)計(jì)與質(zhì)量控制見前面*節(jié),根據(jù)保守的靶序列,按照HIV引物探針設(shè)計(jì)的要求設(shè)計(jì)幾對(duì)引物和探針,從中進(jìn)行優(yōu)化選
撫生試劑-槐花2014/04/10
槐花【拼音名】HuáiHuā【英文名】FLOSSOPHORAE【別名】金藥樹、護(hù)房樹、豆槐、槐米【來源】本品為豆科植物槐SophorajaponicaL.的干燥花及花蕾。夏季花開放或花蕾形成時(shí)采收,及時(shí)干燥,除去枝、梗及雜質(zhì)。前者習(xí)稱“槐花”,后者習(xí)稱“槐米”?!拘誀睢炕被ǎ罕酒钒櫩s而卷曲,花瓣多散落。完整者花萼鐘狀,黃綠色,先端5淺裂;花瓣5,黃色或黃白色,1片較大,近圓形,先端微凹,其余4片長圓形。雄蕊10,其中9個(gè)基部連合,花絲細(xì)長。雌蕊圓柱形,彎曲。體輕。無臭,味微苦?;泵祝撼事研位驒E圓
撫生試劑-ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因分析2014/04/09
ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因分析【摘要】:ELISA即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),是一種常用的固相酶免疫測(cè)定方法。Engvall和Perlmann于1971年zui先應(yīng)用該法進(jìn)行了IgG定量測(cè)定,并命名為"enzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)"。ELISA的基本原理是:①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原(或抗體),而且此酶標(biāo)抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;相關(guān)專題ELISA免疫實(shí)驗(yàn)技術(shù)E
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