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上海申知心生物科技有限公司
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肥胖癥疾病研究中動物模型2017/11/10
肥胖癥是一組常見的代謝癥群。當人體進食熱量多于消耗熱量時,多余熱量以脂肪形式儲存于體內(nèi),其量超過正常生理需要量,且達值時遂演變?yōu)榉逝职Y。正常男性成人脂肪組織重量占體重的15%~18%,女性占20%~25%。隨年齡增長,體脂所占比例相應(yīng)增加。關(guān)于肥胖的評估方法,包括人體測量學、雙能X線吸收法、超聲、CT、紅外線感應(yīng)法等多種。如無明顯病因者稱單純性肥胖癥,有明確病因者稱為繼發(fā)性肥胖癥。外因以飲食過多而活動過少為主。熱量攝入多于熱量消耗,使脂肪合成增加是肥胖的物質(zhì)基礎(chǔ)。內(nèi)因為脂肪代謝紊亂而致肥胖。1.
低血糖疾病動物模型2017/11/10
低血糖是指成年人空腹血糖濃度低于2.8mmol/L。糖尿病患者血糖值≤3.9mmol/L即可診斷低血糖。低血糖癥是一組多種病因引起的以靜脈血漿葡萄糖(簡稱血糖)濃度過低,臨床上以交感神經(jīng)興奮和腦細胞缺氧為主要特點的綜合征。低血糖的癥狀通常表現(xiàn)為出汗、饑餓、心慌、顫抖、面色蒼白等,嚴重者還可出現(xiàn)精神不集中、躁動、易怒甚至昏迷等。臨床上反復(fù)發(fā)生空腹低血糖癥提示有器質(zhì)性疾?。徊秃笠鸬姆磻?yīng)性低血糖癥,多見于功能性疾病。1.空腹低血糖癥(1)內(nèi)源性胰島素分泌過多:常見的有胰島素瘤、自身免疫性低血糖等。(
SCTM:發(fā)現(xiàn)一種新的干細胞來源---骨膜組織2017/11/03
在一項新的研究中,研究人員發(fā)現(xiàn)在常規(guī)的髖關(guān)節(jié)置換術(shù)(hipreplacementsurgery)期間通常丟棄的骨膜組織富含成體干細胞,有望提供一種用于再生醫(yī)學的干細胞新來源。相關(guān)研究結(jié)果近期在StemCellsTranslationalMedicine期刊上,標題為“Arthriticperiostealtissuefromjointreplacementsurgery:anovel,autologoussourceofstemcells”。鑒于每年有上萬人接受髖關(guān)節(jié)置換術(shù)治療,這種組織可能在臨
慢阻肺疾病研究實驗動物模型解讀2017/10/25
慢阻肺即慢性阻塞性肺疾病,以不可逆的氣流受限為特點。慢阻肺氣流受限常呈進行性加重,并伴有對有害顆粒或氣體,主要是吸煙所致的肺部異常炎癥反應(yīng)。雖然慢阻肺直接累及肺,但也可引起顯著的全身效應(yīng)。慢阻肺與慢性支氣管炎和肺氣腫密切相關(guān)。當患者有咳嗽、咳痰或呼吸困難癥狀和(或)疾病危險因素接觸史時,應(yīng)考慮慢阻肺。慢性咳嗽、咳痰常先于氣流受限許多年存在,但不是具有咳嗽、咳痰癥狀的患者都會發(fā)展為慢阻肺。要明確診斷慢阻肺,則需要進行肺功能檢查。慢阻肺病死率高;伴有氣促、咳痰、喘息并反復(fù)加重;不僅損傷氣道、肺泡和肺
小鼠干細胞的新突破2017/10/25
英國研究團隊在近日《自然》雜志上撰文指出,他們借助一種全新方法,利用小鼠發(fā)育初期的4—8個細胞胚胎,培育出了一種干細胞系——擴展?jié)撃芨杉毎‥PSCs)。新細胞不僅能發(fā)育成類型的細胞,且發(fā)育潛力超過胚胎干細胞等,對人類的再生醫(yī)學意義重大,有望為研究治療流產(chǎn)和發(fā)育紊亂問題開辟新方向。目前得到的胚胎干細胞和誘導(dǎo)多能干細胞只能發(fā)育成某些特定的細胞譜系。為了發(fā)現(xiàn)新型干細胞用于再生醫(yī)學等領(lǐng)域,劍橋大學韋爾科姆基金會桑格研究所劉澎濤博士領(lǐng)導(dǎo)的團隊,發(fā)明了一種從發(fā)育初階段開始培育干細胞的新方法。在此階段,受精
高血壓疾病動物實驗研究2017/10/20
高血壓(hypertension)是指以體循環(huán)動脈血壓(收縮壓和/或舒張壓)增高為主要特征(收縮壓≥140毫米汞柱,舒張壓≥90毫米汞柱),可伴有心、腦、腎等器官的功能或器質(zhì)性損害的臨床綜合征。高血壓是常見的慢性病,也是心腦血管病主要的危險因素。正常人的血壓隨內(nèi)外環(huán)境變化在范圍內(nèi)波動。在整體人群,血壓水平隨年齡逐漸升高,以收縮壓更為明顯,但50歲后舒張壓呈現(xiàn)下降趨勢,脈壓也隨之加大。近年來,人們對心血管病多重危險因素的作用以及心、腦、腎靶器官保護的認識不斷深入,高血壓的診斷標準也在不斷調(diào)整,目前
動脈粥樣硬化研究動物實驗2017/10/20
動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是冠心病、腦梗死、外周血管病的主要原因。脂質(zhì)代謝障礙為動脈粥樣硬化的病變基礎(chǔ),其特點是受累動脈病變從內(nèi)膜開始,一般先有脂質(zhì)和復(fù)合糖類積聚、出血及血栓形成,進而纖維組織增生及鈣質(zhì)沉著,并有動脈中層的逐漸蛻變和鈣化,導(dǎo)致動脈壁增厚變硬、血管腔狹窄。病變常累及大中肌性動脈,一旦發(fā)展到足以阻塞動脈腔,則該動脈所供應(yīng)的組織或器官將缺血或壞死。由于在動脈內(nèi)膜積聚的脂質(zhì)外觀呈黃色粥樣,因此稱為動脈粥樣硬化。動脈粥樣硬化模型,模型構(gòu)建方式常見有幾種,現(xiàn)在介紹種
RACE技術(shù)的原理和操作2017/10/13
近年來隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展,出現(xiàn)了許多克隆新基因的方法和手段,如圖譜克隆技術(shù)、轉(zhuǎn)座子標簽技術(shù)、mRNA差異顯示技術(shù)二基因組減法技術(shù)以及cDNA文庫篩選技術(shù)等。但上述方法人多具有實驗周期長、技術(shù)步驟煩瑣且工作量大等特點。cDNA末端快速擴增技術(shù)(rapidamplificationofcDNAends,RACE)是一種基于PCR從低豐度的轉(zhuǎn)錄本中快速擴增cDNA的5'和3'末端的有效方法,以其簡單、快速、廉價等優(yōu)勢而受到越來越多的重視.經(jīng)典的RACE技術(shù)是由Frohman等(1988)發(fā)明的一項
實驗助手——質(zhì)粒圖譜如何“瞅”2017/09/28
每當拿到一個質(zhì)粒圖譜,是不是一下就有點懵了?這些ori、RBS、tet是什么?這些箭頭代表什么,轉(zhuǎn)錄的方向嗎?不要著急,申知心生物把這些告訴你,也許會解決你的困惑。質(zhì)粒和載體傻傻分不清楚質(zhì)粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型。載體即要把一個有用的基因(目的基因——研究或應(yīng)用基因)通過基因工程手段送到生物細胞(受體細胞),需要運載工具(交通工具)攜帶外源基因進入受體細胞,這種運載
實驗助手—六大要素讓你告別RNA反轉(zhuǎn)錄失敗2017/09/26
RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類:oligodT,隨機引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應(yīng)用范圍更加廣泛,是因為可由此獲得mRNA的全長拷貝。然而如果mRNA長度過長4kb,或者沒有polyA尾(原核mRNA或rRNA),就需要考慮使用隨機引物進行RNA的反轉(zhuǎn)錄。隨機引物雖能長基因的5’末端的轉(zhuǎn)錄,但并不能獲得整個基因全長的cDNAs,且對RNA樣品質(zhì)量要求比較高,此時可用6-8個核酸聚合體來提高cDNAs的合成量。而對于真核生物的qPCR,長隨機引物和Oli
內(nèi)外科大夫那些有趣的區(qū)別2017/09/18
雖然說內(nèi)科和外科都是相親相愛的一家人,但是細數(shù)一下,兩者之間還是有一些有趣的差別,看看網(wǎng)友們是如何總結(jié)的。區(qū)別一:內(nèi)科大夫多話癆皇上:此番遼國起傾國之力,那蕭皇后親率三十萬大軍南下,諸位愛卿如何是好?內(nèi)科大臣:啟稟皇上,臣以為還當細細打探方能定奪,不宜早下決定。究竟是蕭皇后親征,還是南院大王統(tǒng)帥?又或者是其他將領(lǐng)?這分型應(yīng)當明確。三十萬兵力應(yīng)當有所鑒別,據(jù)臣所知遼國連續(xù)三年大旱,北方更有金人犯境,能聚三十萬兵力實在存疑,打個問號。遼國大軍南下,是分兵幾路?每路兵馬幾何?還需完善相關(guān)檢查。至于如何
Western blot,內(nèi)參蛋白選用技巧!2017/09/12
一、WesternBlot實驗為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實驗結(jié)果進行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達量的相對多少,前提條件是等量的組織細胞蛋白上樣,才有比較的基礎(chǔ),特別是表達量不高時,上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此,在WesternBlot試驗中,進行內(nèi)參的檢測,有以下兩點作用:1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過程中存在的誤差,實驗結(jié)果的準確性;2、使用內(nèi)參可以作為空白對照,檢測蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)參選對了嗎?作為內(nèi)參
ELISA免疫測定,實驗技巧??!2017/09/12
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領(lǐng)域。在臨床檢驗中主要通過抗原抗體反應(yīng)檢測體液中的抗體或抗原性物質(zhì)。ELISA免疫測定目的是?1.測定體液中的各種蛋白質(zhì),包括含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等;2.測定激素,包括小分子量的甾體激素等;3.測定抗生素和藥物;4.測定病原體抗原,HBsAg、H
1型糖尿病——也許受腸道細菌影響2017/09/07
一項新動物實驗的研究發(fā)現(xiàn),出生后不久就接受抗生素,或者在無菌的環(huán)境中長大,小鼠會發(fā)展出嚴重的胰腺炎,這是1型糖尿病的前兆??茖W家早已知道,HLA/MHC基因的某些常見變異,能防范各種自身免疫性疾病,特別是1型糖尿病。他們研究出一批小鼠進行動物實驗,擁有人類白細胞抗原(HLA)基因和主要組織相容性復(fù)合物(MHC),由微小的表面蛋白質(zhì)的細胞作為一些主力抑制免疫系統(tǒng)。然而,這些基因和微小的細胞蛋白質(zhì)是如何調(diào)節(jié)immune-modulating影響收益率?仍籠罩在神秘之中?,F(xiàn)在,哈佛大學醫(yī)學院的科學家們
產(chǎn)后抑郁——也許和妊娠糖尿病有關(guān)2017/09/06
來自IcahnSchoolofMedicineatMountSinai和KarolinskaInstitutet的研究人員發(fā)現(xiàn),妊娠糖尿病導(dǎo)致了初次母親產(chǎn)后抑郁(PPD)的風險。這是迄今為止大的同類研究,其中包括70多萬名婦女。結(jié)果在“journalDepressionandAnxiety”雜志上。研究人員還確定,抑郁癥史女性比沒有診斷過抑郁癥的母親更有可能體驗PPD,數(shù)值達20倍以上。妊娠糖尿病單獨增加PPD的風險,孕婦抑郁癥與妊娠糖尿病的病史進一步增加了PPD的可能性?!按蠖鄶?shù)從業(yè)者認為這是
建立胃癌動物模型2017/08/31
1.甲基膽蒽誘發(fā)小鼠胃癌動物模型(1)取20g左右的小鼠,無菌手術(shù)下,在腺胃粘膜面穿掛含甲基膽蒽(MC)線結(jié)。(2)含MC的線結(jié)是用普通細線,在一端打結(jié)后,將線結(jié)置于盛有MC小玻璃試管內(nèi),在酒精燈上微微加溫,使MC液化滲入線結(jié)。MC濃度為0.05~0.1g20-甲基膽蒽內(nèi)浸入10~20根線。(3)手術(shù)埋線后4~8個月可誘發(fā)成功胃癌。2.不對稱亞硝胺誘發(fā)小鼠胃癌動物模型劑量為0.25ml/kg體重,3個月后全部動物發(fā)生前胃乳頭狀癌,7~8個月后有85~發(fā)生前胃癌。昆明種敏感。A系次之,615系小鼠
建立食管癌動物模型2017/08/30
1.(CH3)2NNO(MBNA)誘發(fā)大鼠食管癌動物模型(1)取體重100g以上的Wistar大鼠;(2)任其食用含(CH3)2NNO的飲水,并將MBNA摻入飼料中使每日攝入量達0.75~1.5mg/kg體重;(3)80~100天可誘發(fā)成食管癌。2.二烴黃樟素(Dihydrosafrole)誘發(fā)大鼠食管癌動物模型(1)二烴黃樟素是一種制備啤酒的調(diào)味品,在大鼠飼料中加入百萬分之二千五百至一萬(2500~10000ppm)黃樟素,就能引起20~75%的食管癌。3.(CH3)2NNO誘發(fā)大鼠食管癌動物
幾種核酸提取方法2017/08/24
(1)濃鹽法利用RNP和DNP在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1MNacl抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL3一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質(zhì),此時蛋白質(zhì)凝膠停留在水相及CCL3相中間,而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.也可用0.15MNaCL液反復(fù)洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按CCL3---異醇法除去蛋白.兩種方法比較,后種方法使核酸降解可能少一些.以稀鹽酸溶液提取DNA時,加入適量去污劑,如SD
2017年度國自然基金結(jié)果公布了!2017/08/23
?2017年3月1日至3月20日項目申請集中接收期間,自然科學基金委員會(以下簡稱自然科學基金委)共接收項目申請190840項,經(jīng)初步審查和復(fù)審后共受理187135項。依據(jù)《自然科學基金條例》和自然科學基金相關(guān)管理辦法,經(jīng)專家評審和委務(wù)會議審批,決定資助面上項目18136項、重點項目667項、重大項目2項、重點(地區(qū))合作研究項目107項、青年科學基金項目17523項、青年科學基金項目399項、創(chuàng)新研究群體項目38項、海外及港澳學者合作研究基金項目142項、地區(qū)科學基金項目3017項、部分聯(lián)合基
免疫沉淀實驗2017/08/17
一、服務(wù)介紹免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗體與抗原間的特異性結(jié)合特性,將抗原(我們感興趣的靶蛋白)-抗體復(fù)合物從樣品中分離出來,達到初步分離純化靶蛋白的目的。之后,樣品可以再進行Westernblot分析。二、實驗原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應(yīng)達到純化,定性檢測蛋白的目的,即在蛋白質(zhì)提取液中加入與抗原(靶蛋白質(zhì))特異性結(jié)合的抗體,抗體與抗原結(jié)合后形成免疫復(fù)合物,再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯(lián)的瓊脂糖珠子孵育,通過離心得到免疫復(fù)合物再經(jīng)過純化,洗脫后
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