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上海雅吉生物科技有限公司
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星狀病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒2019/11/15
產(chǎn)品及特點星狀病毒(Astrovirus,AV)可以引起幼小動物產(chǎn)生腹瀉癥狀,包括哺乳動物屬和禽類屬。哺乳動物屬根據(jù)宿主的不同分為人星狀病毒、貓星狀病毒、豬星狀病毒、綿羊星狀病毒以及貂星狀病毒;禽類星狀病毒包括火雞星狀病毒、鳥腎炎病毒。目前使用的疫苗僅有用于預(yù)防雞星狀病毒疾病,為滅活苗。人類星狀病毒疾病的疫苗至今沒有研制成功,因此靈敏快捷的診斷產(chǎn)品具有重要的意義。本產(chǎn)品基于PCR原理開發(fā)。它具有下列特點:一站式,用于不需要單獨準(zhǔn)備每種成分,包括引物和對照。根據(jù)星狀病毒的保守基因序列設(shè)計的引物,具
RT-PCR實驗步驟2019/09/27
1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉(zhuǎn)錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2.RT按要求做,一般不會出太大問題。3.PCR,按常規(guī)。但如需擴(kuò)長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單改變Mg2+濃度、退火溫度能解決的。1)RT和PCR時的引物設(shè)計是不是一定要先知道目的基因的序列?必須在RT時,引物設(shè)計有3種方法即a:Random9mers;b:OligodT-AdaptorPrimer;和c:特異的下游引物。如果用a和b方法,是擴(kuò)增的所有的cDNA(理論上),還
戈氏放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒2019/09/26
戈氏放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒中英文名稱規(guī)格價格說明書Actinomycesgerencseriae戈氏放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次運(yùn)輸:低溫保存:負(fù)20度有效期:一年貨期:2-3周產(chǎn)品及特點1.即開即用,用戶只需要提供戈氏放線菌樣品。2.根據(jù)戈氏放線菌染料法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。3.靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。4.一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。5.本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診
馬鼻肺炎病毒染料法熒光定量PCR試劑盒2019/09/26
產(chǎn)品及特點馬鼻肺炎病毒(EquineRhinopneumonitisVirus,ERV)會引起馬鼻肺炎,又名馬病毒性流產(chǎn),是馬的一種急性發(fā)熱性傳染病,在自然條件下只感染馬屬動物。病馬和康復(fù)后的帶毒馬是傳染源,主要經(jīng)呼吸道傳染,消化道及交配也可傳染,可呈地方性流行,多發(fā)生于秋冬和早春。妊娠母馬感染本病時,易發(fā)生流產(chǎn);幼駒發(fā)病初期高熱,體溫高達(dá)39.5-41℃,可持續(xù)2-7天,同時可見鼻粘膜充血并流出漿液性鼻液,頜下淋巴結(jié)腫大,食欲稍減,體溫下降后可恢復(fù)正常,若發(fā)病后調(diào)教或勞役過度,易引起細(xì)菌繼發(fā)感
人單純皰疹病毒 I 型熒光定量 PCR 檢測試劑盒(染料法)2019/09/25
產(chǎn)品及特點單純皰疹病毒(HerpesSimpleViruses,HSV)屬于皰疹病毒科a病毒亞科,為雙股DNA病毒,皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,可感染人類和其他脊椎動物。對人的感染通過人與人接觸傳染。根據(jù)抗原性的差別目前把HSV分為1型和2型。1型主要由口唇病灶獲得,2型可從生殖器病灶分離到。從發(fā)生后四個月到數(shù)年被感染的人數(shù)可達(dá)人口總數(shù)的50-90%,是易感染人的一種病毒。因此對HSV-1的快速診斷具有重要的意義。本產(chǎn)品就是根據(jù)HSV-1保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量PCR產(chǎn)品。本試劑盒具
乙型肝炎病毒 cccDNA PCR 試劑盒2019/09/25
產(chǎn)品及特點乙型肝炎病毒(HBV)共價閉合環(huán)狀DNA(covalentlyclosedcircularDNA,cccDNA)是乙肝病毒前基因組RNA復(fù)制的原始模板,雖含量較少,每個肝細(xì)胞內(nèi)只有約5-50個拷貝,但對乙肝病毒的復(fù)制以及感染狀態(tài)的建立具有十分重要的意義,只有清除了cccDNA,才能*消除乙肝患者病毒攜帶狀態(tài)。因此cccDNA的檢測具有重要的臨床意義。本產(chǎn)品是基于常規(guī)PCR技術(shù)的乙肝病毒cccDNA快速檢測試劑盒。它具有下列特點:即開即用,用戶只需要提供病毒DNA模板。引物經(jīng)過精心優(yōu)化,
豬流行性腹瀉病毒檢測試劑盒(實時熒光PCR法)說明書2019/09/25
【產(chǎn)品名稱】通用名稱:豬流行性腹瀉病毒檢測試劑盒(實時熒光PCR法)英文名稱:PorcineepidemicdiarrheavirusDetectionKit(Real-TimePCRMethod)【包裝規(guī)格】25T/盒&50T/盒【預(yù)期用途】本試劑盒利用實時熒光PCR原理,定性檢測豬流行性腹瀉病毒,對豬流行性腹瀉病毒引起的疾病診斷及療效評估有重要指導(dǎo)意義?!緳z驗原理】本試劑盒針對豬流行性腹瀉病毒的高度保守區(qū)域設(shè)計特異性引物和探針,在反應(yīng)體系中含豬流行性腹瀉病毒基因組模板的情況下,PCR反應(yīng)得以
HIV-2 前病毒 PCR 試劑盒2019/09/24
產(chǎn)品及特點牛細(xì)小病毒(BovineParvovirus,BPV)會引發(fā)牛細(xì)小病毒感染,是一種接觸性傳染病,以下痢為主要癥狀,其特征是母牛生殖機(jī)能障礙,導(dǎo)致妊娠母牛感染導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎,犢牛感染則表現(xiàn)腸炎、腹瀉。牛細(xì)小病毒感染在牛群中發(fā)生比較廣泛,目前國內(nèi)外對其研究的較少,發(fā)生此病的國家也不多,本產(chǎn)品就是以染料法熒光定量PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測牛細(xì)小病毒的試劑盒,它具有下列特點:1.即開即用,用戶只需要提供樣品DNA模板。2.引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。3.提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
蜱傳腦炎病毒染料法RT-PCR試劑盒2019/09/24
產(chǎn)品及特點蜱傳腦炎病毒(Tick-borneEncephalitisVirus,TBEV)是一種RNA病毒,由蜱傳播,在春夏季節(jié)流行于俄羅斯及我國東北森林地帶,非疫區(qū)易感人被帶有病毒的蜱叮咬后,易感染發(fā)病,另外因喝生羊奶(羊感染時奶中有病毒或被蜱類污染)而被傳染,約經(jīng)8~14天潛伏期后發(fā)生腦炎,出現(xiàn)肌肉麻痹、萎縮、昏迷致死,少數(shù)*者也常肌肉麻痹。居住在森林疫區(qū)的發(fā)生腦炎,出現(xiàn)肌肉麻痹、萎縮、昏迷致死,少數(shù)*者也常肌肉麻痹,因此快速準(zhǔn)確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。本產(chǎn)品基于PCR原理開發(fā)。
乙型肝炎病毒 cccDNA PCR試劑盒HBVcccDNA2019/09/24
產(chǎn)品及特點乙型肝炎病毒(HBV)共價閉合環(huán)狀DNA(covalentlyclosedcircularDNA,cccDNA)是乙肝病毒前基因組RNA復(fù)制的原始模板,雖含量較少,每個肝細(xì)胞內(nèi)只有約5-50個拷貝,但對乙肝病毒的復(fù)制以及感染狀態(tài)的建立具有十分重要的意義,只有清除了cccDNA,才能*消除乙肝患者病毒攜帶狀態(tài)。因此cccDNA的檢測具有重要的臨床意義。本產(chǎn)品是基于常規(guī)PCR技術(shù)的乙肝病毒cccDNA快速檢測試劑盒。它具有下列特點:即開即用,用戶只需要提供病毒DNA模板。引物經(jīng)過精心優(yōu)化,
PCR實驗方法2019/09/24
RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉(zhuǎn)錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2.RT按要求做,一般不會出太大問題。3.PCR,按常規(guī)。但如需擴(kuò)長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單改變Mg2+濃度、退火溫度能解決的。1)RT和PCR時的引物設(shè)計是不是一定要先知道目的基因的序列?必須在RT時,引物設(shè)計有3種方法即a:Random9mers;b:OligodT-AdaptorPrimer;和c:特異的下游引物
掌握這 8 點令 PCR 引物設(shè)計事半功倍2019/09/24
臨門一腳,先講核心,掌握核心,引物設(shè)計任你馳騁。引物長度引物長度對反應(yīng)特異性、解鏈溫度、退火時間都有較大的影響,終影響到PCR反應(yīng)是否成功。多數(shù)情況下,引物長度約18~30bp,引物太短會導(dǎo)致非特異擴(kuò)增,太長雖然會增加特異性,但是二級結(jié)構(gòu)(如發(fā)夾結(jié)構(gòu))出現(xiàn)的概率增大。引物的解鏈溫度PCR反應(yīng)的特異性很大程度上依賴于引物的解鏈溫度(Tm值)。多數(shù)PCR反應(yīng)的解鏈溫度應(yīng)在55~60℃,如果沒有其他不穩(wěn)定因素,引物的Tm值取決于它的長度、序列組成和濃度,離子強(qiáng)度的影響可以忽略不計,因為不同的PCR反應(yīng)
MDCK細(xì)胞培養(yǎng)2019/09/20
本人具有數(shù)年的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗,期間經(jīng)歷了無數(shù)次的失敗和成功,回想起來有苦也有甜,現(xiàn)在把中國疾病預(yù)防控制中心和我自己的經(jīng)驗結(jié)合起來,制作成MDCK細(xì)胞培養(yǎng)SOP,歡迎大家參閱:一、目的MDCK細(xì)胞培養(yǎng)是分離流感病毒及相關(guān)研究實驗的基本技術(shù)。疾控中心的所有技術(shù)人員,必須按照本文件相關(guān)的操作規(guī)程進(jìn)行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術(shù)人員。三、程序(一)生物安全要求實驗室生物安全級別:BSL-1所有操作必須在BSL-1實驗室的生物安全柜里進(jìn)行。(二)材料1.生長成片的MDCK細(xì)胞2.無菌的T25細(xì)胞
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)2019/09/20
準(zhǔn)備工作(1)試管、試管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、燒杯、橡皮頭、剪刀、鑷子、紗布、棉球、酒精燈、滴管、移液器、細(xì)胞計數(shù)器、生理鹽水、PBS、雙抗(青鏈霉素)、75%酒精、95%酒精、培養(yǎng)瓶(50ml,260ml)。(2)BALB/C小鼠(4~5周齡,18~22g,雌雄不限)、胎牛血清(滅活)、DMEM-LG培養(yǎng)液(美國GIBCO)(3)針頭與注射器:4.5號、7號針頭(沖小鼠股骨、脛骨和肱骨骨髓,制單細(xì)胞懸液)。實驗前準(zhǔn)備(1)實驗室消毒,隔離衣消毒,小鼠固定架消毒。配10%F
HepG2細(xì)胞培養(yǎng)的條件2019/09/20
HepG2人肝腫瘤細(xì)胞株廣泛應(yīng)用于遺傳毒理學(xué)及病毒培養(yǎng)等方面的研究,研究肝臟疾病發(fā)病機(jī)理及其臨床應(yīng)用有著重要意義。由于其與肝細(xì)胞具有相同的生物學(xué)活性,還被用于胰島素抵抗的研究。本文對肝癌細(xì)胞培養(yǎng)的條件做一簡單綜述。1.HepG2細(xì)胞的復(fù)蘇條件1.1復(fù)蘇溫度的選擇唐孟萱等采用下述方法進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇:快速將所凍存細(xì)胞40℃水浴搖床60轉(zhuǎn)/min慢搖至其溶解,溶解后馬上轉(zhuǎn)入37℃水浴箱,手工慢搖恒溫2~3min復(fù)蘇,復(fù)蘇后800轉(zhuǎn)/min離心5min,吸去上清加入10ml含15%胎牛血清DMEM培養(yǎng)基,
什么是原代細(xì)胞、細(xì)胞株、細(xì)胞系?2019/09/20
原代細(xì)胞(primarycell)是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞,稱為原代細(xì)胞。一般認(rèn)為,培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長、繁殖和傳代,進(jìn)行細(xì)胞生命過程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問題的研究。細(xì)胞株(cellstrain)是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)細(xì)胞中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的細(xì)胞稱為細(xì)胞株。一般認(rèn)為,細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩
構(gòu)巢曲霉探針法熒光定量 PCR 試劑盒2019/09/19
產(chǎn)品及特點構(gòu)巢曲霉(Aspergillusnidulans.)屬半知菌亞門、絲孢綱、絲孢目、叢梗孢科、曲霉屬的一種真菌,分布于糧食、土壤和空氣中。曾用作真菌遺傳學(xué)研究材料。作為質(zhì)控菌種,可用于水質(zhì)檢測,化妝品檢測,食品與藥品檢測,為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。因此快速檢測構(gòu)巢曲霉具有重要意義。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測構(gòu)巢曲霉的試劑盒,它具有下列特點:1.即開即用,用戶只需要提供樣品DNA模板。2.引物和探針經(jīng)過優(yōu)
煙曲霉探針法熒光定量 PCR 試劑盒2019/09/19
產(chǎn)品及特點煙曲霉(Aspergillusfumigatus.)屬殼霉目、杯霉科、煙曲霉屬,是一種重要的致病菌,也是引起食品的一種真菌。煙曲霉的菌落生長迅速,絨狀或作一定的絮狀,暗煙綠色,老后色變得更深。此菌嗜高溫,在45℃或更高的溫度下生長茂盛。在糧食發(fā)熱霉變的中期和后期常大量出現(xiàn),促進(jìn)糧溫的升高和敗壞。煙曲霉能寄生在人、鳥類及其它脊椎動物的肺部引起結(jié)核癥。也能侵染棉鈴和蘋果等,引起果實腐爛,或寄藏于種子上。因此快速檢測煙曲霉具有重要意義。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量PCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測
動物淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的分離2019/09/18
PriCells:動物淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的分離基本方案1:灌注消化法實驗材料:1.哺乳動物胸導(dǎo)管淋巴管2.1×PBS,含青霉素100u/ml和鏈霉素100μg/ml,pH7.43.0.2%Ⅰ型膠原酶4.眼科剪,眼科鑷5.慕絲線(7號線)、細(xì)鐵絲6.離心管(15ml、50ml)實驗方法:1.處死動物后,打開胸腔,分離胸導(dǎo)管,在胸導(dǎo)管上端結(jié)扎,切取10-15cm的一段。將胸導(dǎo)管放入預(yù)冷PBS中漂洗。2.在解剖顯微鏡下,用眼科剪和眼科鑷剝除外膜的脂肪和纖維組織,然后用PBS反復(fù)沖洗管腔。3.將胸導(dǎo)管移入含
細(xì)胞原代培養(yǎng)實驗之胰酶消化法2019/09/18
實驗方法原理將動物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。因此,較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。但實際上,通常把代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。常用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細(xì)胞培養(yǎng)。實驗材料胎鼠新生鼠試劑、試劑盒1640培養(yǎng)基牛血清胰酶Hank’s液碘酒儀器、耗材培養(yǎng)箱培養(yǎng)瓶
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