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物理學(xué)方法建立的慢性腎功能衰竭模型2018/04/04: 1.腎大部分切除法(1)復(fù)制方法體重250g左右成年大鼠，經(jīng)腹腔按30mg/kg體重的劑量注射戊巴比妥鈉麻醉，麻醉后大鼠行仰臥固定，腹部備皮、消毒，沿左腹旁切口切開(kāi)皮膚，暴露左側(cè)腎臟，切開(kāi)上、下極的包膜，上下極分別切除腎臟的1/3，用明膠海綿壓迫創(chuàng)面止血，生理鹽水沖洗，常規(guī)手術(shù)縫合肌層和皮膚，關(guān)閉腹腔。一周后，大鼠用同樣方法麻醉后仰臥固定，沿右腹旁切口切開(kāi)皮膚，暴露右側(cè)腎臟，結(jié)扎腎蒂后，切除右腎，常規(guī)手術(shù)縫合切口，關(guān)閉腹腔。造模前后將模型大鼠置于代謝籠收集24h尿液，測(cè)定24h蛋白定量；按實(shí)驗(yàn)預(yù)

外傷性白內(nèi)障模型2018/03/09: (1)復(fù)制方法3～4個(gè)月齡健康青紫藍(lán)兔，先用0.5％阿托品滴眼液滴眼2次及復(fù)方托品酞胺滴眼液滴眼3次，30min后經(jīng)肌肉注射氯丨胺丨酮及異丙嗪進(jìn)行麻醉，并以0.5％地卡因滴于結(jié)膜囊局部麻醉。在手術(shù)顯微鏡下用一次性1ml注射器在角膜偏中央部位刺穿角膜，并用針頭將晶狀體前囊劃開(kāi)約1mm×1.5mm呈橢圓形小口，再用針頭深達(dá)晶狀體中央沿前囊創(chuàng)口長(zhǎng)軸方向劃開(kāi)數(shù)次。術(shù)畢結(jié)膜囊涂抹抗生素眼膏。術(shù)后每日用裂隙燈顯微鏡檢查術(shù)眼晶狀體情況。(2)模型特點(diǎn)術(shù)后2周時(shí)模型動(dòng)物術(shù)眼即可形成外傷性白內(nèi)障，其晶狀體渾濁，渾

鈍挫傷白內(nèi)障模型2018/03/09: (1)復(fù)制方法4周齡的雌性大鼠，散瞳后裂隙燈檢查，排除角膜病、葡萄膜疾病、晶狀體及玻璃體疾病。按3ml/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射10％水合氯醛溶液致全身麻醉，動(dòng)物規(guī)定于操作臺(tái)后，用20g小球從20cm高度落下打擊大鼠的左眼，每周1次，每次100下，進(jìn)行數(shù)周。(2)模型特點(diǎn)第1次打擊3d后，大鼠實(shí)驗(yàn)眼可見(jiàn)晶狀體前囊出現(xiàn)散在點(diǎn)狀及片狀混濁，中央瞳孔區(qū)環(huán)狀混濁。第6日時(shí)晶狀體前囊散在片狀混濁已消失，而晶狀體前囊近中央瞳孔區(qū)環(huán)狀及樹(shù)枝狀混濁則無(wú)明顯改變。反復(fù)打擊(第2～5次)，晶狀體前囊反復(fù)出現(xiàn)散在點(diǎn)狀

硒性白內(nèi)障模型2018/03/09: (1)復(fù)制方法取體重為25g左右出生12d齡幼年大鼠，按0.26ml/kg體重的劑量經(jīng)大鼠腹腔注射0.1％亞丨硒丨酸丨鈉溶液，一次注射即可使大鼠發(fā)生白內(nèi)障。(2)模型特點(diǎn)動(dòng)物造型后5d其晶狀體核即混濁，至30d時(shí)模型動(dòng)物晶狀體核仍混濁。模型動(dòng)物一次性腹腔注射0.1％亞丨硒丨酸丨鈉溶液3～5d，即可迅速造成嚴(yán)重的核性白內(nèi)障，采取本方法復(fù)制的模型比糖性白內(nèi)障動(dòng)物模型形成的速度(1～2個(gè)月)要快得多，本模型復(fù)制方法簡(jiǎn)單，耗費(fèi)低廉，重復(fù)性好。(3)比較醫(yī)學(xué)長(zhǎng)期缺硒的兔晶體和肝臟中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性分

藥物安全藥理試驗(yàn)設(shè)計(jì)要求2018/02/02: 1.生物材料生物材料有以下幾種：整體動(dòng)物，離體器官及組織，體外培養(yǎng)的細(xì)胞、細(xì)胞片段、細(xì)胞器、受體、離子通道和酶等。整體動(dòng)物常用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、犬、非人靈長(zhǎng)類等。動(dòng)物選擇應(yīng)與試驗(yàn)方法相匹配，同時(shí)還應(yīng)注意品系、性別及年齡等因素。生物材料選擇應(yīng)注意敏感性、重現(xiàn)性和可行性，以及與人的相關(guān)性等因素。體內(nèi)研究建議盡量采用清醒動(dòng)物。如果使用麻醉動(dòng)物，應(yīng)注意麻醉藥物的選擇和麻醉深度的控制。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)符合對(duì)相應(yīng)等級(jí)動(dòng)物的質(zhì)量規(guī)定要求，并具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證明。2.樣本量試驗(yàn)組的組數(shù)及每組動(dòng)物數(shù)的設(shè)定，應(yīng)

冰凍切片機(jī)使用步驟和注意事項(xiàng)2018/02/02: (1)按電源開(kāi)關(guān)I/O側(cè)的I(開(kāi))側(cè)，接通儀器電源。待儀器進(jìn)行短暫時(shí)間的初始化(屏幕上將顯示一個(gè)沙漏標(biāo)志)后，請(qǐng)檢查上方顯示屏是否亮起，是否顯示語(yǔ)言選擇菜單。(2)請(qǐng)檢查速凍臺(tái)、冷凍箱及其切片厚度是否為實(shí)驗(yàn)所需要的相74關(guān)數(shù)據(jù)，通常速凍臺(tái)為-35℃，冰凍箱為-20℃，切片厚度為6μm。如若不是，在屏幕上點(diǎn)擊要修改的事項(xiàng)，用或調(diào)節(jié)到需要的數(shù)據(jù)。調(diào)節(jié)好后，等待機(jī)器降到所調(diào)節(jié)的溫度。(3)將手輪手柄旋轉(zhuǎn)到12點(diǎn)鐘的位置，然后進(jìn)行制動(dòng)。將樣品利用冰凍膠固定在樣本托上，并放于速凍臺(tái)上降溫。10min后，將

小鼠生化位點(diǎn)檢測(cè)2018/02/02: 小鼠生化位點(diǎn)檢測(cè)乙酸纖維薄膜電泳是生物化學(xué)的方法，該技術(shù)運(yùn)用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳質(zhì)量控制只有二十余年的歷史。由于該方法能檢查近20對(duì)等位基因，涉及十幾條染色體，利于反映被檢品系的遺傳概貌，所以，目前認(rèn)為此法靈敏度高，準(zhǔn)確性強(qiáng)，檢出速度快，用樣量小，是遺傳檢測(cè)諸方法中較為理想的一種。一、實(shí)驗(yàn)器材1．樣品(1)血清：用于Es-1和Trf兩位點(diǎn)檢查。(2)溶血清：用于檢查Hbb、Car-2和Ldr-1位點(diǎn)。(3)腎勻漿：用于檢查Es-2、Es-3、Idh-1、Mod-1、Akp-1、Pgm-1、Pep-1、

免疫學(xué)檢測(cè)方法與免疫技術(shù)2018/02/02: 免疫學(xué)檢測(cè)方法與免疫技術(shù)免疫學(xué)檢驗(yàn)方法和免疫化學(xué)技術(shù)主要包括：抗原抗體的制備、純化和鑒定，免疫擴(kuò)散、免疫電泳、免疫凝集試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，免疫細(xì)胞分離、純化和鑒定，免疫功能檢測(cè)，細(xì)胞因子檢測(cè)，放射免疫檢測(cè)，免疫酶標(biāo)檢測(cè)，熒光和發(fā)光免疫技術(shù)，免疫組化實(shí)驗(yàn)方法，原位雜交免疫組化，免疫PCR技術(shù)，免疫微球的應(yīng)用，免疫電鏡技術(shù)，細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法，膜受體分析，胞內(nèi)鈣鎂濃度的測(cè)定和細(xì)胞間通訊，流氏細(xì)胞儀技術(shù)及應(yīng)用等。從上述內(nèi)容可以看出，免疫技術(shù)是免疫學(xué)和物理、化學(xué)及電子信息和分子生物學(xué)理論和技術(shù)的結(jié)合產(chǎn)物

構(gòu)建基于熒光多重cPCR的小鼠基因拷貝數(shù)檢測(cè)方法2018/02/02: 構(gòu)建基于熒光多重cPCR的小鼠基因拷貝數(shù)檢測(cè)方法目的：建立基于競(jìng)爭(zhēng)性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(competitivepolymerasechainreaction,cPCR)小鼠基因拷貝數(shù)變異(copynumbervariations,CNVs)的檢測(cè)方法,用于檢測(cè)野生小家鼠來(lái)源一號(hào)染色體替換系群體(populationofspecificchromosome1substitutionstrains,PCSSs)的CNVs。方法：選取小鼠一號(hào)染色體上11個(gè)CNVs位點(diǎn),及7、9和X染色體上各1個(gè)內(nèi)對(duì)照位點(diǎn)

ELISA：用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法2018/02/02: ELISA：用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌，下同)。2.加樣：加稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗

ELASA：用于檢測(cè)未知抗體的間接法2018/02/02: ELASA：用于檢測(cè)未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸

藥物安全藥理主要研究?jī)?nèi)容2018/01/25: 1.核心組合試驗(yàn)安全藥理學(xué)的核心組合試驗(yàn)的目的是研究受試物對(duì)重要生命功能的影響。中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)通常作為重要器官系統(tǒng)考慮，也就是核心組合試驗(yàn)要研究的內(nèi)容。根據(jù)科學(xué)合理的原則，在某些情況下，可增加或減少部分試驗(yàn)內(nèi)容，但應(yīng)說(shuō)明理由。1.1中樞神經(jīng)系統(tǒng)定性和定量評(píng)價(jià)給藥后動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)功能、行為改變、協(xié)調(diào)功能、感覺(jué)/運(yùn)動(dòng)反射和體溫的變化等，以確定藥物對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響。可進(jìn)行動(dòng)物的功能組合試驗(yàn)。1.2心血管系統(tǒng)測(cè)定給藥前后血壓（包括收縮壓、舒張壓和平均壓等）、心電圖（包括QT間期、PR

離心機(jī)的使用和管理2018/01/25: 離心機(jī)是實(shí)驗(yàn)室常用的基礎(chǔ)設(shè)備之一，主要用于各種生物樣品的分離。按轉(zhuǎn)速可分為低速、高速和超速離心機(jī)；按溫度可分為冷凍和常溫離心機(jī)。離心機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)速度快，要注意安全，特別要防止在離心機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)期間，因不平衡或試管墊老化，而使離心機(jī)邊工作邊移動(dòng)，以致從實(shí)驗(yàn)臺(tái)上掉下來(lái)，或因蓋子未蓋，離心管因振動(dòng)而破裂后，玻璃碎片旋轉(zhuǎn)飛出，造成事故。因此使用離心機(jī)時(shí)，注意以下操作：(1)離心機(jī)的安裝：根據(jù)離心機(jī)的性能選擇合適的地點(diǎn)放置，對(duì)一般低速離心機(jī)和小型高速離心機(jī)(臺(tái)式)可放在平穩(wěn)、堅(jiān)固的臺(tái)面上(它的底座應(yīng)裝有橡皮吸角)，水

用GEO腦補(bǔ)出來(lái)的外泌體2018/01/17: 閑得沒(méi)事時(shí)候，我就比較喜歡隨便吹吹牛。嗯，比如編一個(gè)外泌體的看看。嗯，是這樣的：外泌體加LncRNA應(yīng)該能算是有點(diǎn)意思了吧，反正我手上屁都沒(méi)有，所以我就用GEO挖挖看，看能挖出什么來(lái)：嗯，搜搜看LncRNA和外泌體的芯片，果然還是可以有點(diǎn)內(nèi)容的：這是個(gè)前列腺癌的外泌體芯片，就是它了。隨便分下組：可以挑一些外泌體中表達(dá)量高那種LncRNA：但是光靠這些，就能腦補(bǔ)出一篇點(diǎn)的么？應(yīng)該能吧，因?yàn)槲覀儸F(xiàn)在只有既然是外泌體里高表達(dá)的LncRNA，那會(huì)有靶細(xì)胞，這些LncRNA進(jìn)入靶細(xì)胞后起到作用，而常見(jiàn)的L

免疫組化分析簡(jiǎn)單介紹2017/12/07: 你想要免疫組化的片子能更快更準(zhǔn)確地識(shí)別么？你想要瞬間就把組畫(huà)里的陽(yáng)性評(píng)級(jí)都算好么？下面簡(jiǎn)單介紹下免疫組化簡(jiǎn)單分析。是有這么個(gè)小插件能用一下的，這個(gè)插件是在ImageJ里的一個(gè)小插件。這個(gè)插件叫IHCProfiler，下載完有這么倆文件，全部復(fù)制粘貼到ImageJ的Plugin文件夾里:先通過(guò)ImageJ打開(kāi)免疫組化的圖片：然后，從上面的Plugins的菜單里找到IHCProfiler：接著選擇細(xì)胞質(zhì)中的表達(dá)：然后選擇DAB染色：于是，顏色就直接分開(kāi)了：當(dāng)然，這不能做為直接的評(píng)分，接著就要用IHC

細(xì)胞增殖到底用MTT還是CCK8呢？2017/11/30: MTT增殖曲線，基本上就是基礎(chǔ)的功能實(shí)驗(yàn)了，養(yǎng)過(guò)細(xì)胞的你應(yīng)該都會(huì)做。但是，要怎么樣才能省時(shí)省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個(gè)小時(shí)，在活細(xì)胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養(yǎng)基吸掉，再加上DMSO溶解，進(jìn)行檢測(cè)。這個(gè)方法是常用的MTT方法，但是會(huì)有三個(gè)問(wèn)題，*個(gè)是有的甲囋不容易溶解。還有一個(gè)問(wèn)題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會(huì)要混勻，就會(huì)產(chǎn)生泡沫，影響酶標(biāo)儀讀值：第三個(gè)問(wèn)題，就是在吸去培養(yǎng)基的時(shí)候，容易把甲囋也吸走，導(dǎo)致終讀值不準(zhǔn)。當(dāng)然也不是沒(méi)有辦法的，這篇

你真以為做ceRNA就這么簡(jiǎn)單么？2017/11/23: 大家一直都覺(jué)得ceRNA的研究，就是研究LncRNA的簡(jiǎn)便機(jī)制了是吧。因?yàn)槎疾挥脕?lái)論證啥，就直接證明LncRNA和對(duì)應(yīng)的mRNA能同時(shí)結(jié)合miRNA就行了，不是么？其實(shí)，也不全是，當(dāng)然，要是把ceRNA作為低分的LncRNA研究機(jī)制的話，那簡(jiǎn)單的就是做一個(gè)Luciferase實(shí)驗(yàn)：也就是利用Luciferase的3'UTR結(jié)合miRNA，來(lái)驗(yàn)證一下lncRNA和mRNA是不是分別能和miRNA結(jié)合。這個(gè)都是研究miRNA的基本套路。但LncRNA并不會(huì)表達(dá)蛋白，所以用Luciferase的方法，

發(fā)CNS文章，都用了哪些試劑盒？2017/11/23: 你要知道哪個(gè)抗體好用么？哪個(gè)qPCR試劑盒用了以后發(fā)了高分蚊帳？我是不知道，但我知道要怎么樣才能知道。是不是很拗口？挖掘文獻(xiàn)，除了挖數(shù)據(jù)還能挖出點(diǎn)啥？能挖出試劑盒和試劑好不好用，嗯，沒(méi)錯(cuò)，有很多文獻(xiàn)的MaterialsａndMethods里面會(huì)標(biāo)明試劑盒的生產(chǎn)供應(yīng)商。就是有這么一個(gè)文獻(xiàn)挖掘工具，可以幫你挖出文獻(xiàn)中的試劑盒：我們隨便輸入一個(gè)GFP的抗體查查看哈，就出現(xiàn)了這樣的結(jié)果：當(dāng)然這樣的結(jié)果，你并不會(huì)看得很懂。我們拆解一下哈,左側(cè)那一欄，是挖掘出來(lái)的，與這個(gè)抗體相關(guān)的供應(yīng)商以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)：接著，

如何快速找出miRNA相關(guān)的信號(hào)通路？2017/11/16: 那天突然有人問(wèn)我，miRNA是不是能做出那種network的網(wǎng)絡(luò)圖，就跟那種文章里一樣？其實(shí)我自己也忘了到底應(yīng)該怎么整了，簡(jiǎn)單點(diǎn)的話，就自己去搜搜看miRNA怎么樣對(duì)應(yīng)基因做成列表就行了吧。但是負(fù)責(zé)任的我，還是搜到了一些miRNA分析的工具。對(duì)，就是上面這個(gè)工具，可以分析單個(gè)基因或者多個(gè)基因?qū)蝹€(gè)miRNA和多個(gè)miRNA，實(shí)際上跟形成network圖沒(méi)什么關(guān)系。只是覺(jué)得這個(gè)做出來(lái)的東西，還蠻有意思的。我們可以搜多個(gè)miRNA與多個(gè)基因間的關(guān)系：然后，它就會(huì)生成這么一個(gè)特別草率的二型網(wǎng)絡(luò)圖……點(diǎn)

突破！科學(xué)家有望利用干細(xì)胞來(lái)開(kāi)發(fā)出*糖尿病的新型療法2017/11/16: 日前，一項(xiàng)在雜志NatureCellBiology上的研究報(bào)告中，來(lái)自哥本哈根大學(xué)的研究人員通過(guò)進(jìn)行一項(xiàng)新型的干細(xì)胞研究，闡明了如何有效增加糖尿病患者機(jī)體中胰島素的產(chǎn)生，這項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)或能幫助研究者更加有效地以低成本通過(guò)人類干細(xì)胞來(lái)制造產(chǎn)生胰島素的β細(xì)胞，同時(shí)也能開(kāi)發(fā)出治療糖尿病的有效療法，對(duì)于開(kāi)發(fā)治療其它疾病的新型療法也具有重要的意義。目前有4.15億糖尿病患者，而且這一數(shù)字仍在繼續(xù)上升中，糖尿病患者的共同點(diǎn)就是機(jī)體中缺乏制造足夠胰島素的能力，進(jìn)而誘發(fā)患者出現(xiàn)一系列并發(fā)癥和致死性疾病等；胰島素能

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