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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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氧合血紅蛋白簡介與測定方法2023/03/06
血紅素鐵原子為二價(jià)與O2、卟啉的4個(gè)N,與珠蛋白的組an酸殘基(咪唑)結(jié)合,成為八面體的絡(luò)合物結(jié)構(gòu)。它與游離的血紅蛋白不同,是低自旋(spin)物質(zhì),吸收光譜也類似細(xì)胞色素還原型。氧分壓和氧合血紅蛋白的生成百分率(%)的圖即結(jié)合曲線(解離曲線),由于血紅素間的相互作用的變構(gòu)(alloste-ric)效應(yīng)而呈S型。氧合血紅蛋白的酸性比血紅蛋白強(qiáng),生成時(shí)放出H+,將此稱為庫效應(yīng)。可以認(rèn)為,它在肺中與氧結(jié)合并放出二氧化碳;在組織中在乳酸的生成與氧的游離的相互關(guān)系具有意義。血紅蛋白測定(一)檢測原理血液
輻照后的血清對細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)有影響嗎2023/03/03
血清為細(xì)胞正常生長提供必要的營養(yǎng)成分,而血清也是很容易受到外界因素影響的,所以有些會(huì)對血清采取鈷60γ射線照射也就是我們所謂的輻照血清。那么血清被輻照后會(huì)對本身產(chǎn)品品質(zhì)影響嗎?下面遠(yuǎn)慕為大家解惑。輻照型血清是將正常血清經(jīng)過三次無菌過濾后再用鈷-60輻射滅菌制得的血清。輻照血清是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞分化等的生物學(xué)功能其質(zhì)量的好壞直接影響著生物制品的安全性。早在2004年之前,西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院的研究人員就用已知大腸桿菌噬菌體為陽性的同批新生牛血清進(jìn)行
遠(yuǎn)慕簡述蛋白凍干技術(shù)和凍干后的影響2023/03/03
第一:什么是蛋白?蛋白又名雞子白,異名雞卵白(《別錄》)、雞子清(《食療本草》)。為雉科動(dòng)物家雞的蛋白,是常見的食品。營養(yǎng)優(yōu)良、潤肺利咽、清熱解毒。第二:蛋白為什么要凍干?蛋白質(zhì)對熱敏感,凍干能使絕大部分蛋白質(zhì)的活性保留下來,提高蛋白的穩(wěn)定性并延長保存時(shí)間,同時(shí)降低運(yùn)費(fèi)。第三:凍干對蛋白會(huì)有哪些影響?凍干有可能會(huì)造成蛋白的活性部分損失,聚集和其它變性問題。但可以通過添加保護(hù)劑(穩(wěn)定劑,添加劑,輔料)和控制凍干的各種條件來盡可能降低這些負(fù)面的影響。第四:凍干對蛋白前為什么向蛋白溶液中加保護(hù)劑?保護(hù)
多肽分析過程中常見問題解讀2023/03/03
小分子越來越難做,大分子發(fā)展很強(qiáng)勢,似乎成為了近年來藥物研發(fā)市場的重要表現(xiàn)之一,“多肽”類藥物正是其中的一大熱門。目前多肽藥物的質(zhì)量監(jiān)管日趨漸嚴(yán),在這種趨勢下,尋找能滿足更高分離度,靈敏度的分析方法就顯得尤為重要。很多小伙伴在在開發(fā)多肽類樣品分析方法中總是遇到各種的問題,無比煩惱。這里小編就總結(jié)了一些在多肽方法開發(fā)中常見的問題分享給各位小伙伴。1、多肽含量與多肽純度有什么區(qū)別?一條多肽產(chǎn)品中除了多肽本身還包括生產(chǎn)過程中帶入的水份及有機(jī)鹽分等雜質(zhì),多肽純度僅指多肽本身所含肽產(chǎn)品的含量及雜質(zhì)的含量,
溶解多肽的方法及多肽應(yīng)用的注意點(diǎn)2023/03/03
多肽的溶解度取決元計(jì)算的物理特性。氨基酸可分類為酸性,堿性,極性,非極性,疏水性。多肽有高含量的非極性疏水性氨基酸或極性不帶電荷的氨基酸。建議溶解在有機(jī)溶液中(例如:DMF,甲醇,丙醇,異丙醇,DMSO)??傊?,酸性多肽一般溶解于堿性溶液中,而堿性多肽溶解在酸性溶液中。氨基酸的屬性堿性:Arg,His(H),Lys(K)非極性疏水性:Ala(A),Ile(I),Len(L),Met(M),Phe(F),Pro(P),Trp(W),Val(V)極性不帶電荷:Asn(N),Cys(C),Glg(G)
常用標(biāo)準(zhǔn)pH標(biāo)準(zhǔn)液緩沖表一覽2023/03/02
國內(nèi)常用的標(biāo)準(zhǔn)pH緩沖溶液為標(biāo)稱pH4,pH7和pH9的三種,它們的成分是;pH4:0.05M鄰苯二甲酸氫鉀溶液pH7:0.025M磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉混合鹽溶液pH9:0.01M硼砂溶液溫度(℃)05101520253035404550556070809095pH44.014.004.004.004.004.004.014.024.044.044.064.044.094.124.164.204.22pH76.986.956.926.906.886.866.856.846.846.836.83
PH標(biāo)準(zhǔn)液與PH緩沖液的區(qū)別2023/03/02
什么是pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液?pH緩沖溶液是一種能使pH值保持穩(wěn)定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿,或者在溶液中的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生少量的酸或堿,以及將溶液適當(dāng)稀釋,這個(gè)溶液的pH值基本上穩(wěn)定不變,這種能對抗少量酸堿或大或小稀釋,而使pH值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶有哪些特點(diǎn)?1、標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值是已知的,并達(dá)到規(guī)定的準(zhǔn)確度。2、標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值有良好的復(fù)現(xiàn)性和穩(wěn)定性,具有較大的緩沖容量,較小的稀釋值和較小的溫度系數(shù)。3、溶液的制備方法簡單。如何配制pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液?對于一般pH測量
為什么pH測量一定要標(biāo)定校準(zhǔn)?2023/03/02
pH測量通常有比色法(pH試紙或比色皿)和電極法二種。比色法當(dāng)然不要標(biāo)定,而電極法就一定要標(biāo)定,因?yàn)殡姌O法pH測量就是將未知溶液與已知pHs值的標(biāo)準(zhǔn)溶液在測量電池中作用比較測定,這是電極法pH測量的“操作定義”所決定的。pH計(jì)因電計(jì)設(shè)計(jì)的不同而類型很多,其操作步驟各有不同,因而pH計(jì)的操作應(yīng)嚴(yán)格按照其使用說明書正確進(jìn)行。在具體操作中,校準(zhǔn)是pH計(jì)使用操作中的一重要步驟。表1的數(shù)據(jù)是精度為0.01級、經(jīng)過計(jì)量檢定合格的pH計(jì)在未校準(zhǔn)時(shí)與校準(zhǔn)后的測量值,從中可以看出校準(zhǔn)的重要性。盡管pH計(jì)種類很多,
pH緩沖液的使用方法和配制保存2023/03/02
pH緩沖液是確保pH測量值精確的重要因素。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液用于校準(zhǔn)pH傳感器和檢查其性能。pH緩沖液的緩沖能力是其重要的屬性。即使將外部物質(zhì)加入緩沖液中,這一屬性仍可使pH緩沖液保持恒定的pH值。pH緩沖液使用方法:首先取少量校正液潤洗小量杯,然后加入適量校正液(液面高度沒過電極的感應(yīng)探頭即可)。按照電子pH測試筆使用說明書進(jìn)行校正。由于校正液是高精密的液體,是電子ph測試筆精確度的保障,因此用過的校正液不能再倒回瓶中,以免影響校正液精度,帶入細(xì)菌等,造成校正液無法繼續(xù)使用。pH緩沖液的配制及其保存:
這些微生物培養(yǎng)與分離的方法你知道嗎2023/03/01
接種與分離方法根據(jù)待檢標(biāo)本的性質(zhì)、培養(yǎng)目的和所用培養(yǎng)基的種類,采用不同的接種方法。1.平板劃線分離培養(yǎng)法對混有多種細(xì)菌,采用劃線分離和培養(yǎng),使原來混雜在一起的細(xì)菌沿劃線在瓊脂平板表面分離,得到分散的單個(gè)菌落,以獲得純種。平板劃線分離法通常有兩種方法:①分區(qū)劃線分離法:此法常用于含菌量較多的細(xì)菌的分離。先用接種環(huán)挑取標(biāo)本涂布于瓊脂平板1區(qū)(占培養(yǎng)基總面積的?)并作數(shù)條劃線,再于2、3、4區(qū)依次劃線。每劃完一個(gè)區(qū)域,均將接種環(huán)燒灼滅菌1次,冷后再劃下一區(qū)域,每一區(qū)域的劃線均與上一區(qū)域的劃線交接1~3
微生物分類!遠(yuǎn)慕整理不同類型總結(jié)2023/03/01
【知識點(diǎn)名稱】微生物分類【進(jìn)階攻略】微生物分為不同類型,不同類型中的微生物是考查的方向?!局R點(diǎn)詳情】微生物的分類按照微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組成不同將其分成三種類型:(1)原核細(xì)胞型微生物:僅有原始核,無核膜、無核仁,染色體僅為單個(gè)裸露的DNA分子,無有絲分裂,缺乏完整的細(xì)胞器。屬于這類微生物的有細(xì)菌、放線菌、螺旋體、支原體、衣原體、立克次體。(2)真核細(xì)胞型微生物:細(xì)胞核分化程度較高,有典型的核結(jié)構(gòu)(有核膜、核仁、多個(gè)染色體,由DNA和組蛋白組成),通過有絲分裂進(jìn)行繁殖。胞漿內(nèi)有多種完整的細(xì)胞器。屬
遠(yuǎn)慕教你制作微生物培養(yǎng)皿2023/03/01
一、如何制作:分離培養(yǎng)微生物,離不開固體培養(yǎng)基。在微生物實(shí)驗(yàn)室里,固體培養(yǎng)基的使用是如此地頻繁和常規(guī),以至于這一方法看起來也理所當(dāng)然。然而,回溯至1881年固體培養(yǎng)基出現(xiàn)以前,微生物的培養(yǎng)還只能在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行。為了能直接觀察培養(yǎng)物的形態(tài)及生長情況,科學(xué)家希望能將微生物培養(yǎng)在固體表面上,就像微生物生長在橘子皮或土豆上一樣。德國醫(yī)生羅伯特·科赫(Robert·Koch,1843—1910)曾用煮沸消毒的土豆來培養(yǎng)細(xì)菌。此后,他試著用明膠作培養(yǎng)基的凝固劑。他將明膠加入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行融化,然后將混
淺析微生物培養(yǎng)皿接種后倒置培養(yǎng)的原因2023/03/01
什么是培養(yǎng)皿?培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室器皿,由一個(gè)平面圓盤狀的底和一個(gè)蓋組成,一般用玻璃或塑料制成。培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,適合實(shí)驗(yàn)室接種、劃線、分離細(xì)菌的操作,可以用于植物材料的培養(yǎng)。培養(yǎng)皿接種后為什么要倒置培養(yǎng)?1、利于菌種的生長和繁殖培養(yǎng)條件為必須通風(fēng)時(shí),倒置的平板可以減少培養(yǎng)基表面的空氣流動(dòng),減慢培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)的速度,保持瓊脂等固體培
細(xì)胞培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)選擇及pH變化問題2023/02/28
由于大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH為7.0~7.4,偏離此范圍可能對細(xì)胞生長產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對pH的要求也不wan全相同,原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般對pH變動(dòng)耐受力差,無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。因此,原代培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中的緩沖系統(tǒng)就顯得較為重要。一般的細(xì)胞培養(yǎng)基采用的都是平衡鹽系統(tǒng),但不同的培養(yǎng)基或是同一系列的培養(yǎng)基所用平衡鹽系統(tǒng)不同,如199系列、MEM系列均有Hanks’系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle’s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基不是上述常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),例如RPMI1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基。MEM低血清培養(yǎng)
培養(yǎng)基配制前后的質(zhì)量控制了解一下2023/02/28
培養(yǎng)基必須含有細(xì)菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學(xué)藥品必須純凈,稱取的份量務(wù)必準(zhǔn)確。酸堿度應(yīng)符合細(xì)菌生長要求。按各種培養(yǎng)基要求準(zhǔn)確測定調(diào)節(jié)pH值。多數(shù)細(xì)菌生長的適宜pH值為7.2~7.6,呈弱堿性。營養(yǎng)均衡:六大營養(yǎng)物缺一不可。部分生物還有特殊的要求;營養(yǎng)物質(zhì)的配比;酸堿度。培養(yǎng)基配制時(shí)的質(zhì)量控制容器:配制和分裝培養(yǎng)基的燒瓶,平皿或試管等器材應(yīng)為中性,無酸,堿抑制物殘留,平皿底部要平,以免瓊脂厚薄不一,影響藥敏試驗(yàn)結(jié)果。成分來源:各種成分來源可靠,不含對目的菌生長有抑制的物質(zhì)。特殊要o/f試
培養(yǎng)皿高壓蒸汽滅菌的方法教程2023/02/28
培養(yǎng)皿最初由在德國生物學(xué)家羅伯特·科赫手下工作的細(xì)菌學(xué)家朱利斯·理查德·佩特里于1887年設(shè)計(jì),故又稱為“佩特里皿”。培養(yǎng)皿質(zhì)地脆弱、易碎,故在清洗及拿放時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎、輕拿輕放。使用完畢的培養(yǎng)皿比較好及時(shí)清洗干凈,存放在安全、固定的位置,防止損壞、摔壞。一、培養(yǎng)皿如何滅菌1、加水:將高壓蒸汽滅菌鍋的內(nèi)層鍋取出,再往外層鍋中加入適量的水,比較好水位是使水的平面與鍋內(nèi)三角擱架相平。2、裝鍋:放回內(nèi)層鍋,并將培養(yǎng)皿放入鍋內(nèi)。3、加蓋:將鍋蓋上用于排氣的軟管插入到內(nèi)層鍋的排氣槽中。再以兩兩相對的方式同時(shí)
化學(xué)分析檢驗(yàn)造成誤差的原因以及處理方法2023/02/28
在化學(xué)檢驗(yàn)中,往往存在各種誤差,為了精密而準(zhǔn)確地進(jìn)行化學(xué)分析,必須有效地消除或減少多樣的誤差。一、系統(tǒng)誤差又叫可測誤差,是由測量過程中的某些經(jīng)常原因造成的。是要分析條件不變,重復(fù)測量時(shí)它會(huì)重復(fù)表現(xiàn)出來,其大小、符號都不變,對測量的結(jié)果影響較為固定。1、儀器誤差是由儀器本身不夠準(zhǔn)確而精密或未經(jīng)校準(zhǔn)所引起的。如天平?jīng)]校正,砝碼沒校正,儀器受摩擦產(chǎn)生靜電干擾,容量瓶、滴定管和移液管、量杯等刻度不夠準(zhǔn)確等。如在滴定分析中,滴定管讀數(shù)誤差為±0.01ml,為了使測量時(shí)的相對誤差小于0.01%,消耗滴定劑的
搞定蛋白表達(dá),只需弄清這幾點(diǎn)!2023/02/24
蛋白表達(dá)問題一直備受關(guān)注,如何實(shí)現(xiàn)蛋白高效表達(dá)這個(gè)老生常談的話題,今天遠(yuǎn)慕來探討一下。影響蛋白表達(dá)的因素主要有:1.載體構(gòu)建錯(cuò)誤這個(gè)是很多克隆新人常犯的錯(cuò)誤,在克隆時(shí)弄錯(cuò)讀碼框,從而導(dǎo)致蛋白不表達(dá)。蛋白表達(dá)載體構(gòu)建正確是蛋白表達(dá)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),構(gòu)建載體時(shí)要考慮啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)、終止子、融合標(biāo)簽、復(fù)制子等多種因素。2.宿主菌選擇不當(dāng)不同宿主菌的基因型不同,選擇合適的宿主菌對某些特殊的載體進(jìn)行蛋白表達(dá)至關(guān)重要。有時(shí)表達(dá)重組的毒素蛋白,對宿主細(xì)胞也有毒性,會(huì)造成質(zhì)粒丟失。3.GC含量不同物種間基因組的G
細(xì)胞凍存指南,這些關(guān)鍵點(diǎn)必看!2023/02/24
細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)常規(guī)步驟,是細(xì)胞保存的重要方法之一。將細(xì)胞低溫保存在-196℃液氮中,使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而進(jìn)入休眠階段,以便日后復(fù)蘇重新培養(yǎng)擴(kuò)增。保姆級細(xì)胞凍存方法:看似簡單的實(shí)驗(yàn),仍有一些關(guān)鍵點(diǎn)需要格外留意,切莫踩到“雷區(qū)”,造成“實(shí)驗(yàn)大翻車”。凍存操作前:選擇長勢良好、存活率高,且生長密度在80%—90%的細(xì)胞進(jìn)行凍存。需對細(xì)胞進(jìn)行雜質(zhì)檢測:是否有雜細(xì)胞或者支原體等雜質(zhì)。這里推薦使用遠(yuǎn)慕生物MB支原體常規(guī)法PCR檢測試劑盒,非定量檢測,常規(guī)PCR即可滿足需求,方便快捷,靈敏度高
遠(yuǎn)慕簡述細(xì)胞凍存史,了解細(xì)胞凍存那些事兒2023/02/24
我們的身體是一個(gè)巨大的精密儀器,每一個(gè)器官都是其中重要的組成零件,細(xì)胞就是其中最基本也最重要的元件。如同機(jī)器需要定期維修.更換,人體也有自我修復(fù)機(jī)制,但每一次細(xì)胞的自我修復(fù)與更新,除了端粒酶保護(hù)能力下降外,基因突變的發(fā)生也不可避免,而此現(xiàn)象是會(huì)隨著年齡的增長而不斷在身體里累積,細(xì)胞的自我再生能力亦會(huì)隨著年齡的增加而衰退。如今很多人都為自己的健康做好了長遠(yuǎn)規(guī)劃,選擇新型的個(gè)人健康管理方式——凍存免疫細(xì)胞。但是也有很多疑問:細(xì)胞凍存可以凍存多長時(shí)間?細(xì)胞復(fù)蘇后活性如何?什么時(shí)候凍存細(xì)胞的質(zhì)量zui高
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