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單克隆制備的基本原理2014/12/02
單克隆制備的基本原理一、單克隆抗體的概念抗體(antibody)是機(jī)體在抗原刺激下產(chǎn)生的能與該抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。常規(guī)的抗體制備是通過(guò)動(dòng)物免疫并采集抗血清的方法產(chǎn)生的,因而抗血清通常含有針對(duì)其他無(wú)關(guān)抗原的抗體和血清中其他蛋白質(zhì)成分。一般的抗原分子大多含有多個(gè)不同的抗原決定簇,所以常規(guī)抗體也是針對(duì)多個(gè)不同抗原決定簇抗體的混合物。即使是針對(duì)同一抗原決定簇的常規(guī)血清抗體,仍是由不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的異質(zhì)的抗體組成。因而,常規(guī)血清抗體又稱多克隆抗體(polyclonalantibody),簡(jiǎn)稱多抗
抗體芯片技術(shù)2014/12/02
抗體芯片技術(shù)蛋白質(zhì)是一切生命活動(dòng)的基礎(chǔ),受基因表達(dá)的調(diào)控,因而以檢測(cè)樣品中的mRNA為基礎(chǔ)的cDNA芯片是當(dāng)今研究中倍受關(guān)注的研究手段。但是,由于存在著轉(zhuǎn)錄后加工、翻譯調(diào)控以及翻譯后加工等多種調(diào)節(jié)機(jī)制,基因的表達(dá),或者說(shuō)mRNA的水平并不必然代表蛋白質(zhì)產(chǎn)物的水平。因此,以微陣列技術(shù)對(duì)生物樣品作整體蛋白質(zhì)表達(dá)分析的蛋白芯片在后基因組時(shí)代越來(lái)越受重視??贵w芯片(AntibodyMicroarray,抗體微陣列),是蛋白質(zhì)芯片的一種,是檢測(cè)生物樣品中蛋白表達(dá)模式的新方法。這種新技術(shù)使得研究人員可以在一
人凝血因子Ⅷ(FⅧ) ELISA 試劑盒說(shuō)明書2014/12/01
人凝血因子Ⅷ(FⅧ)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中凝血因子Ⅷ(FⅧ)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中人凝血因子Ⅷ(FⅧ)水平。用純化的人凝血因子Ⅷ(FⅧ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入凝血因子Ⅷ(FⅧ),再與HRP標(biāo)記的凝血因子Ⅷ(FⅧ)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終
抗體保存指南2014/12/01
抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。本指南以abcam抗體保存方法為主,同樣也可以應(yīng)用到其他絕大部分公司的抗體產(chǎn)品!請(qǐng)謹(jǐn)記!無(wú)論何時(shí)請(qǐng)按照說(shuō)明書推薦的保存條件正確保存抗體!1.收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在12000rpm離心20-30s后再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存!Abcam的抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管,只有在12000rpm離心20-30s才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來(lái)。即使是在10000rpm離心也會(huì)導(dǎo)致離心不*,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體
血清病2014/11/28
血清病是一種典型的Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)性疾病。機(jī)體對(duì)進(jìn)入體內(nèi)的異種血清各抗原成分或作為半抗原的某些藥物與體內(nèi)蛋白結(jié)合形成的抗原性復(fù)合蛋白,均可產(chǎn)生抗體。當(dāng)形成的抗體量略少于體內(nèi)尚消失的抗原時(shí),可形成沉積于血管壁上的免疫復(fù)合物,繼而激活補(bǔ)體系統(tǒng),生成血管性物質(zhì)、中性粒細(xì)胞趨化因子等,造成局部充血與水腫,中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)和溶酶體內(nèi)蛋白分解酶的釋放,導(dǎo)致組織的炎癥與損傷。構(gòu)成血清病免疫復(fù)合物的抗體球蛋白主要是IgG,但如IgE較多,則發(fā)病時(shí)血清通透性的增加更加明顯??捎泻眍^水腫、低血壓甚至過(guò)敏性休克等。凡抗原
人白細(xì)胞介素-8(IL-8)ELISA試劑盒說(shuō)明書2014/11/28
人白細(xì)胞介素-8(IL-8)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素8(IL-8)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白細(xì)胞介素-8(IL-8)水平。用純化的人白細(xì)胞介素-8(IL-8)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素-8(IL-8),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并
人程序性死亡分子-1(PD-1)ELISA試劑盒說(shuō)明書2014/11/28
人程序性死亡分子-1(PD-1)ELISA試劑盒說(shuō)明書檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人程序性死亡分子-1(PD-1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人程序性死亡分子-1(PD-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用
世界抗體公司介紹2014/11/27
Santa公司是世界上zui大的抗體生產(chǎn)廠家,目前可提供的抗體種類多達(dá)兩萬(wàn)多種,幾乎覆蓋了目前生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域,其每種抗體又有多個(gè)克隆可以選擇,還提供一些對(duì)應(yīng)蛋白標(biāo)準(zhǔn)品及相關(guān)產(chǎn)品,如ABC試劑盒,各種標(biāo)記二抗,Western試劑盒,蛋白分子量Marker,核抽提物等,為免疫學(xué)研究工作提供了極大的方便。Abcam公司是世界有名的抗體王國(guó),以、齊全的產(chǎn)品、完善的網(wǎng)絡(luò)支持功能和強(qiáng)大的隊(duì)伍得到客戶的認(rèn)可和贊譽(yù)。并在2004年獲得了對(duì)于生物界公司的英女王獎(jiǎng),擁有很好的度和口碑。產(chǎn)品具有以下特點(diǎn):1、
如何選擇抗體(試劑銷售)2014/11/27
如何選擇抗體(上海試劑銷售科技有限公司)檢測(cè)任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,同時(shí)在后繼試驗(yàn)中也會(huì)有不同的檢測(cè)方案,因此在選擇二抗的時(shí)候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測(cè)方案的要求,其中如何根據(jù)一抗的種屬來(lái)源和類型選擇二抗尤為重要。1.一抗的種屬來(lái)源:二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來(lái)源,例如:如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是從兔血清里制備的兔源多克隆抗體,則相應(yīng)的二抗需要選擇抗兔的二抗。即根據(jù)一抗的物種來(lái)源選擇相應(yīng)的抗該物種的
人17-酮類固醇(17-KS) ELISA試劑盒說(shuō)明書2014/11/26
人17-酮類固醇(17-KS)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中17-酮類固醇(17-KS)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人17-酮類固醇(17-KS)水平。用純化的人17-酮類固醇(17-KS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入17-酮類固醇(17-KS),再與HRP標(biāo)記的17-酮類固醇(17-KS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TM
血清離子常規(guī)2014/11/25
1.血清鎂(Mg):化驗(yàn)介紹:鎂是人體必需的元素,與機(jī)體的糖、脂肪和核酸代謝有密切的關(guān)系。人體所需要的鎂來(lái)源于食物,由小腸吸收,腎臟排出。腎臟能夠有效的保留鎂,當(dāng)體內(nèi)的鎂缺少時(shí),腎的排鎂量極少。參考值:達(dá)旦黃法:成人1.7-2.8mg/dL兒童1.4-1.9mg/dL甲基溴麝香草酚藍(lán)比色法:1.64-2.52mg/dL臨床意義:血清鎂增高:見于急慢性腎功能衰竭、甲狀腺機(jī)能減退、甲狀旁腺機(jī)能減退、阿狄森氏病、多發(fā)性骨髓瘤和嚴(yán)重脫水等。血清鎂降低:見于鎂的來(lái)源不足,如長(zhǎng)期禁食、嘔吐、腹瀉、消化不良等
血清保存注意事項(xiàng)2014/11/25
血清保存注意事項(xiàng)(1)需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱,必須預(yù)留定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?(2)一般廠商提供的血清無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清.(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿
人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒說(shuō)明書2014/11/24
人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒說(shuō)明書預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體中C-Peptide含量。人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法測(cè)定標(biāo)本中C-Peptide水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入C-Peptide抗原、生物素化的抗人C-Peptide抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化
人血小板裂解液替代胎牛血清大規(guī)模擴(kuò)增人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞2014/11/21
人血小板裂解液替代胎牛血清大規(guī)模擴(kuò)增人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞上海試劑銷售實(shí)驗(yàn)室摘要背景:目前國(guó)內(nèi)外大多數(shù)實(shí)驗(yàn)仍采用經(jīng)典的培養(yǎng)基和胎牛血清進(jìn)行臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng),血清培養(yǎng)潛在的不安全因素限制了未來(lái)臨床應(yīng)用的可行性。目的:以人血小板裂解液替代胎牛血清培養(yǎng)、鑒定人間充質(zhì)干細(xì)胞,以期進(jìn)一步應(yīng)用于臨床低密度擴(kuò)增人間充質(zhì)干細(xì)胞。方法:人血小板裂解液通過(guò)反復(fù)凍融、離心、過(guò)濾、濃縮等方法制備。以IMDM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加5%濃縮血小板裂解液作為實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基;以添加體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清為對(duì)照組培養(yǎng)基。采用酶消化法分
細(xì)胞株與細(xì)胞系的區(qū)別2014/11/21
細(xì)胞株與細(xì)胞系的區(qū)別傳代培養(yǎng)的細(xì)胞是細(xì)胞系中學(xué)就到這個(gè)地步吧細(xì)胞株就是從細(xì)胞系篩選出來(lái)的有特殊屬性的比如無(wú)線增值的一、體外培養(yǎng)細(xì)胞的種類和命名體外培養(yǎng)細(xì)胞的名稱,隨培養(yǎng)細(xì)胞技術(shù)的發(fā)展和細(xì)胞種類的增多而演變。zui早采用的名稱為細(xì)胞株(Cellstrain),以后又出現(xiàn)細(xì)胞系(CellLine)一詞,兩者曾一度混用致概念不明確,導(dǎo)致文獻(xiàn)中也很混亂。我國(guó)也曾有類似情況,在我國(guó)尚未制定出統(tǒng)一名詞前,本書用的名詞基本參考Schaeffer,W.I.(1979)和國(guó)內(nèi)有關(guān)會(huì)議、以及國(guó)內(nèi)外雜志常用名詞為準(zhǔn)。
血清——天然培養(yǎng)基2014/11/20
天然培養(yǎng)基是指來(lái)自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術(shù)建立早期,體外培養(yǎng)細(xì)胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。目前廣泛使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是*。血清種類,目前用于組織培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養(yǎng)細(xì)胞的原因:來(lái)源充足、制備技術(shù)成熟、經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的應(yīng)用考驗(yàn)人們對(duì)其有比較深入的理
血漿與血清的區(qū)別2014/11/20
血漿與血清的區(qū)別血清血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過(guò)程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無(wú)纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參
血清素2014/11/19
血清素重吸收抑制劑就是5-羥色胺重吸收抑制劑,簡(jiǎn)稱SSRIs,百憂解(鹽酸氟西汀)的實(shí)質(zhì),是新一類的效果好而副作用較小的抗抑郁藥物。是體內(nèi)產(chǎn)生的一種神經(jīng)傳遞素;不存在于食物中。但有著作表明有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可參與合成血清素,這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括色氨酸(一種氨基酸),Ω-3脂肪酸,鎂和鋅。血清素是調(diào)節(jié)神經(jīng)活動(dòng)的一種重要物質(zhì)。有些肌體組織當(dāng)受到某些藥物作用時(shí),可以釋放出5-羥色胺,例如一個(gè)利血平分子可以使受作用的組織釋放出幾百個(gè)5-羥色胺分子,因而產(chǎn)生利血平的一系列生理作用。作為自體活性物質(zhì),約90%合成和分布
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)2014/11/19
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)培養(yǎng)室內(nèi)的無(wú)菌操作細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)所需的物品、器材應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌或購(gòu)買無(wú)菌的一次性物品。玻璃瓶可擰松瓶蓋滅菌(指高壓蒸汽滅菌,以下同)或用鋁箔紙包住瓶口,和瓶蓋分別滅菌。其它玻璃和金屬器材用鋁箔紙包裹進(jìn)行滅菌。玻璃吸管應(yīng)塞上棉花球滅菌,然后置于烘箱中烘干。不適于進(jìn)行高壓滅菌的瓶塞等其它物品,可浸泡在70%酒精中進(jìn)行滅菌,然后在超凈工作臺(tái)上吹干。細(xì)胞培養(yǎng)液和其它不適于高壓滅菌的溶液,應(yīng)通過(guò)過(guò)濾(采用0.22μm的孔徑的濾膜)滅菌。無(wú)菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖地面一次,并用
大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒說(shuō)明書2014/11/18
大鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,組織及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白M(IgM)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠免疫球蛋白M(IgM)水平。用純化的抗-大鼠IgM抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠免疫球蛋白M(IgM),再與HRP標(biāo)記的羊抗鼠抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成
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