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上海達(dá)為科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
小鼠腹腔注射方法2024/05/23
1.小鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側(cè)0.5cm處。2.首先采用背側(cè)保定法抓取小鼠,使其頭部稍向后仰,腹部向上,小鼠左后肢用小指固定住。3.再用75%酒精棉球消毒注射部位。4.將注射器針頭與皮膚呈45度角刺入小鼠腹腔,回抽針?biāo)?,如無回血或液體即可注入藥物。5.注射后,緩慢拔出注射器,用棉球按壓注射部位,注射完畢。注意事項(xiàng)1.注射時(shí),小鼠腹部朝上,頭處于低位,使臟器移向胸部橫隔處,以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出,注射針頭不要太粗。
小鼠尾靜脈注射方法2024/04/30
1.用專用固定裝置固定小鼠,前部有氣孔保障小鼠呼吸,后部將尾巴露出。2.小鼠尾靜脈左右兩條,使用酒精棉球擦拭消毒尾巴,擴(kuò)張血管。3.用1ml注射器,4號(hào)針頭。4.用左手拇指和食指固定住靠近尾部末端約1/3處。5.右手持注射器,針尖斜面朝上,沿與靜脈平行方向進(jìn)針。6.輕推針?biāo)?,如無阻力,即可注射藥物。7.拔出針頭前,先用干棉球按壓止血。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專
缺血性面癱動(dòng)物模型構(gòu)建2024/04/25
1.豚鼠重量220-300g,Preyer反射陽性。2.適應(yīng)性飼養(yǎng)5天后,阻斷左耳巖動(dòng)脈,手術(shù)過程如下。3.用戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉豚鼠,動(dòng)物俯臥位。4.沿耳廓前上基底切開皮膚,暴露顳肌。5.翻開顳肌暴露顳骨鱗部(上鼓室氣房的外側(cè)壁)。6.用牙科鉆小心打開上鼓室氣房的外側(cè)壁,暴露上鼓室氣房。7.以錘砧復(fù)合體和上半規(guī)管隆凸為骨性標(biāo)志,確認(rèn)面神經(jīng)管和巖動(dòng)脈的部位。8.巖動(dòng)脈走行于巖骨嵴內(nèi),用小型牙科鉆輕輕鉆除巖動(dòng)脈上方的骨質(zhì)。9.以看見點(diǎn)狀出血為巖動(dòng)脈鉆出的標(biāo)志,即巖動(dòng)脈阻斷。10.術(shù)畢,縫合切口。
小鼠顱內(nèi)動(dòng)脈瘤模型的建立2024/04/25
1.雄性C57BL/6小鼠,10周齡。2.小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,行左頸總動(dòng)脈和右腎動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)。3.常規(guī)麻醉消毒后,分離左側(cè)頸總動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎,然后縫合頸部皮膚。4.腹部右側(cè)消毒后,分離右腎動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎,然后關(guān)腹;待小鼠蘇醒后放回飼養(yǎng)籠繼續(xù)飼養(yǎng)。7.一周后,麻醉小鼠,固定在立體定位儀上,暴露顱骨,確認(rèn)Bregma點(diǎn)。8.在Bregma點(diǎn)前1.2mm、右側(cè)0.7mm的位點(diǎn)轉(zhuǎn)孔,顱平面下深度4.7mm的位置注射彈性蛋白酶到大腦基底池。9.彈性蛋白酶以0.5μl/min的速度,注射2.5μl(35mU),
腦積水大鼠模型的建立2024/04/25
1.雄性SD大鼠、8周齡,戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉。2.大鼠頭頸部皮膚去毛后,固定在立體定位上,常規(guī)消毒。3.在頸部后面的皮膚上做一個(gè)中線切口,鈍性分離肌肉,暴露寰枕膜。4.微量注射器進(jìn)入寰枕膜失去阻力后停針,注入0.02mL無菌高嶺土懸浮液。5.注射速度6ul/s,注射后停針10min。6.拔針后,用醫(yī)用耳腦膠封閉針眼,縫合切口,術(shù)后抗感染治療。7.術(shù)后每天給大鼠稱重并監(jiān)測(cè)其神經(jīng)功能缺陷。8.大鼠術(shù)后3周,經(jīng)MRI檢查確認(rèn)模型成功后,取其腦組織,4%多聚甲醛固定。9.常規(guī)HE染色,光鏡觀察,可看
小鼠腦缺血再灌注損傷模型構(gòu)建2024/04/25
1.體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠,用5%異氟醚深度麻醉小鼠,然后2.5%異氟醚維持麻醉。在頸部中線切開一個(gè)切口。2.分離右側(cè)的頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)。右側(cè)的頸總動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎。3.分離右側(cè)的頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,右側(cè)的頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎;右側(cè)的頸外動(dòng)脈頭端結(jié)扎,近心端掛線備用。4.隨后,用無菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動(dòng)脈上做一個(gè)小洞,然后插入線栓,近心端掛線適度的系牢插入右側(cè)頸外動(dòng)脈的線栓,以防止血從小洞中流出;松開右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)的結(jié)扎線,輕輕送入線栓到大腦中動(dòng)脈,當(dāng)感覺到阻力時(shí)停止,系
小鼠心肌梗死模型2024/04/13
雄性C57/B6小鼠小鼠常規(guī)麻醉,左胸前部剃毛,消毒。在左胸上方,做一個(gè)小的皮膚切口(1.2cm),并進(jìn)行荷包縫合,然后分離胸大肌和胸小肌后,暴露第4肋間間隙。在第4肋間間隙,用一個(gè)蚊式止血鉗打開胸膜和心包;用夾子略微打開,心臟平穩(wěn)而輕柔地從孔中“彈出”??p合和結(jié)扎距左冠狀動(dòng)脈前降支起點(diǎn)約3mm的位置;左心室前壁變得蒼白,結(jié)扎被認(rèn)為是成功。結(jié)扎后,立即將心臟放回原位,然后手動(dòng)排空空氣,關(guān)閉肌肉和胸腔皮膚,通過先前放置的荷包線縫合。在3-5分鐘內(nèi)完成上述過程。記錄小鼠心電圖,將針電極插入四肢皮下作
LPS誘導(dǎo)急性肺損傷模型2024/04/13
脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要生物活性成份,已廣泛用于誘導(dǎo)急性肺損傷模型。此模型與人類急性肺損傷的病理特征相似。BALB/c小鼠,18-20g。小鼠常規(guī)麻醉后,模型組氣道內(nèi)滴注3mg/kgLPS(Escherichiacoli055:B5;Sigma),溶解在50μl的生理鹽水中,對(duì)照組小鼠氣管內(nèi)滴注等體積的生理鹽水。藥物進(jìn)入氣道后,立即通過直立旋轉(zhuǎn)等手段,使藥物均勻分布在肺組織。24小時(shí)后,小鼠犧牲,取血、肺泡灌洗液和肺組織。肺組織做H&E染
大鼠灌胃操作2024/04/13
一、用左手固定大鼠的頭部,使其頭部和頸部成一直線,方便灌胃針頭進(jìn)入口腔。二、將灌胃針從大鼠的左側(cè)嘴角插入,壓住舌頭,抵住上顎,輕輕向內(nèi)推進(jìn),進(jìn)入食管后會(huì)有一個(gè)刺空感。三、在灌胃針插入過程中,應(yīng)緊貼咽后壁進(jìn)針,避免損傷食道。若灌胃針進(jìn)入氣管,大鼠會(huì)劇烈掙扎。四、觀察大鼠的反應(yīng),如無過度掙扎,可嘗試推注藥物。如阻力過大或動(dòng)物反應(yīng)劇烈,可退針后插入。五、一般灌胃針插入深度:大鼠4-6cm。六、一次灌胃量:大鼠1-2ml/100g。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)
小鼠灌胃操作2024/04/13
一、左手固定小鼠,確保其身體成一直線,頭部固定,避免活動(dòng)。二、灌胃針從小鼠左側(cè)嘴角進(jìn)入,壓住舌頭,抵住上顎,輕輕向內(nèi)推進(jìn),進(jìn)入食管后會(huì)有一個(gè)刺空感。三、在灌注藥液時(shí)需注意小鼠是否有強(qiáng)烈掙扎現(xiàn)象。四、一般灌胃針插入深度:小鼠2-3cm。五、一次灌胃量:0.1-0.2ml/10g。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)
大鼠骨髓來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞體外培養(yǎng)方法2024/03/28
1.SD大鼠,250g,通過頸椎脫位處死大鼠,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。2.打開皮膚,暴露、收集股骨,無菌狀態(tài)下移除附著的肌肉和組織。3.并轉(zhuǎn)移股骨至預(yù)冷含雙抗的PBS中,洗滌三次。冰上操作。4.切斷股骨骨骺,使用5mlPBS,1ml注射器針頭沖洗,沖洗液由棕色變成粉紅色即可(股骨變白)。沖洗后,用1ml注射器吹打3-5次。5.70um濾網(wǎng)過濾,棄去篩網(wǎng)。使用15ml離心管,先加入分離液,然后緩慢加入濾過的懸液。20℃環(huán)境下,600g離心25min。6.離心后,離心管中
成年小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞原代培養(yǎng)2024/03/28
1.C57小鼠,8-10周,通過頸椎脫位處死,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。2.使用眼科剪和鑷子,使髖關(guān)節(jié)脫臼,保持股骨頭完整。3.用止血鉗去除每個(gè)股骨頭的軟骨帽,將組織放入含2%雙抗的PBS中。4.用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍,將關(guān)節(jié)軟骨小心移到2ml離心管中。5.用眼科剪刀將軟骨帽剪成約1mm3的碎片,加入3ml預(yù)熱的CollagenaseD(1.5mg/ml)。6.放入37℃、80rpm的搖床中進(jìn)行第一次消化,時(shí)間2h。7.第一次消化結(jié)束后,加入含血清的培養(yǎng)
新生小鼠原代心肌成纖維細(xì)胞的分離與培養(yǎng)2024/03/28
1.準(zhǔn)備0-1天內(nèi)的C57BL/6J小鼠新生鼠。2.用溫的無菌去離子水,輕輕擦拭每只新生鼠。3.用70%的乙醇去除新生鼠身體上的污染物。4.斷頭,取心臟,心臟置于冰的PBSG溶液中。5.除去血液和非心臟組織。6.剪碎心臟組織。7.加入胰酶-膠原酶消化液,每只新生鼠75ul。8.在37°C的搖床培養(yǎng)箱中,以250rpm/5min,消化心肌組織。9.輕輕渦旋,然后離心10秒,丟棄第一次消化的上清液。10.開始第二次消化,250rpm/5min后,輕輕渦旋,然后離心10秒,收集上清液到2倍體積的胎牛血
乙二醇+氯化銨誘導(dǎo)的腎結(jié)石模型2024/03/28
在適應(yīng)環(huán)境一周后,大鼠每天灌胃給藥2ml(1%乙二醇和1%氯化銨),連續(xù)4周,誘導(dǎo)結(jié)石形成。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),收集大鼠24小時(shí)尿液,然后犧牲大鼠,取血和腎組織。1.血清和尿液的生化分析;2.腎小球?yàn)V過率的測(cè)定;3.腎臟的組織學(xué)和免疫組化分析。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,助理研究員(
上海達(dá)為科生物科技有限公司病理平臺(tái)介紹2024/03/13
病理平臺(tái):硬件:擁有全自動(dòng)免疫組化儀、生物安全柜、熒光顯微鏡、普通光學(xué)顯微鏡、冰凍切片機(jī)、石蠟切片機(jī)等;服務(wù):主要包含樣本處理及保存、樣本包埋、切片、染色,讀片分析等;項(xiàng)目:免疫組織化學(xué)染色、HE染色、免疫熒光染色、特殊染色:如Masson、PAS、甲苯胺藍(lán)染色、番紅-固綠染色、油紅O染色、吉姆薩染色、尼氏染色等。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)
上海達(dá)為科生物科技有限公司分子平臺(tái)介紹2024/03/13
分子平臺(tái)硬件:擁有全套分子生物實(shí)驗(yàn)儀器,如Westernblot實(shí)驗(yàn),ABI實(shí)時(shí)定量PCR儀、臺(tái)式/柜式離心機(jī)、凝膠成像系統(tǒng)、酶標(biāo)儀、分光光度計(jì)、微生物培養(yǎng)室(包括超凈工作臺(tái)、恒溫?fù)u床)等;服務(wù):主要包含DNA/RNA/蛋白提取及測(cè)定、ELISA/生化檢測(cè)、DNA/RNA/蛋白之間互作試驗(yàn)、質(zhì)粒構(gòu)建、分子克隆、基因編輯等;項(xiàng)目:qRT-PCR、Westernblot、ELISA、瓊脂糖電泳、基因編輯、分子克隆、質(zhì)粒構(gòu)建、DNA-蛋白互作、蛋白-蛋白互作、RNA-蛋白互作、FISH等。上海達(dá)為科生
上海達(dá)為科生物科技有限公司動(dòng)物中心平臺(tái)介紹2024/03/13
動(dòng)物中心硬件:擁有1600平方米的SPF級(jí)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,以及200平方米的常規(guī)清潔級(jí)動(dòng)物房,滿足多種動(dòng)物模型的構(gòu)建,同時(shí)設(shè)有動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè)平臺(tái):如水迷宮、曠場(chǎng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)、高十字架、平衡木等;上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,致力于動(dòng)物
上海達(dá)為科生物科技有限公司細(xì)胞平臺(tái)介紹2024/03/13
細(xì)胞平臺(tái)硬件:擁有人、小鼠、大鼠來源的多種原代或永生化細(xì)胞株儲(chǔ)存的細(xì)胞庫,配備雙人操作的生物安全柜,進(jìn)口培養(yǎng)箱;服務(wù):主要包含原代細(xì)胞分離、永生化細(xì)胞株培養(yǎng)、耐藥株篩選、穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建以及細(xì)胞功能相關(guān)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)、高清顯微拍照等;項(xiàng)目:CCK-8、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、流式細(xì)胞術(shù)、原代細(xì)胞分離及培養(yǎng)、穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選及驗(yàn)證、細(xì)胞侵襲/遷移/劃痕、平板克隆、破骨/成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化、細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn)、彗星實(shí)驗(yàn)等。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研
達(dá)為科生物項(xiàng)目2024/02/29
達(dá)為科生物深耕生命科學(xué)領(lǐng)域十余載,積累了豐富的理論與實(shí)操經(jīng)驗(yàn),可根據(jù)不同的研究方向制定相應(yīng)的科研規(guī)劃,助力更好的科研成果產(chǎn)出。服務(wù)內(nèi)容發(fā)病機(jī)制研究:根據(jù)研究?jī)?nèi)容,設(shè)計(jì)(優(yōu)化)方案,完成實(shí)驗(yàn)服務(wù)內(nèi)容,闡述疾病的調(diào)控機(jī)制;靶向藥物設(shè)計(jì):根據(jù)靶點(diǎn)信息,預(yù)測(cè)調(diào)解位點(diǎn),通過虛擬篩選,體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,協(xié)助論文發(fā)表和專丨利申請(qǐng);新藥研發(fā)服務(wù):將篩選的單體進(jìn)行藥效學(xué)分析,推進(jìn)成果產(chǎn)業(yè)化,完成臨床前CRO服務(wù),協(xié)助專丨利申請(qǐng),協(xié)助市級(jí)或國丨家丨級(jí)發(fā)明獎(jiǎng)等獎(jiǎng)項(xiàng)申報(bào);科室建設(shè)服務(wù):根據(jù)不同科室,從機(jī)制研究、藥物研發(fā)、
雨蛙素誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型2024/02/29
1、雨蛙素誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型造模原理過量給予雨蛙素,通過CCK受體,刺激胰腺腺泡細(xì)胞過度分泌,并使細(xì)胞內(nèi)的胰蛋白酶原和溶酶體水解酶分離障礙,經(jīng)組織蛋白酶B依賴性的方式激活,胰酶的活性又能夠進(jìn)一步導(dǎo)致酶原激活,引起一系列蛋白酶活性導(dǎo)致的細(xì)胞損害。胰腺組織自我消化引起的炎癥反應(yīng)募集炎癥細(xì)胞,釋放炎癥因子,進(jìn)一步引起局部甚至全身性的嚴(yán)重炎癥反應(yīng)。2、雨蛙素誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型造模方法在誘導(dǎo)急性胰腺炎之前,大鼠禁食18小時(shí)。對(duì)照組大鼠給予生理鹽水,模型組大鼠給予雨蛙素注射液,誘導(dǎo)劑量為(20μg/kg
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