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上海遠慕生物科技有限公司
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核酸分子大小與瓊脂糖濃度的關(guān)系介紹2023/02/16
核酸分子大小與瓊脂糖濃度的關(guān)系(1)DNA分子的大小在凝膠中,DNA片段遷移距離(遷移率)與堿基對的對數(shù)成反比,因此通過已知大小的標準物移動的距離與未知片段的移動距離時行比較,便可測出未知片段的大小。但是當DNA分子大小超過20kb時,普通瓊脂糖凝膠就很難將它們分開。此時電泳的遷移率不再依賴于分子大小,因此,就用瓊脂糖凝膠電泳分離DNA時,分子大小不宜超過此值。(2)瓊脂脂糖的濃度如下所示,不同大小的DNA需要用不同濃度的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。瓊脂糖濃度與DNA分離范圍瓊脂糖濃度/%0.30.
你知道凝膠層析分離物質(zhì),有什么優(yōu)缺點嗎2023/02/16
1.凝膠層析操作簡便,所需設(shè)備簡單。有時只要有一根層析柱便可進行工作。分離介質(zhì)—凝膠wan全不需要像離子交換劑那樣復雜的再生過程便可重復使用。2.分離效果較好,重復性高。突出的是樣品回收率高,接近100%。3.分離條件緩和。凝膠骨架親水,分離過程又不涉及化學鍵的變化,所以對分離物的活性沒有不良影響。4.應(yīng)用廣泛。適用于各種生化物質(zhì),如肽類、激素、蛋白質(zhì)、多糖、核酸的分離純化、脫鹽、濃縮以及分析測定等。分離的分子量范圍也很寬,如SephadexG類為102~105d;Sepharose類為105~
電泳后的凝膠染色方法介紹2023/02/16
實驗概要本文介紹了電泳后主要的凝膠染色方法,包括:標準考馬斯亮藍染色法、快速考馬斯亮藍染色法、凝膠銨銀染色法、凝膠中性銀染色法及凝膠銅染色法。實驗步驟1.標準考馬斯亮藍染色法1)電泳后,將凝膠轉(zhuǎn)入一潔凈的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝膠體積的0.25%考馬斯亮藍R-250(溶解于50%甲醇和10%乙酸中);2)室溫下振搖溫育4h至過夜;3)去除染色液,收集保存可重復使用20-40次;4)依次在25%甲醇和7.5%乙酸中室溫振搖下脫色。靈敏度為0.1-0.5ug蛋白/每條帶。注:使用加熱的染色液或
各種類抗體的主要特性和功能介紹2023/02/16
一、IgGIgG于出生后3個月開始合成,3~5歲接近成人水平。IgG是血清和體液中含量最高的抗體,占血清總Ig的75%~80%。人lgG有4個亞類,根據(jù)其在血清中濃度的高低排序,分別為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期為20~23天,是再次免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體,其親和力高,在體內(nèi)分布廣泛,具有重要的免疫效應(yīng),是機體抗感染的“主力軍”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿過胎盤屏障,在新生兒抗感染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通過經(jīng)典途徑活化補體,并可與巨噬細
細胞因子中全血的標本處理方法2023/02/15
細胞因子中全血的標本處理方法分析:我們針對全血:使用肝素鈉抗凝的真空采血管采血,不易采用肝素鋰、EDTA和ACD抗凝劑,血樣在8小時內(nèi)分析,超過8小時會導致活性的損失,一般細胞因子陽性細胞會減少5%。如不能在8小時之內(nèi)檢測,應(yīng)將真空采血管水平室溫放置。自身血漿中外周血單個核細胞(PBMCs):使用肝素鈉抗凝的采血后,分離PBMCs,24小時內(nèi)分析。組織培養(yǎng)基中的外周血單個核細胞(PBMCs):用Ficoll分離PBMCs,將細胞重懸于含10%熱滅活胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培養(yǎng)基中,
細菌胞外蛋白含量的測定方法2023/02/15
一、實驗原理這種蛋白質(zhì)測定法是的方法之一.過去此法是應(yīng)用泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代.此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質(zhì)的靈敏度.這兩種顯色反應(yīng)產(chǎn)生深蘭色的原因是:在堿性條件下,蛋白質(zhì)中的肽鍵與銅結(jié)合生成復合物.Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被蛋白質(zhì)中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原,產(chǎn)生深蘭色(鉬蘭和鎢蘭的混合物).在一定的條件下,蘭色深度與蛋白的量成正比。Folin
細胞培養(yǎng)為何要先裂解紅細胞?2023/02/15
一、基本介紹紅細胞裂解液是一種去除紅細胞z簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細胞,它既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經(jīng)紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞,可進一步用于原代培養(yǎng)、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。二、使用說明①組織細胞樣品1、新鮮組織經(jīng)yi酶或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液,離心棄去上清液。2、從4℃冰箱中
簡述牛血清白蛋白在細胞培養(yǎng)中的用途2023/02/15
牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用。主要成分:1.蛋白質(zhì)——是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。2.多肽——血小板促生長因子能促細胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細胞增殖因子;成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經(jīng)細胞生長因子等,血清中含量雖很少,但對細胞生長也有一定作用。3.激素——胰島素:促進細胞攝取葡萄
菌種保藏中心是怎么進行細菌鑒定的?2023/02/14
傳統(tǒng)方法常規(guī)宏觀菌落形態(tài)學觀察,主要觀察菌落在其適合的培養(yǎng)基上的生長狀況:細菌在固體培養(yǎng)基上的生長形態(tài)、大小、顏色是否均勻一致,菌落個體表面及邊緣的生長狀況;在液體培養(yǎng)基上的渾濁狀況、沉淀狀況、液面菌膜狀況;半固體上穿刺接種后,觀察細菌是否沿著接種線生長以及其生長狀態(tài)是呈毛刷樣生長還是均勻生長,上下生長是否一致.在鑒別培養(yǎng)基上培養(yǎng),觀察結(jié)果是否跟預期結(jié)果相同。細菌的個體形態(tài)學觀察,即通過顯微鏡觀察.觀察前細菌需要著色,要根據(jù)預先確定的觀察項目選擇與之相對應(yīng)的染色方法,目前常用的染色方法包括革蘭氏
遠慕生物簡述固體培養(yǎng)基的原理2023/02/14
固體培養(yǎng)基的凝固劑一般不是微生物的營養(yǎng)成分,只起固化作用。理想的凝固劑應(yīng)具備以下條件:不會被微生物分解利用;不會因高溫滅菌而受到破壞;在微生物生長的溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài);對微生物及操作人員均無毒害作用;透明度好、凝固力強;價格低廉,配制方便。常用的凝固劑是瓊脂。瓊脂的主要成分是硫酸半乳聚糖,絕大多數(shù)微生物都不能分解利用它。瓊脂的熔點為96℃,凝固點為40℃,因此,在一般的培養(yǎng)條件下都呈固體狀態(tài),而且透明度強。正是這些優(yōu)良特性,使瓊脂取代了早期使用的明膠而成為常用的凝固劑。呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基,叫
分子生物學檢驗技術(shù)的分析對象是什么?2023/02/14
分子生物學是在生物化學基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,以研究核酸和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能等生命本質(zhì)的學科,在核酸、蛋白質(zhì)分子水平研究發(fā)病、診斷、治療和預后的機制。其中基因工程(基因技術(shù),基因重組)是目前分子生物學研究熱點,這些技術(shù)可以改造或擴增基因和基因產(chǎn)物,使微量的研究對象達到分析水平,是研究基因調(diào)控和表達的方法,也是分子水平研究疾病發(fā)生機制、基因診斷和基因治療的方法。轉(zhuǎn)化(transformation)、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導、轉(zhuǎn)位等是自然界基因重組存在的方式,也是人工基因重組常采用的手段?;蛑亟M的目的之一是基因克(ge
如何鑒定發(fā)酵罐中的菌種種類2023/02/14
好多人對菌種的鑒定方法不了解,尤其是發(fā)酵罐的。下面遠慕就來給大家介紹如何鑒定發(fā)酵罐中的菌種種類:1.糖發(fā)酵試驗糖發(fā)酵實驗是常用的生化反應(yīng),在腸道細菌鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細菌都能利用糖類作為碳源和能源,但是它們在分解糖的能力上有很大差異,有些細菌能分解糖并產(chǎn)酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫、甲烷、二氧化碳等);有些細菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣;傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不能分解乳糖;普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能分解乳糖。酸的產(chǎn)生可以利用指示劑來
微生物無菌操作注意事項!2023/02/13
無菌技術(shù)主要包括1、對實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進行清潔和消毒;2、將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種的用具和培養(yǎng)基等進行滅菌;3、為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行,4、實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸一、倒平板1.培養(yǎng)基滅菌后,需冷卻至50℃左右時才能倒平板。2.左手拿培養(yǎng)皿,右手拿錐形瓶,左手拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,不要wan全打開。3.整個操作在酒精燈火焰旁進行,避免雜菌污染。4.平板冷卻后要倒置的原因:防止皿蓋上的
pH計和pH試紙測試結(jié)果差距很大,那個能信?2023/02/13
在pH測量中常常會遇到這樣的情況:同一個溶液用pH試紙測得的值與pH計測得的值相差很大,甚至可相差好幾個pH單位!曾經(jīng)有人做過這樣一些實驗:實驗一:強電解質(zhì)溶液的pH試驗——在50mL。去離子水中加入1.6g的Na2SO4,用NaOH和H2SO4調(diào)節(jié)pH,結(jié)果……實驗二:中濃度緩沖渡pH的試驗——250mL去離子水中加入pH6.86標準混合磷酸鹽2.5g,用NaOH和H2S04調(diào)節(jié)pH,結(jié)果……實驗三:多種緩沖劑混合溶液的pH試驗——250mL去離子水中加入pH4.008標準鄰苯二甲酸氫鉀1.2
實驗室玻璃量器校準方法2023/02/13
我們?yōu)槭裁匆??校正使其表面容量(儀器上所標示的容量)和真實容量一致,保證實驗用量器的準確性。校準范圍常用的需校準的玻璃量器有滴定管、移液管(分度吸量管和單標線吸量管)、容量瓶、量筒量杯四種。校準條件1、容量瓶,滴定管校正前應(yīng)對其進行檢漏。2、新購入的玻璃儀器加入適量的鉻酸鉀洗液浸泡4-6小時或過夜,在倒出洗液用自來水沖洗干凈,在用純化水沖洗3次。在通風干燥處自然風干。待儀器內(nèi)壁不掛水珠為清潔干凈。3、校正用的水應(yīng)用新沸過冷水,放一溫度計(盡量選用量程小的減少誤差),用于測定水的溫度;應(yīng)提前1
實驗室質(zhì)量控制常用方法,不會的趕緊學!2023/02/13
一、標準物質(zhì)監(jiān)控質(zhì)控過程通常的做法是實驗室直接用合適的有證標準物質(zhì)或內(nèi)部標準樣品作為監(jiān)控樣品,定期或不定期將監(jiān)控樣品以比對樣或密碼樣的形式,與樣品檢測以相同的流程和方法同時進行,檢測室完成后上報檢測結(jié)果給相關(guān)質(zhì)量控制人員,也可由檢測人員自行安排在樣品檢測時同時插人標準物質(zhì),驗證檢測結(jié)果的準確性。適用范圍一般可用于:儀器狀態(tài)的控制、樣品檢測過程的控制、實驗室內(nèi)部的儀器比對、人員比對、方法比對以及實驗室間比對等。這種方法的特點是可靠性高,但成本高。二、人員比對質(zhì)控過程由實驗室內(nèi)部的檢測人員在合理的時
實驗室有害微生物這樣管理2023/02/10
國家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度,將病原微生物分為四類:第一類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物,以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。第三類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物疾病,但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害,傳播風險有限,實驗室感染后很少引起嚴重疾病,并且具備有效治療和預防措施的微生物。第四類病原微生物,是
如何管理檢驗檢測行業(yè)的“量具”----標準物質(zhì)2023/02/10
標準物質(zhì)可以說是檢驗檢測行業(yè)的“量具”,主要用于確定樣品的特性值、方法驗證、期間核查、質(zhì)量控制以及人員技能考核等用途。標準物質(zhì)管理是設(shè)備管理的重要組成部分,與儀器設(shè)備管理相比又有其特殊性,主要應(yīng)做好以下工作:(1)標準物質(zhì)采購。實驗室使用的標準物質(zhì)種類繁多,選擇標準物質(zhì)可從如下幾個方面考慮:a)優(yōu)先選用質(zhì)量管理體系完備的標準物質(zhì)生產(chǎn)者提供的標準物質(zhì);b)優(yōu)先選用有證標準物質(zhì),主要有國家計量管理部門批準發(fā)布的國家標準物質(zhì)和國家標準化管理部門批準發(fā)布的標準樣品;c)當無法選擇到相同基體標準物質(zhì)時,可
檢測報告中數(shù)據(jù)不準確的一系列原因2023/02/10
1.檢測和計算粗心大意檢測是一個需要專注的過程,稍有疏忽,就容易出現(xiàn)差錯。而隨著手機的普及,檢測過程中,檢測人員在檢測后的數(shù)據(jù)計算過程中接聽手機的現(xiàn)象非常普遍,如此以及其他的粗心造成檢測失誤的案例也時有發(fā)生。檢測和計算過程中粗心大意造成的檢測失誤雖不常見,但一旦出現(xiàn)這種情況,將直接導致檢測結(jié)果出現(xiàn)差錯。2.對可疑數(shù)據(jù)不敏感一般而言,每一種物質(zhì)都有其自身特性,其檢測數(shù)據(jù)應(yīng)在一定范圍,如,苯板的導熱系數(shù)不可能為0,采用不同鋁合金建筑型材和普通單層玻璃的建筑外窗不可能達到保溫窗的要求等等。當檢測人員或
遠慕教你看懂培養(yǎng)基檢驗報告單2023/02/09
干粉類培養(yǎng)基的檢驗報告單主要包括以下內(nèi)容,建議拿一份CoA結(jié)合本文閱讀。1.感官一般包括色澤、氣味、形態(tài)、雜質(zhì)等,屬于主觀評價。不同廠家產(chǎn)品會有不同。2.理化a)干燥失重或水分一般控制在5%-6%以內(nèi),不同廠家會有不同。結(jié)合水活度來說,這是控制培養(yǎng)基干粉微生物污染的重要手段。同時要關(guān)注密封情況,不能破壞水活度的環(huán)境。b)凝膠強度這條僅限于是瓊脂類干粉培養(yǎng)基,一般描述為適宜或適中。因為瓊脂平板一般要倒置培養(yǎng),所以凝膠強度非常重要。而凝膠強度的高低也直接來源于瓊脂的質(zhì)量。瓊脂是一種來源于海藻中,具有
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