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結(jié)腸炎(UC)動(dòng)物造模解決方案和文獻(xiàn)指南2024/07/15: 結(jié)腸炎(UC)動(dòng)物造模解決方案和文獻(xiàn)指南DSS造模發(fā)展歷程目前有多種動(dòng)物模型被廣泛用于研究炎癥性腸（inflammatoryboweldisease，IBD）的病因、發(fā)病機(jī)制及測(cè)試新開(kāi)發(fā)藥物藥效等，尤其以葡聚糖硫酸鈉鹽（DextranSulfateSodiumSalt，DSS，MW:36000~50000）結(jié)腸炎（ulcerativecolitis，UC）模型應(yīng)用最為廣泛?，F(xiàn)行研究中常用的UC建模類(lèi)型大約分為：自發(fā)模型、誘導(dǎo)模型（化學(xué)藥物誘導(dǎo)：TNBS三硝基苯磺酸，DSS葡聚糖硫酸鈉等、免疫學(xué)方

DSS誘導(dǎo)果蠅潰瘍性結(jié)腸炎模型的建立2024/07/15: 葡聚糖硫酸鈉(DextranSulfateSodium，DSS)是葡聚糖的聚陰離子衍生物，喂食果蠅會(huì)破壞腸上皮中腸道表皮細(xì)胞之間的連接從而造成腸道損傷，引起多條通路應(yīng)答調(diào)控干細(xì)胞的自我更新及分化，補(bǔ)充受損細(xì)胞，維持腸道穩(wěn)態(tài)。圖1.果蠅腸道干細(xì)胞分裂分化示意圖實(shí)驗(yàn)動(dòng)物5-10日齡果蠅，雌性實(shí)驗(yàn)材料DSS（yeasenDSS60316ES,MW36000-50000）實(shí)驗(yàn)步驟1.用5%的蔗糖溶液配制喂食培養(yǎng)基；2.對(duì)照組：5%蔗糖培養(yǎng)基（SC），實(shí)驗(yàn)組：3%DSS（培養(yǎng)基配制）；3.預(yù)先用500μL

DSS誘導(dǎo)豬潰瘍性結(jié)腸炎模型的建立2024/07/15: 背景概述腸道通透性增加和相關(guān)體重減輕是DSS結(jié)腸炎動(dòng)物模型的常?特征。D-甘露醇是?種惰性小碳水化合物分?，可沿整個(gè)隱窩-絨毛軸吸收，?于評(píng)估體內(nèi)腸道通透性。圖源實(shí)驗(yàn)動(dòng)物4-5天大，約克郡小豬實(shí)驗(yàn)材料DSS（yeasenDSS60316ES,MW36000-50000）實(shí)驗(yàn)步驟1.以商業(yè)代乳粉配?飲?，每天喂食三次，直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束；2.將動(dòng)物分為陽(yáng)性對(duì)照組（Pos），陰性對(duì)照組（Neg），實(shí)驗(yàn)組（Trp）;3.陽(yáng)性對(duì)照組（Pos）：灌注DSS;陰性對(duì)照組（Neg）：灌注生理鹽水;實(shí)驗(yàn)組（Trp）:

DSS誘導(dǎo)斑馬魚(yú)潰瘍性結(jié)腸炎模型的建立2024/07/15: 斑馬魚(yú)作為腸道損傷模型的應(yīng)用已得到充分證實(shí)，葡聚糖硫酸鈉（DextranSulfateSodiumSalt，DSS）誘導(dǎo)的斑馬魚(yú)IBD模型模擬了哺乳動(dòng)物IBD表型的不同特征，包括腸道中性粒細(xì)胞炎癥、過(guò)多粘液生成、腸淋巴管生成增加以及前炎性細(xì)胞因子上調(diào)。圖片來(lái)源：包圖網(wǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物3dpf（dayspostfertilization)斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)材料DSS（Yeasen60316ES，MW:36000~50000）實(shí)驗(yàn)步驟1.將斑馬魚(yú)胚胎培養(yǎng)在含甲基藍(lán)的E3胚胎培養(yǎng)基中，28.5℃，培養(yǎng)至1dpf；2.

DSS誘導(dǎo)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型方案2024/07/15: 葡聚糖硫酸鈉鹽（DextranSulfateSodiumSalt,DSS）是一種聚陰離子衍生物，其誘導(dǎo)結(jié)腸炎模型的機(jī)制雖仍未十分明確，但通常認(rèn)為與巨噬細(xì)胞功能失調(diào)、腸道菌群失調(diào)、DSS對(duì)結(jié)腸上皮的毒性作用、細(xì)胞因子在DSS結(jié)腸炎模型的發(fā)病中起重要作用等機(jī)制有關(guān)。實(shí)驗(yàn)案例1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：大鼠，1周齡，100g；實(shí)驗(yàn)步驟：5%的DSS，3.5mL/100g每日灌胃，灌胃2周，HE染色；實(shí)驗(yàn)結(jié)果：UC大鼠的結(jié)腸長(zhǎng)度低于健康大鼠；結(jié)腸黏膜異常，存在大量炎癥細(xì)胞。圖1.(a)健康大鼠和UC大鼠的腸道長(zhǎng)度;(b

DSS誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型方案2024/07/15: 小鼠模型是結(jié)腸炎造模常見(jiàn)模型，自從1985年采用葡聚糖硫酸鈉(dextransulphatesodium,DSS)制備出倉(cāng)鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型后，已有大量數(shù)據(jù)證明DSS結(jié)腸炎模型的病因、臨床癥狀、病理改變及治療應(yīng)答均與人類(lèi)潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerativecolitis，UC)相似。現(xiàn)行研究中常用的UC建模類(lèi)型大約分為：自發(fā)模型、誘導(dǎo)模型（化學(xué)藥物誘導(dǎo)：TNBS三硝基苯磺酸，DSS葡聚糖硫酸鈉等、免疫學(xué)方法誘導(dǎo)、細(xì)胞移植誘導(dǎo)）以及基因修飾模型等。DSS造模優(yōu)勢(shì)葡聚糖硫酸鈉鹽（DextranSulf

如何評(píng)價(jià)DSS誘導(dǎo)結(jié)腸炎模型是否成功2024/07/12: 一、DSS構(gòu)建的UC模型特點(diǎn)通過(guò)給予動(dòng)物自由飲用不同濃度的DSS（MW:36000~50000）水溶液，根據(jù)用藥時(shí)間及用藥周期可制成急性和慢性兩種結(jié)腸炎模型。該模型癥狀表現(xiàn)與人類(lèi)UC極為相似，主要表現(xiàn)為腹瀉、黏液樣便、糞便潛血、肉眼血便、重量減輕、活動(dòng)度減少，毛色變差等。表1DSS結(jié)腸炎模型組織學(xué)特征DSS結(jié)腸炎模型類(lèi)別急性期結(jié)腸炎模型慢性期結(jié)腸炎模型組織學(xué)改變結(jié)腸充血、水腫、變短、變脆、重量長(zhǎng)度比增加結(jié)腸明顯縮短出現(xiàn)不同程度的結(jié)腸潰瘍粘膜增厚、淋巴結(jié)腫大黏膜水腫、杯狀細(xì)胞缺失、隱窩腫脹破壞杯狀

新品預(yù)告 | 突破技術(shù)壁壘，DNA甲基化MGI平臺(tái)文庫(kù)構(gòu)建試劑盒閃亮登場(chǎng)！2024/07/09: 背景介紹隨著生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展，DNA甲基化（DNAmethylation）標(biāo)志物在癌癥診斷、治療選擇及預(yù)后評(píng)估中的重要性日益凸顯。在現(xiàn)代腫瘤治療領(lǐng)域，腫瘤DNA甲基化標(biāo)志物作為一種重要的生物標(biāo)志物，在癌癥的早期診斷、治療選擇及預(yù)后評(píng)估中扮演著越來(lái)越關(guān)鍵的角色。圖1.正常細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞DNA甲基化的狀態(tài)DNA甲基化是一種DNA的共價(jià)修飾，具體是指DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNAmethyltransferases，DNMTs）將甲基加到DNACpG序列中胞嘧啶的5'碳位，形成5?甲基胞嘧啶的過(guò)程。成簇的Cp

CD分子流式抗體選購(gòu)指南2024/07/09: CD分子，即白細(xì)胞分化抗原，也稱分化簇（ClusterofDifferentiation），廣泛分布于各種免疫細(xì)胞表面，如B細(xì)胞、T細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和NK細(xì)胞等，是不同譜系的白細(xì)胞在正常分化成熟的不同階段及活化過(guò)程中，出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)記。監(jiān)測(cè)不同CD抗原的表達(dá)譜使得基于細(xì)胞在不同免疫過(guò)程中的功能的細(xì)胞類(lèi)型鑒定、分離和表型分型成為可能。表1.免疫分型的重要CD標(biāo)志物常見(jiàn)CD分子生物學(xué)功能CD3是一種20-26kDa的分子，表達(dá)于所有成熟的T淋巴細(xì)胞（約占正常人外周血淋巴細(xì)胞的60-80%）、

Sf9和桿狀病毒（AcNPV）殘留DNA檢測(cè)試劑盒，監(jiān)督表達(dá)系統(tǒng)雜質(zhì)殘留！2024/07/03: 背景介紹已知，生物技術(shù)藥物是指采用DNA重組技術(shù)或其他現(xiàn)代生物技術(shù)研制的蛋白質(zhì)或核酸類(lèi)藥物。而蛋白質(zhì)藥物又包含多肽、單克隆抗體、基因工程抗體和重組疫苗等。因此，如何表達(dá)生產(chǎn)穩(wěn)定性高、純度好、質(zhì)量均一的蛋白質(zhì)是這些蛋白藥物的關(guān)鍵。蛋白表達(dá)系統(tǒng)的選擇對(duì)于研發(fā)和生產(chǎn)高效蛋白質(zhì)產(chǎn)品就變得尤為重要了，不同的表達(dá)系統(tǒng)提供了多種途徑，以滿足對(duì)于表達(dá)水平、折疊狀態(tài)、純度和可溶性等方面的不同需求。目前常用的表達(dá)系統(tǒng)主要有：原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)兩大類(lèi)，而原核表達(dá)系統(tǒng)中較常用的是大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)和枯草芽孢桿菌表

為什么非要檢測(cè)rcAAV，rcAAV到底有什么風(fēng)險(xiǎn)？2024/07/03: 腺相關(guān)病毒AAV簡(jiǎn)介早期基因治療曾嘗試腺病毒載體，但因其免疫原性過(guò)強(qiáng)和導(dǎo)入的環(huán)狀DNA可能在細(xì)胞分裂中丟失而被AAV取代。AAV是一種無(wú)包膜單鏈DNA病毒，屬于細(xì)小病毒家族。AAV作為最早通過(guò)歐盟FDA認(rèn)證的基因治療載體，因其具有宿主范圍廣、非致病性、低免疫原性、長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)外源基因、良好的擴(kuò)散性能和物理性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛地應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)中。目前已發(fā)現(xiàn)AAV有12種亞型及120多種變型，并逐步用于基因藥物研發(fā)。rAAV攜帶的蛋白衣殼與野生型AAV幾乎相同，然而衣殼內(nèi)的基因組中編碼

新技術(shù)分享：PIP-seq，無(wú)需配套儀器的單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)！2024/06/26: 如火如荼的單細(xì)胞技術(shù)目前被大家廣為接受，而且單細(xì)胞技術(shù)除了在科研研究領(lǐng)域遍地開(kāi)花，也廣泛應(yīng)用于抗體發(fā)現(xiàn)、藥物評(píng)價(jià)、用藥靶向指導(dǎo)等領(lǐng)域?，F(xiàn)階段，單細(xì)胞測(cè)序方法普遍需要依賴于微孔板裝置、微流體裝置或流體處理。而且微流控、微孔板等裝置價(jià)格不菲，成為單細(xì)胞技術(shù)研究的一大壁壘。2023年3月6日，NatureBiotechnology上發(fā)表了一篇關(guān)于PIP-seq（Particle-templatedinstantpartitionsequencing）的文章——ClarkIC,FontanezKM,Me

PCR數(shù)據(jù)處理秘籍：干貨滿滿，看完還想再來(lái)一篇！2024/06/26: 通常我們做完熒光定量PCR后，會(huì)通過(guò)下機(jī)數(shù)據(jù)來(lái)分析基因表達(dá)情況。這篇干貨將會(huì)給大家詳細(xì)分享熒光定量PCR數(shù)據(jù)處理方法，希望能給小伙伴們一定的幫助。相對(duì)定量法中常見(jiàn)的是比較Ct法，其中主要包括△△Ct法，Pfaffl法和△CT法，目前諸多科研人員采用最多的是△△Ct法。雖然該方法應(yīng)用廣泛，但是很多人卻不了解其中的原理。知其然，知其所以然。小翌接下來(lái)給小伙伴們講一下△△Ct法的原理?！鳌鰿t法原理Ct值：每個(gè)反應(yīng)管中熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時(shí)所需要的循環(huán)數(shù)。起始模板拷貝數(shù)越多，Ct值則越小。理論條

扒一扒！無(wú)血清培養(yǎng)添加物-常見(jiàn)細(xì)胞因子2024/06/26: 01無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入血清，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活。而血清，尤其是牛血清，成分復(fù)雜、批間差大和存在病原體污染的可能性，不確定的動(dòng)物源性對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)會(huì)帶來(lái)顯著的外源物質(zhì)污染風(fēng)險(xiǎn)，因此科研人員對(duì)無(wú)血清培養(yǎng)基的需求日益增加，目前無(wú)血清培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于疫苗生產(chǎn)、單抗、活性蛋白等生物制品和細(xì)胞治療等的領(lǐng)域中。無(wú)血清培養(yǎng)基中不含血清，為能夠?qū)崿F(xiàn)與含血清培養(yǎng)基相似的維持和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的功能，其中必須添加白蛋白(Albumin)、胰島素(Insulin)和轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)

干貨 | 基因編輯探秘系列之在細(xì)胞與基因治療領(lǐng)域的應(yīng)用2024/06/26: 2023年11月16日，VertexPharmaceuticals和CRISPRTherapeutics共同宣布基因編輯療法產(chǎn)品CASGEVY™（Exagaglogeneautotemcel）獲英國(guó)藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)MHRA有條件批準(zhǔn)上市，用于治療治療鐮狀細(xì)胞?。⊿CD）和輸血依賴性β-地中海貧血（TDT），是獲批上市的CRISPR基因編輯藥物，12月8日，美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）也批準(zhǔn)了該基因編輯治療藥物。這是基因編輯治療里程碑事件，代表著一項(xiàng)重大的科學(xué)進(jìn)步可以讓數(shù)以萬(wàn)計(jì)的患者受益。圖1.CA

告別黑膠蟲(chóng)污染——黑膠蟲(chóng)清除劑2024/06/26: 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，“黑膠蟲(chóng)”污染常常成為一大難題，“黑膠蟲(chóng)”及其分解的復(fù)合物是一種細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)常見(jiàn)的細(xì)胞污染物。它在普通倒置顯微鏡的低倍鏡下呈現(xiàn)點(diǎn)狀或碎片狀的黑色顆粒，在高倍鏡下可看到這些黑色顆粒進(jìn)行原地振動(dòng)（類(lèi)似布朗運(yùn)動(dòng)）。想要告別黑膠蟲(chóng)污染，首先需要準(zhǔn)確識(shí)別污染類(lèi)型。一旦確認(rèn)為黑膠蟲(chóng)污染，便可以采取相應(yīng)的措施，使用黑膠蟲(chóng)清除劑（60725ES）來(lái)解決問(wèn)題。01判斷黑膠蟲(chóng)污染的方法01培養(yǎng)基不渾濁，但在顯微鏡下觀察細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞周?chē)团囵B(yǎng)液中有很多小黑點(diǎn)，且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)小黑點(diǎn)逐漸增多，更

干貨 | TadA脫氨酶：開(kāi)啟m6A檢測(cè)的新篇章2024/06/14: N6-甲基腺苷（m6A）是高等真核生物信使RNA（mRNA）內(nèi)部豐富的修飾，與人類(lèi)的發(fā)育，免疫，腫瘤生成和轉(zhuǎn)移，干細(xì)胞更新，脂肪分化等過(guò)程息息相關(guān)，目前m6A甲基化修飾已成為科研中一個(gè)重要且熱門(mén)的研究方向，因此，開(kāi)發(fā)m6A甲基化的檢測(cè)方法也尤為重要。甲基化RNA免疫共沉淀高通量測(cè)序(MeRIP-seq/m6A-seq)是目前研究m6A甲基化修飾使用廣泛的技術(shù)之一。該技術(shù)利用特異性識(shí)別m6A甲基化修飾的抗體，對(duì)細(xì)胞內(nèi)具有m6A甲基化修飾的RNA片段進(jìn)行免疫共沉淀。然后，對(duì)沉淀下來(lái)的RNA片段進(jìn)行高

革新之作！高效多功能，新一代無(wú)血清添加劑（NSC-27/N-2）來(lái)了！2024/06/14: B27和N-2都屬于無(wú)血清添加劑，其中B27(以下稱NSC-27)是由南伊利諾伊大學(xué)醫(yī)學(xué)院GregoryBrewer博士等人【1】于1993年優(yōu)化其早期無(wú)血清培養(yǎng)基配方而得【2】，NSC-27是一種專門(mén)用于神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)的補(bǔ)充添加劑，常與Neurobasal培養(yǎng)基或Neurobasal-A培養(yǎng)基配合使用，以便在無(wú)血清條件下支持神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)。NSC-27添加劑包含了細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的各種生長(zhǎng)因子、激素、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、維生素和礦物質(zhì)等成分，這些成分有助于模擬體內(nèi)環(huán)境，促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的存活、分化和功能表達(dá)

上新 | 想要?jiǎng)游锝M織/細(xì)胞RNA提取又快又好？看這里！2024/06/13: 表1.RNA的結(jié)構(gòu)和功能時(shí)間樣本類(lèi)型濃度（ng/µl）濃度均值（ng/µl）260/280260/230對(duì)照（常溫）鼠肝301.26307.392.011.97313.522.011.97鼠腎284.60294.542.012.14304.472.012.0950℃熱加速14天鼠肝346.60328.712.011.95310.812.011.97鼠腎293.46294.302.002.09295.132.001.99RNA研究的第一步為RNA提取，高質(zhì)量的RNA是進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、RT-PCR等

上新 | 操作簡(jiǎn)單、快速準(zhǔn)確！腺相關(guān)病毒(AAV)定量檢測(cè)試劑盒強(qiáng)勢(shì)登場(chǎng)！2024/06/12: 基因治療作為一種新興療法，是向靶細(xì)胞引入正常有功能的基因，以糾正或補(bǔ)償致病基因所產(chǎn)生的缺陷，從而達(dá)到治療疾病的目的。目前大多數(shù)基因治療應(yīng)用的仍是病毒載體，這些病毒載體經(jīng)過(guò)改造后，已經(jīng)不具有致病性。廣泛應(yīng)用的病毒載體包括腺病毒載體（ADV）、慢病毒載體（LV）、單純皰疹病毒載體（HSV）、痘病毒載體（PV）及腺相關(guān)病毒載體（AAV）。作為遞送基因療法的有力工具，AAV是目前在研基因療法項(xiàng)目中應(yīng)用最為廣泛的病毒載體。以AAV載體為代表的基因治療藥物能修正遺傳病患者的基因缺陷，給一些遺傳性罕見(jiàn)病、神經(jīng)

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