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糖類檢測(cè)方法，科研人必看！2022/12/05: 對(duì)于糖的測(cè)定方法有很多，大致可分為三類1.物理法，（1.旋光法,2.折光法,3.比重法,）2.物理化學(xué)法,(1.點(diǎn)位法,2極普法,3.光度法,4.色譜法)3.化學(xué)方法,(1.斐林氏法.2.高錳/酸鉀法.3.碘量法.4.鐵氰/化鉀法.5.蒽銅比色法.6.咔唑比色法)共計(jì)三大種，在測(cè)定其他碳水化合物時(shí)，往往是使其水解為糖再進(jìn)行測(cè)定。一.總糖的測(cè)定食品中的總糖主要指具有還原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在測(cè)定條件下能水解為還原性的單糖的蔗糖（水解后為1分子葡萄糖和1分子果糖），麥芽糖（水解后為2分子葡

遠(yuǎn)慕為您介紹抗凝劑和促凝劑的區(qū)別與應(yīng)用2022/12/02: 抗凝劑和促凝劑都是真空采血管中，用于血液檢測(cè)必/不可少的添加劑。根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的不同，會(huì)分別添加不同的促凝劑和抗凝劑。同樣作為采血管添加劑，促凝劑和抗凝劑的作用及用途究竟有哪些區(qū)別呢？誰(shuí)的用途會(huì)更大呢？一、促凝劑的作用及用途當(dāng)真空采血管中添加了促凝劑能激活纖維蛋白酶，使可溶性纖維蛋白變成不可溶性纖維蛋白聚體，可加速血液的凝固，縮短檢驗(yàn)的時(shí)間，通常和血清分離膠一起使用，主要用于血清生化（肝功能、腎功能、心肌酶、淀粉酶等）、電解質(zhì)（血清鉀、鈉、氯、鈣、磷等）、甲狀腺功能、艾滋病檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物、血清免

使用PIPES緩沖液的注意事項(xiàng)2022/12/02: PIPES全名哌/嗪-1,4-二乙磺酸，是一種兩性離子生物緩沖劑，也是GOOD’S緩沖劑里的一種。具有高水溶性、底細(xì)胞膜通透性、穩(wěn)定的酸堿解離性、低金屬螯合能力、高化學(xué)穩(wěn)定性，并且能在紫外線和可見(jiàn)光區(qū)中低吸收光譜等優(yōu)良特性。PIPES作為一種應(yīng)用非常廣泛的緩沖劑，在植物組化學(xué)中可以以最小化戊二醇固定導(dǎo)致的脂質(zhì)損傷和實(shí)驗(yàn)假象。由于PIPES的pka十分接近生理性PH值，因此非常適合體外細(xì)胞培養(yǎng)。但是PIPES能形成自由基，所以不適合用于氧化還原反應(yīng)中。那么，在使用PIPES時(shí)，需要注意些什么呢？1

滅活型和非滅活型保存液有何區(qū)別？2022/12/02: 滅活型和非滅活型保存液區(qū)別分析介紹如下：1、滅活型：病毒和細(xì)菌受理化因素作用后失去感染性，稱為滅活（inactivation）。多數(shù)病毒比細(xì)菌更容易被滅活。這也使得病毒的長(zhǎng)期保存通常比細(xì)菌的保存更困難。其實(shí)大多數(shù)病毒耐冷不耐熱，對(duì)熱不穩(wěn)定。55—60℃，通常在數(shù)分鐘內(nèi)，病毒的衣殼蛋白就會(huì)發(fā)生變性，使病毒失去感染能力。這可能是因?yàn)榇藭r(shí)的病毒已失去了對(duì)正常細(xì)胞的吸附能力或脫衣能力。病毒存在不易保存和易感染的弊端，但滅活型病毒保存液完/美解決了這一弊端。病毒保存液（滅活型）采用高濃度的胍鹽可以快速對(duì)呼

血液保存液的主要成分與作用2022/12/02: 血液保存液的主要成分與作用，快來(lái)跟著小編了解一下吧！1.血液保存液常用種類配方可分為：ACD（A，枸櫞酸；C，枸櫞酸三鈉；D，葡萄糖）與CPD（C，枸櫞酸三鈉；P，磷酸鹽；D，葡萄糖及枸櫞酸）兩大類保存液。在CPD中加腺嘌呤即為CPDA-1。2.血液保存液主要成分（1）枸櫞酸鹽：是所有抗凝保存液中的基本抗凝物質(zhì)。最/常用的是枸櫞酸三鈉，除抗凝作用外，它還能阻止溶血的發(fā)生。（2）枸櫞酸：避免保存液中的葡萄糖在消毒中焦化。（3）葡萄糖：是紅細(xì)胞代謝所必需的營(yíng)養(yǎng)成分，可延長(zhǎng)紅細(xì)胞保存時(shí)間，且防止溶血；

天然產(chǎn)物提取加工的基本流程2022/12/01: 天然產(chǎn)物提取加工的基本流程1、細(xì)胞破碎包括珠磨破碎、壓力釋放破碎、冷凍加壓釋放破碎、化學(xué)破碎、機(jī)械粉碎等，細(xì)胞破碎技術(shù)的成熟使得大規(guī)模生產(chǎn)胞內(nèi)產(chǎn)物成為可能。2、初步純化各種沉淀法如鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀、化學(xué)沉淀，大網(wǎng)絡(luò)樹(shù)脂吸附法、膜分離法解決了對(duì)熱、PH、金屬離子、有機(jī)溶劑敏感的大分子物質(zhì)的分離、濃縮和脫鹽等難題。3、高度純化開(kāi)發(fā)了各類層析技術(shù)，如親和層析、疏水層析等，而用于工業(yè)化生產(chǎn)的主要是離子交換層析和凝膠層析。前一種技術(shù)是20世紀(jì)60年代以后逐漸發(fā)展成為工業(yè)技術(shù)的，真正用于生物大分子的他離

病毒樣本保存液的pH值范圍2022/12/01: 在新/冠大流行之前，可能很多人對(duì)病毒和病毒檢測(cè)還比較陌生，但是現(xiàn)在對(duì)于病毒檢測(cè)可以說(shuō)是無(wú)人/不知、無(wú)人/不曉了。但是對(duì)于核酸采樣管中的病毒樣本保存液，可能就不是每個(gè)人都知曉了，本文主要介紹保存液的pH值范圍。病毒保存液或者說(shuō)樣本保存液，其pH值是一個(gè)重要的基礎(chǔ)參數(shù)，它為病毒的核酸樣本提供了一個(gè)適宜的pH值。核酸一般在中性至弱堿性的環(huán)境溶解較好，病毒保存液的pH值通常是6.5-8.5的范圍之類。新/冠病毒的核酸是RNA，與DNA相比在中性至弱堿性時(shí)更容易游離到水相，所以Tris平衡酚（pH=8.0

核酸染料怎么選？遠(yuǎn)慕教你選擇適合自己的染料！2022/12/01: 核酸染料目前已經(jīng)有很多種類型，我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)進(jìn)行選擇的時(shí)候，有哪些因素制約著我們呢，我們應(yīng)該用哪些指標(biāo)去評(píng)價(jià)它們，最終找到適合的染料呢？下面從安全性、靈敏度、穩(wěn)定性、對(duì)染色效果的影響（比如染色方法、遷移率等）以及價(jià)格等方面來(lái)對(duì)染料進(jìn)行評(píng)價(jià)。01、安全性如果選擇EB替代染料，那么染料的安全性就是一個(gè)非常重要的指標(biāo)。安全性評(píng)估主要的檢測(cè)有Ames測(cè)試、細(xì)胞滲透性實(shí)驗(yàn)、染色體畸變和正向突變分析、口服毒性分析等。在安全性方面，具有較多檢測(cè)項(xiàng)目和相對(duì)權(quán)/威的機(jī)構(gòu)出具檢測(cè)報(bào)告的核酸染料，安全性可能會(huì)更高；另外

瓊脂糖凝膠中常用的染料及毒性介紹2022/12/01: 在分子生物學(xué)中，電泳實(shí)驗(yàn)是核酸的分離、純化及蛋白識(shí)別的有效方法，可以與凝膠成像系統(tǒng)配合使用，也可以單獨(dú)使用，具體根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膩?lái)選擇。瓊脂糖凝膠電泳是通過(guò)DNA片段在瓊脂糖介質(zhì)電場(chǎng)中的電泳速率大小來(lái)判斷DNA分子量的大小的實(shí)驗(yàn)方法。瓊脂糖凝膠中常用的染料有哪些？1.溴化乙錠：溴化乙錠通常習(xí)慣簡(jiǎn)稱“EB”，是核酸染色及凝膠成像分析中普遍使用的染料。EB染料屬于核酸分子嵌入型染色劑，且具有DNA誘導(dǎo)突變的作用。研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期使用溴化乙錠或長(zhǎng)期處在含溴化乙錠的實(shí)驗(yàn)環(huán)境中，會(huì)對(duì)人體造成較大的傷害，甚至增加

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)！2022/11/30: 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）簡(jiǎn)稱單增李斯特菌，革蘭氏陽(yáng)性小桿菌，大小為（0.4-0.5）μm×（0.5-2）μm，直或稍彎，多數(shù)菌體一端較大，似棒狀，常呈V字型排列，有的呈絲狀，偶爾可見(jiàn)雙球狀。在22℃-25℃環(huán)境可形成4根鞭毛。本菌對(duì)理化因素抵抗力較強(qiáng)。在士壤、糞便、青貯飼料和干草內(nèi)能長(zhǎng)期存活:對(duì)堿和鹽抵抗力強(qiáng)，對(duì)青/霉素、氨芐青/霉素、四環(huán)素、磺胺等均敏感。本菌營(yíng)養(yǎng)要求不高，兼性厭氧。菌落初期極小，水滴樣，經(jīng)37℃數(shù)天培養(yǎng)后，直徑可達(dá)2mm，初期菌落光

淺談大腸桿菌菌株在生物技術(shù)中的應(yīng)用2022/11/30: 大腸桿菌（Escherichiacoli）大腸埃希氏菌，它是一種普通的原核生物，根據(jù)不同的生物學(xué)特性將致病性大腸桿菌分為6類：腸致病性大腸桿菌（EPEC）、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）、腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）、腸出血性大腸桿菌（EHEC）、腸黏附性大腸桿菌（EAEC）和彌散粘附性大腸桿菌(DAEC).。大腸桿菌屬于革蘭氏陰性細(xì)菌（G-）。一、簡(jiǎn)介大腸桿菌（Escherichiacoli，E.coli）革蘭氏陰性短桿菌，大小0.5×1～3微米。周生鞭毛，能運(yùn)動(dòng)，無(wú)芽孢。能發(fā)酵多種糖類產(chǎn)酸、產(chǎn)

菌株反復(fù)凍存對(duì)菌株有什么影響？2022/11/30: 菌株反復(fù)凍存對(duì)菌株有什么影響？低溫會(huì)使菌株細(xì)胞內(nèi)的水分形成冰晶，從而引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)尤其是細(xì)胞膜的損傷。細(xì)胞體積大者一般要比較小者對(duì)低溫更為敏感，而無(wú)細(xì)胞壁者則比有細(xì)胞壁者敏感。如果放到低溫（不是一般冰箱）進(jìn)行冷凍時(shí)，會(huì)產(chǎn)生冰晶，冰晶呈針狀，極易導(dǎo)致細(xì)菌的嚴(yán)重?fù)p傷。用電鏡觀察，可見(jiàn)細(xì)菌的核膜上有大量針尖樣小孔，當(dāng)從低溫下移出并開(kāi)始升溫時(shí)，冰晶又會(huì)變大，故反復(fù)凍存，會(huì)對(duì)菌株造成極大損傷。菌株保存要求菌種作為一項(xiàng)重要的生物資源，對(duì)微生物學(xué)教學(xué)和研究是必/不可少的。菌種保存方法因微生物的不同而異。在菌種保

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株的制備與存活方法2022/11/30: 標(biāo)準(zhǔn)菌株存活性怎么進(jìn)行？標(biāo)準(zhǔn)菌株存活性就是其的復(fù)活過(guò)程,我們購(gòu)買的標(biāo)準(zhǔn)菌株一般是凍干粉或者凍干管,然后我們要對(duì)其進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng),這個(gè)過(guò)程是必須的,否則我們沒(méi)有辦法使用。針對(duì)其存活性的驗(yàn)證,所有的標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)中都是其存活性的判斷,一個(gè)定性的判斷。復(fù)活的過(guò)程對(duì)其進(jìn)行打管,按照標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行培養(yǎng),如果接種到液體培養(yǎng),有肉眼可見(jiàn)的渾濁或者進(jìn)一步鏡檢時(shí)有目標(biāo)微生物生長(zhǎng);如果接種到固體培養(yǎng)上,有肉眼可見(jiàn)的菌落,這些都叫存活性合格。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株的制備標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株是標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)過(guò)一次傳代后制備的多份相同的菌株。將檢查完純

膠原酶和胰酶在細(xì)胞原代培養(yǎng)中的區(qū)別2022/11/29: 膠原酶在上皮類細(xì)胞原代培養(yǎng)時(shí)經(jīng)常使用，作用對(duì)象是膠原組織，因此不容易對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。消化原代培養(yǎng)的上皮類細(xì)胞用此酶效果更好。胰蛋白酶（簡(jiǎn)稱胰酶）是廣泛應(yīng)用的消化劑.胰蛋白酶是一種胰臟制品,對(duì)蛋白質(zhì)有水介作用,主要作用于賴氨酸或精氨酸相連接的肽鍵,使細(xì)胞間質(zhì)中的蛋白質(zhì)水介而使細(xì)胞分散開(kāi),在常用的蛋白酶中由于產(chǎn)品的活力和純度不同,對(duì)細(xì)胞的消化能力也不同,胰蛋白酶對(duì)細(xì)胞的作用,取決于細(xì)胞類型、酶的活力、配制的濃度、消化的溫度、無(wú)機(jī)鹽離子、pH以及消化時(shí)間的長(zhǎng)短等.膠原酶是一種從細(xì)菌中提取出來(lái)的酶,對(duì)膠

對(duì)DNA分子做酶切時(shí)的注意事項(xiàng)2022/11/29: 如果是要做酶切，提質(zhì)粒的最/后一步最/好是用水溶解DNA，因?yàn)門(mén)E里面的離子會(huì)影響酶切的效率。雙酶切制備克隆插入片段的載體，最/好選擇帶有外源片段的質(zhì)粒，是否酶切完/全，從電泳條帶的分子量上可以比較明確地判斷。空質(zhì)粒單切完/全和雙切完/全在分子量上差異不大。在做酶切時(shí)，也可以象PCR一樣配置主反應(yīng)液，每次反應(yīng)前先列好反應(yīng)的體系，算好需要的反應(yīng)數(shù)，然后按所需反應(yīng)的體系按所需反應(yīng)數(shù)放大，加入buffer、酶、水，質(zhì)粒欄空缺，然后混合后按除質(zhì)粒DNA的體積分裝，然后再在每管中加入相應(yīng)體積的質(zhì)粒DNA酶

DNA聚合酶的歷史簡(jiǎn)介2022/11/29: 在50年代的中期，A.Kornberg和他的同事們就想到DNA的復(fù)制必然是一種酶的催化作用，于是決心分離出這種酶并研究其結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制。為了達(dá)到這個(gè)目的，他們分離的蛋白，然后加到體外合成系統(tǒng)中即同位素標(biāo)記的dNTP、Mg2+及模板DNA，經(jīng)過(guò)大量的工作，于1956年終于發(fā)現(xiàn)了DNA聚合酶Ⅰ（DNApolymeraseⅠ，DNApolⅠ）原來(lái)稱為Kornberg酶。以后又相續(xù)發(fā)現(xiàn)了DNApolⅡ和DNApolⅢ。開(kāi)始人們以為DNApolI是細(xì)菌中DNA復(fù)制主要的酶類，后來(lái)發(fā)現(xiàn)DNApolⅠ的突變株

【科研人不容錯(cuò)過(guò)】RNA抽提抽提經(jīng)驗(yàn)2022/11/28: 對(duì)大部分實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō)，RNA抽提比基因組DNA抽提要困難得多。事實(shí)上，現(xiàn)有的RNA抽提方法/試劑，如果用于從培養(yǎng)細(xì)胞中抽提RNA，比抽提基因組DNA更方便，成功率也更高。那為什么同樣的方法用于組織RNA的抽提，總會(huì)碰到問(wèn)題呢？組織RNA抽提失敗的兩大現(xiàn)象是：RNA降解和組織內(nèi)雜質(zhì)的殘留。關(guān)于降解問(wèn)題，首先看一下為什么從培養(yǎng)細(xì)胞中抽提RNA不容易降解?，F(xiàn)有的RNA抽提試劑，都含有快速抑制Rnase的成分。在培養(yǎng)細(xì)胞中加入裂解液，簡(jiǎn)單的混勻，即可使所有的細(xì)胞與裂解液充分混勻，細(xì)胞被徹/底裂解。細(xì)胞被

細(xì)胞需要促貼壁的條件與操作指南2022/11/28: 細(xì)胞貼壁具體與哪些物質(zhì)有關(guān)？如何促進(jìn)細(xì)胞貼壁？許多細(xì)胞必須添加促貼壁物質(zhì)才能貼壁生長(zhǎng)，促貼壁物質(zhì)一般為細(xì)胞外基質(zhì)，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。不同細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)細(xì)胞粘附的效果一樣嗎？細(xì)胞外基質(zhì)的包被濃度是什么標(biāo)準(zhǔn)？今天我們就來(lái)扒一扒那些常見(jiàn)的促貼壁物質(zhì)和包被方法~大部分來(lái)自實(shí)體組織器官的細(xì)胞都會(huì)貼壁，但不是所有的細(xì)胞在體外培養(yǎng)的情況下都會(huì)貼壁。密度大于培養(yǎng)基的細(xì)胞（絕大部分細(xì)胞）通過(guò)重力作用會(huì)沉降在底面上，這是種自然屬性，那么細(xì)胞要生存必定得改善這個(gè)環(huán)境，也是貼壁的主要原因-分泌細(xì)胞外基質(zhì)和黏附因子

關(guān)于紅細(xì)胞裂解液的使用說(shuō)明2022/11/28: 紅細(xì)胞裂解液的作用原理氯化銨是紅細(xì)胞裂解液的主要效應(yīng)物質(zhì)，氨根離子不能通過(guò)細(xì)胞膜，而其他離子可以通過(guò)，造成細(xì)胞內(nèi)外的離子濃度差異，形成了滲透壓差，外部的水分會(huì)擴(kuò)散至細(xì)胞內(nèi)，使紅細(xì)胞膨脹，達(dá)到裂解的效果。一、組織細(xì)胞樣品：1.新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個(gè)細(xì)胞懸液，離心棄去上清液；2.從4℃冰箱中取出ELS裂解液，按1:3-5的比例向細(xì)胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml細(xì)胞壓積加入3-5ml裂解液），輕輕吹打混勻；3.800-1000rpm離心5-8分鐘，離心棄去上層紅色清液；4.收集沉淀部

合成血液的制備與使用方法2022/11/28: 產(chǎn)品成分：本品由紅色燃料、表面活性劑、增稠劑和蒸餾水組成的混合物，其表面張力和粘度可以代表血液和其他體液，并具有與血液相似的顏色。使用用途：合成血液用于醫(yī)用口罩合成血液穿透性的測(cè)定?？晒┽t(yī)藥檢驗(yàn)部門(mén)、安全檢測(cè)部門(mén)等單位使用。使用原理：將定量的合成血液分別用不同的壓力以及距離沿著水平方向噴濺向被專被測(cè)口罩的一面，觀察口罩另一面合成血液的穿透性的情況。試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)：1、GB/T19083-2010：醫(yī)用防護(hù)口罩技術(shù)要求標(biāo)準(zhǔn)2、YY/T0691-2008：醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)3、YY/T0469-2011：醫(yī)用外

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