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初級(jí)會(huì)員 | 第13年
核酸提取與純化整體解決方案2022/02/11
核酸提取與純化整體解決方案核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,是生命最基本的物質(zhì)之一。核酸存在于所有動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞、微生物內(nèi)。生物體內(nèi)的核酸常與蛋白質(zhì)結(jié)合形成核蛋白。核酸主要包括RNA(核糖核酸)和DNA(脫氧核糖核酸)。核酸提取的原則首先保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性,其次要排除其它分子的污染。核酸提取大致分為3大部分:破碎、提取、純化。核酸提取是其中很重要的一個(gè)環(huán)節(jié),核酸模板的質(zhì)量很大程度上決定了下游PCR檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。在目前的分子診斷實(shí)驗(yàn)室當(dāng)中,磁珠法提取和硅膠膜離心柱法提取是的
中科院植生所李來(lái)庚組揭示樹(shù)木干細(xì)胞分裂的 陰陽(yáng)平衡調(diào)控機(jī)制2022/02/11
中科院植生所李來(lái)庚組揭示樹(shù)木干細(xì)胞分裂的陰陽(yáng)平衡調(diào)控機(jī)制與人類(lèi)相比,樹(shù)木可以存活成百上千年,這一切都依賴于植物干細(xì)胞不斷地分裂和分化,頂端干細(xì)胞讓樹(shù)木長(zhǎng)得越來(lái)越高,形成層干細(xì)胞(位于樹(shù)皮和樹(shù)干中間)讓樹(shù)木長(zhǎng)得越來(lái)越粗。樹(shù)木的生長(zhǎng)隨著季節(jié)、光照、溫度、水分、土壤養(yǎng)分的變化而變化,就這樣,樹(shù)木用年輪記錄了自己一年又一年地成長(zhǎng)。一直以來(lái),人們對(duì)樹(shù)木形成層干細(xì)胞的分裂好奇不已。樹(shù)木的形成層究竟如何維持活性?樹(shù)木又是如何適應(yīng)不同的環(huán)境變化來(lái)進(jìn)行自我調(diào)節(jié)?一直不得其解。2019年6月14日,PlantBio
標(biāo)簽蛋白純化系列—快速選擇的純化樹(shù)脂2022/02/11
標(biāo)簽蛋白純化系列——快速選擇的純化樹(shù)脂背景描述:對(duì)目的蛋白的功能、結(jié)構(gòu)和相互作用研究時(shí),常常會(huì)用到蛋白純化介質(zhì)。Yeasen為您提供多種優(yōu)良的親和層析介質(zhì),可批量或利用重力進(jìn)行純化,可以、便捷、可靠地從您的樣品中分離蛋白和抗體,為下游應(yīng)用提供良好保證。表1蛋白純化產(chǎn)品性能及應(yīng)用名稱性能(/mL填料)粒徑(µm)應(yīng)用NiNTABeads40mg6XHis-taggedprotein45-165用于His標(biāo)簽蛋白的純化,其配體為穩(wěn)定的四配位結(jié)構(gòu),該產(chǎn)品可以耐受比較苛刻的化學(xué)試劑,因此,該產(chǎn)品具有較廣
蛋白酶磷酸酶抑制劑2022/02/11
蛋白酶磷酸酶抑制劑=為何清除蛋白中的磷酸酶及蛋白酶?細(xì)胞中蛋白的磷酸化和去磷酸化是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡等許多重要的生物學(xué)活動(dòng)的調(diào)控開(kāi)關(guān)。因此在蛋白研究過(guò)程中,對(duì)磷酸酶作用的控制具有重要的生理意義。組織和細(xì)胞中充斥著大量的酶原,經(jīng)裂解后釋放到體外的酶原被充分激活從而開(kāi)始消化周?chē)牡鞍?。因此,在研究蛋白磷酸化途徑和信?hào)通路的過(guò)程中保護(hù)蛋白磷酸化狀態(tài)是極其關(guān)鍵的。同樣,細(xì)胞裂解后的蛋白粗提物中含有大量的內(nèi)源性蛋白酶,這些酶可以降解細(xì)胞提取物中的蛋白。因此為了防止蛋白純化過(guò)程中目的蛋白
Hieff NGS Fast Tagment DNA Library Prep Kit2022/02/11
HieffNGS®FastTagmentDNALibraryPrepKit——快速型DNA建庫(kù)試劑盒產(chǎn)品描述HieffNGS®FastTagmentDNALibraryPrepKitforIllumina®是針對(duì)lllumina®高通量測(cè)序平臺(tái)專(zhuān)業(yè)開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)座酶法建庫(kù)試劑盒。適用于1ng/50ng的基因組DNA、cDNA、擴(kuò)增子(500bp)等樣本的建庫(kù)。與常規(guī)分步法建庫(kù)相比,僅需10min即可完成DNA///片段化、末端修復(fù)和接頭連接過(guò)程,顯著縮短建庫(kù)時(shí)間,并獲得優(yōu)異的測(cè)序質(zhì)量。產(chǎn)品原理在T
得不到陽(yáng)性克隆?可能是忽視了這些細(xì)節(jié)2022/02/11
得不到陽(yáng)性克?。靠赡苁呛鲆暳诉@些細(xì)節(jié)……過(guò)去,提起“分子克隆”或“載體構(gòu)建”這兩個(gè)詞,大家可能想到的是傳統(tǒng)“酶切酶連法”,即用限制性內(nèi)切酶產(chǎn)生黏性末端,通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì),連接兩個(gè)片段的克隆方法。近年來(lái),“同源重組技術(shù)”逐漸受到科研人員的歡迎,如翊圣HieffClone®一步法快速克隆技術(shù)。相比之下,同源重組技術(shù)操作更加簡(jiǎn)單,不受到酶切位點(diǎn)的限制,可一次進(jìn)行多個(gè)片段的拼接,大大的提高了克隆效率。雖然同源重組技術(shù)操作簡(jiǎn)單,但畢竟實(shí)驗(yàn)過(guò)程是環(huán)環(huán)相扣的,一旦某個(gè)細(xì)節(jié)處理不好,都可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。為此,小
Hieff NGS Library Quantification Kit for Illumina2022/02/11
HieffNGS®LibraryQuantificationKitforIllumina®——千真萬(wàn)確,精益求精產(chǎn)品簡(jiǎn)介本產(chǎn)品是用于lllumina®平臺(tái)高通量測(cè)序文庫(kù)濃度定量的試劑盒,提供定量所需的DNA標(biāo)準(zhǔn)品、qPCRMasterMix、定量擴(kuò)增引物和參比染料ROX。其中,DNA標(biāo)準(zhǔn)品包含經(jīng)梯度稀釋的六份450bp的雙鏈DNA///片段溶液,濃度為20pM-0.0002pM;擴(kuò)增引物對(duì)根據(jù)NGS文庫(kù)接頭序列P5和P7設(shè)計(jì),可保證特異性擴(kuò)增雙端接頭完整的文庫(kù)分子;qPCRMasterMix是基
新品速遞---“一步法”建庫(kù)試劑盒2022/02/11
新品速遞---“一步法”建庫(kù)試劑盒-----HieffNGS®OnePotDNALibraryPrepKitforIllumina®?產(chǎn)品背景:DNA文庫(kù)的構(gòu)建是二代測(cè)序前期的核心環(huán)節(jié)。目前市面上推廣的建庫(kù)試劑盒主要有常規(guī)建庫(kù)試劑盒以及轉(zhuǎn)座酶法快速建庫(kù)試劑盒。常規(guī)試劑盒需要購(gòu)買(mǎi)單獨(dú)的片段化模塊或者采用機(jī)械法進(jìn)行片段化,機(jī)械法片段化對(duì)DNA分子有一定的損傷,影響文庫(kù)質(zhì)量。轉(zhuǎn)座酶法試劑盒都是針對(duì)特定InputDNA量的樣本進(jìn)行建庫(kù),并且存在一定的偏好性,影響測(cè)序質(zhì)量。HieffNGS®OnePotD
王紅艷/魏斌合作發(fā)現(xiàn)天然免疫細(xì)胞抗病毒新機(jī)制,為新型潛在藥物提供靶點(diǎn)2022/02/11
文獻(xiàn)分享|王紅艷/魏斌合作發(fā)現(xiàn)天然免疫細(xì)胞抗病毒新機(jī)制,為新型潛在藥物提供靶點(diǎn)病毒感染人體如同外星體入侵我們的家園地球,地球如何加強(qiáng)“防御”和“jun隊(duì)建設(shè)”來(lái)保護(hù)人類(lèi)的家園,一直是科學(xué)家和大眾關(guān)心的重要問(wèn)題。在病毒或細(xì)菌感染下,宿主細(xì)胞能通過(guò)多種有效途徑參與抗感染。其中,病毒感染能誘導(dǎo)宿主細(xì)胞改變膽固醇代謝酶和代謝產(chǎn)物的表達(dá),而膽固醇代謝也能調(diào)控宿主細(xì)胞抗病毒反應(yīng)。2019年12月24日,中國(guó)科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)創(chuàng)新中心(生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所,簡(jiǎn)稱“分子細(xì)胞中心”)王紅艷研究員團(tuán)隊(duì)與上海大
細(xì)胞污染全攻略(含防、治妙招)2022/02/11
細(xì)胞污染全攻略(含防、治妙招)我擦……細(xì)胞又污染了!咋整,快崩潰了?。hocanhelpme!??!君莫急,小翊來(lái)幫您!專(zhuān)治各種細(xì)胞疑難雜癥,小翊送你完整攻略。攻略一:了解細(xì)胞污染古人云:知己知彼方可百戰(zhàn)百勝,因此了解細(xì)胞污染是非常重要的。常見(jiàn)的污染類(lèi)型有細(xì)菌污染、真菌污染、支原體污染、原蟲(chóng)污染、黑膠蟲(chóng)污染、病毒污染以及非同種細(xì)胞污染。1、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡高倍鏡下大多可見(jiàn),根據(jù)感染細(xì)菌種類(lèi)不同,呈現(xiàn)不同的外形。其培養(yǎng)基一般會(huì)變渾濁、變黃較快,對(duì)細(xì)胞生狀態(tài)影響明顯。圖1:細(xì)胞受到細(xì)菌污染
雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果不理想?看這里!2022/02/11
雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果不理想?看這里!熒光素酶(luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的總稱,其中有代表性的是從甲蟲(chóng)中分離得到的螢火蟲(chóng)熒光素酶(Fireflyluciferase)和從海腎中分離得到的海腎熒光素酶(Renillaluciferase)。由于兩種酶底物和發(fā)光顏色的區(qū)別,且在動(dòng)物體內(nèi)無(wú)內(nèi)源性表達(dá),使其在雙報(bào)告實(shí)驗(yàn)中得到廣泛應(yīng)用。1.檢測(cè)原理螢火蟲(chóng)熒光素酶在氧氣、ATP和鎂離子同時(shí)存在的條件下,催化熒光素氧化,生成氧化熒光素,同時(shí)產(chǎn)生黃綠色光,波長(zhǎng)540-600nm,
mNGS | 宏基因組測(cè)序在病原檢測(cè)中的機(jī)遇與挑戰(zhàn)2022/02/11
近年來(lái),造成人類(lèi)感染的病原微生物日益復(fù)za,種類(lèi)增多,抗菌藥物濫用致使細(xì)菌耐藥,病原微生物已成為關(guān)注的焦點(diǎn)。據(jù)WHO統(tǒng)計(jì),在中國(guó),感染性疾病占所有疾病的50%以上,造血系統(tǒng)腫瘤患者、實(shí)體腫瘤患者和膿毒癥(嚴(yán)重感染)患者病死率均高達(dá)50%以上。面對(duì)重癥感染患者,能否快速確認(rèn)感染病原體,成為后續(xù)對(duì)癥治療的關(guān)鍵,基于宏基因組新一代測(cè)序技術(shù)(metagenomicsnext-generationsequencing,mNGS)為解決這一問(wèn)題提供了一個(gè)可能的突破方向。一、mNGS簡(jiǎn)述1.mNGS概述宏基因
如何利用NGS技術(shù)研究轉(zhuǎn)錄組2022/02/11
轉(zhuǎn)錄組(transcriptome)是指在某一特定的生理?xiàng)l件下,細(xì)胞、組織或生物體內(nèi)所有轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的集合,即轉(zhuǎn)錄出來(lái)的所有RNA總和,包括編碼RNA(即mRNA)和非編碼RNA(如tRNA、rRNA、miRNA、lncRNA、circRNA)等多種不同類(lèi)型的RNA分子。轉(zhuǎn)錄組學(xué)(transcriptomics)是一門(mén)從整體水平上研究轉(zhuǎn)錄組基因表達(dá)和轉(zhuǎn)錄調(diào)控的學(xué)科,包括研究基因表達(dá)水平變化、轉(zhuǎn)錄本的種類(lèi)、定位、注釋、可變剪接以及每個(gè)基因轉(zhuǎn)錄本在基因組中的結(jié)構(gòu)和功能研究等。相對(duì)于傳統(tǒng)的表達(dá)譜基因芯片技
磁珠深度解析,真的非AMPure XP不可嗎?2022/02/11
磁珠深度解析,真的非AMPureXP不可嗎?引文:基因測(cè)序越來(lái)越得到臨床的認(rèn)可,尤其是精準(zhǔn)醫(yī)療概念提出以后,更是備受青睞,為精準(zhǔn)治療解答很多未知的問(wèn)題。高通量測(cè)序技術(shù)的跨越式發(fā)展,使測(cè)序能力大幅上升,在整個(gè)NGS工作流程中,磁珠是*的產(chǎn)品。磁珠通過(guò)磁顆?;钚曰鶊F(tuán)在一定條件下可與核酸結(jié)合和解離的原理,將樣本中目的片段分離??蓪?shí)現(xiàn)對(duì)核酸樣本的高通量自動(dòng)化操作,廣泛應(yīng)用于基因測(cè)序以及分子診斷領(lǐng)域。一、磁珠簡(jiǎn)述1.背景介紹磁珠的發(fā)明構(gòu)想初來(lái)自于挪威科技大學(xué)的化學(xué)家JohnUgelstad。后期經(jīng)過(guò)不斷地
RNA文庫(kù)建的好,輕松完成轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析不是夢(mèng)2022/02/11
常規(guī)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-Seq)主要是在轉(zhuǎn)錄水平上對(duì)逆轉(zhuǎn)錄的cDNA進(jìn)行NGS測(cè)序,這樣可以全面快速地獲取某一物種在某一狀態(tài)下的幾乎所有轉(zhuǎn)錄本,包括mRNA和非編碼RNA。目前轉(zhuǎn)錄組測(cè)序主流的方法是芯片法和RNA-Seq法。RNA-Seq相較于芯片法優(yōu)勢(shì)明顯,如:不受物種限制通量高靈敏度高分辨率高同時(shí)能夠檢測(cè)未知基因,發(fā)現(xiàn)新的轉(zhuǎn)錄本并準(zhǔn)確地識(shí)別可變剪切位點(diǎn)及SNP、UTR區(qū)域等。此次疫情爆發(fā),溯源工作主要是依靠這種方法。圖1常規(guī)RNA-Seq建庫(kù)流程精品推薦mRNA建庫(kù)試劑盒(適用Illumin
測(cè)序數(shù)據(jù)不好?是不是建庫(kù)出了問(wèn)題?2022/02/11
測(cè)序數(shù)據(jù)不好?是不是建庫(kù)出了問(wèn)題?!——從測(cè)序數(shù)據(jù)看文庫(kù)構(gòu)建高通量測(cè)序中的文庫(kù)構(gòu)建指的是在DNA兩端連接特定的接頭從而使其符合測(cè)序平臺(tái)要求的過(guò)程,在高通量測(cè)序過(guò)程中,文庫(kù)質(zhì)量直接影響終測(cè)序數(shù)據(jù)的質(zhì)量,打個(gè)比方,如果文庫(kù)上機(jī)測(cè)序的濃度很低,樣本在FlowCell上擴(kuò)增所形成的DNA樣本簇就會(huì)很少,測(cè)序數(shù)據(jù)量也將減少,這就可能導(dǎo)致測(cè)序失敗,所以我們說(shuō)文庫(kù)的質(zhì)量控制和質(zhì)量評(píng)估也是NGS中的關(guān)鍵步驟。文庫(kù)如何質(zhì)控?評(píng)估文庫(kù)質(zhì)量的方法有哪些?文庫(kù)質(zhì)控:文庫(kù)在上機(jī)之前都有會(huì)進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè),質(zhì)量檢測(cè)合格的文庫(kù)才
dsDNA HS Assay Kit for Qubit®2022/02/11
dsDNAHSAssayKitforQubit®——給我5min,還你一個(gè)準(zhǔn)確定量結(jié)果1產(chǎn)品概述dsDNAAssayKitforQubit®是Yeasen生物開(kāi)發(fā)的專(zhuān)門(mén)用于Qubit®熒光儀或熒光酶標(biāo)儀的試劑盒,線性范圍0.2-100ng,即使在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下,也可以選擇性的檢測(cè)dsDNA,且耐受較高濃度的蛋白質(zhì)、鹽類(lèi)、洗滌劑等污染物。2產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)1)操作簡(jiǎn)便——5min之內(nèi)出結(jié)果2)高選擇性——對(duì)dsDNA具有高度選擇性,不定量RNA和ssDNA。圖dsDNAAssa
4h完成mRNA建庫(kù)是一種怎樣的體驗(yàn)?2022/02/11
mRNA-seq不僅可以提供準(zhǔn)確且*靈敏度的量化基因表達(dá),還可以識(shí)別已知的和新的轉(zhuǎn)錄異構(gòu)體、基因融合和其他特征及等位基因特異性表達(dá)。當(dāng)前已迅速成為分析疾病狀況,生物過(guò)程以及轉(zhuǎn)錄組分析的首xuan方法。而文庫(kù)制備是mRNA-seq的關(guān)鍵因素,直接影響測(cè)序質(zhì)量。翊圣生物根據(jù)市場(chǎng)需求,集中專(zhuān)業(yè)研發(fā)人員致力于mRNA建庫(kù)試劑盒的創(chuàng)新研發(fā),重磅推出HieffNGS®MaxUpⅡDual-modemRNA建庫(kù)試劑盒。產(chǎn)品簡(jiǎn)介HieffNGS®MaxUpⅡDual-modemRNALibraryPrepKit
GoldBand 3-color Protein Marker2022/02/11
GoldBand3-colorRegularRangeProteinMarker——全程示蹤,一眼鎖定YEASEN蛋白marker,采用超純且已校準(zhǔn)的蛋白作為標(biāo)準(zhǔn),可直接上樣。分子范圍高達(dá)10-245kDa,條帶濃度高達(dá)0.1-0.4mg/mL,具有靚麗清晰的條帶和寬泛的條帶范圍,可在PAGE、WesternBlotting等蛋白實(shí)驗(yàn)中全程監(jiān)測(cè)電泳進(jìn)程、評(píng)估轉(zhuǎn)印效率、可靠定位您的目的蛋白!產(chǎn)品特點(diǎn)用量更少:3-5μL顏色豐富:三色預(yù)染使用方便:直接上樣品質(zhì)穩(wěn)定:保質(zhì)期兩年條帶廣泛:條帶多,范圍廣
MaxUpII DNA Library Prep Kit for Illumina2022/02/11
MaxUpIIDNALibraryPrepKitforIllumina®——建庫(kù)試劑盒中的王1、產(chǎn)品概述HieffNGS®MaxUpIIDNALibraryPrepKitforIllumina®,可用于NGS測(cè)序中DNA樣本文庫(kù)構(gòu)建,采用高質(zhì)量的酶學(xué)組成,改進(jìn)型接頭連接技術(shù),以及具有強(qiáng)擴(kuò)增效率的高保真酶,顯著提高文庫(kù)轉(zhuǎn)化率與擴(kuò)增效率,InputDNA范圍為500pg-1μg,適用包含cfDNA、FFPE在內(nèi)的所有樣本進(jìn)行文庫(kù)構(gòu)建,產(chǎn)品可以應(yīng)用于全基因組測(cè)序、靶向捕獲測(cè)序、Chip-seq等測(cè)序方
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