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血清的保存方式2021/02/01: 血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn)：（1）生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中需要長期保存的血清儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預(yù)留體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多，而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作

質(zhì)粒圖譜如何“瞅”2021/02/01: 每當(dāng)拿到一個(gè)質(zhì)粒圖譜，是不是一下就有點(diǎn)懵了？這些ori、RBS、tet是什么？這些箭頭代表什么，轉(zhuǎn)錄的方向嗎？不要著急，劍鈍生物把這些告訴你，也許會(huì)解決你的困惑。質(zhì)粒和載體傻傻分不清楚質(zhì)粒(Plasmid)是附加到細(xì)胞中的非細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細(xì)胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型。載體即要把一個(gè)有用的基因（目的基因——研究或應(yīng)用基因）通過基因工程手段送到生物細(xì)胞（受體細(xì)胞），需要運(yùn)載工具（交通工具）攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞，這種運(yùn)載工

AD動(dòng)物模型構(gòu)建2021/02/01: 一、服務(wù)簡介動(dòng)物:大鼠，SPF級(jí)，健康，雄性造模方法:1,經(jīng)腹腔注射麻醉大鼠;剃除頭頂部毛發(fā)后固定于腦立體定位以上，手術(shù)區(qū)皮膚消毒，切開皮膚，暴露顱骨。2,參照大鼠腦立體定位圖譜(國內(nèi)多選用包新民的大鼠腦立體定向圖譜)，在前后囟2mm、中線外1mm處，用牙科鉆鑿開顱骨，切開硬腦殼膜,用刀置于上述部位的腦表面，降刀4.5mm,外移1mm,再降刀1mm，外移1.5mm,上下抽動(dòng)刀20次，以*切斷穹隆海馬傘。可行單側(cè)，也可行雙側(cè)穹隆海馬傘切除。術(shù)后連續(xù)應(yīng)用頭孢唑啉鈉(50mg/kg體重，ip)或慶大霉

大鼠不同程度腦損傷模型2021/01/28: 大鼠不同程度腦損傷模型(1)復(fù)制方法健康雄性大鼠，體重為230～260g。采用改進(jìn)的Feeney自由落體硬膜外撞擊方法。損傷裝置由底板、固定支架、垂直導(dǎo)桿、下落和聚乙烯撞擊圓錐組成。撞擊圓錐頭端直徑為4mm、高為2.5mm。經(jīng)腹腔注射水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)麻醉。將其頭部固定于立體定向儀上，剪去頂部毛發(fā)，手術(shù)區(qū)域皮膚消毒。沿中線左側(cè)切開頭皮，分離骨膜，用牙科鉆于中線旁2mm、緊挨冠狀縫后開一直徑5mm的圓形窗，硬膜保

兔腦血管痙攣模型2021/01/28: 兔腦血管痙攣模型(1)復(fù)制方法新西蘭兔，雌雄不拘，體重為2.0～2.5kg。1)自體血注入經(jīng)耳緣靜脈注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按25～30mg/kg體重的劑量)或20％烏拉坦(按5ml/kg體重的劑量)麻醉，左側(cè)臥位固定，剪除手術(shù)區(qū)域毛發(fā)，皮膚消毒。切口垂直于顴弓并經(jīng)其中點(diǎn)，上達(dá)顳上線，下達(dá)顴弓下0.5cm，一次切開直達(dá)顴骨鱗部，鉆孔后擴(kuò)大成窗，充分顯露中顱窩底。剪開硬膜，抬起顎葉，吸除腦脊液，使腦葉塌陷。沿蝶骨大翼探至視神經(jīng)處，將塑料導(dǎo)管剪成1.5cm長，管端放在視神經(jīng)外側(cè)。導(dǎo)管另一端固定在顳肌

記憶障礙動(dòng)物模型介紹2021/01/22: 記憶障礙動(dòng)物模型引起動(dòng)物的記憶障礙有多種方法，包括電休克、缺血缺氧、某些化學(xué)藥品等。對記憶障礙的測定則采用學(xué)習(xí)記憶的實(shí)驗(yàn)方法。在此先介紹常用的學(xué)習(xí)記憶實(shí)驗(yàn)法。1學(xué)習(xí)、記憶實(shí)驗(yàn)法(learnａndmemorytest)人們和動(dòng)物的精神活動(dòng)、心理狀態(tài)都是無法直接觀察到的。為了研究這些活動(dòng)的發(fā)生過程，科學(xué)家們只能根據(jù)可觀察到的刺激反應(yīng)進(jìn)行推測。對腦內(nèi)記憶過程的研究只能從人類或動(dòng)物學(xué)習(xí)或執(zhí)行某項(xiàng)任務(wù)后間隔時(shí)間，測量他們的操作成績或反應(yīng)時(shí)間，由此來衡量這些過程的編碼形式、儲(chǔ)存量、保持時(shí)間以及它們所依賴的條

行為學(xué)-水迷宮2021/01/15: 1.將水迷宮加入適當(dāng)?shù)乃?，水溫控制?5±1℃。2.實(shí)驗(yàn)前把動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.一階段：（定位航行）將小鼠頭對著墻壁依次放入四個(gè)象限水迷宮進(jìn)行實(shí)驗(yàn)（所有小鼠需全部做完后換下一象限）。若動(dòng)物在60s內(nèi)登上平臺(tái)區(qū)域，則結(jié)束。若動(dòng)物在60s內(nèi)未登上平臺(tái)區(qū)域，則用木棍指引大鼠游上平臺(tái)，并停留30s。每只小鼠每天訓(xùn)練4次，訓(xùn)練天數(shù)為4天。5.每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需用干毛巾擦拭，必要時(shí)需要使用電吹風(fēng)吹干。6.二階段（空間探索）：待一象限到第四象限全部做完后，將水迷宮中的平臺(tái)撤走，將小鼠

ELASA檢測方法2021/01/15: ELASA：用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸

免疫沉淀實(shí)驗(yàn)2021/01/13: 一、服務(wù)介紹免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是指利用抗體與抗原間的特異性結(jié)合特性，將抗原（我們感興趣的靶蛋白）-抗體復(fù)合物從樣品中分離出來，達(dá)到初步分離純化靶蛋白的目的。之后，樣品可以再進(jìn)行Westernblot分析。二、實(shí)驗(yàn)原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應(yīng)達(dá)到純化，定性檢測蛋白的目的，即在蛋白質(zhì)提取液中加入與抗原（靶蛋白質(zhì)）特異性結(jié)合的抗體，抗體與抗原結(jié)合后形成免疫復(fù)合物，再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯(lián)的瓊脂糖珠子孵育，通過離心得到免疫復(fù)合物再經(jīng)過純化，洗脫后

深度水解蛋白的無乳糖奶粉對無菌大鼠的培育有何作用2021/01/13: 目的無菌大鼠的培育中,出生后飼喂的人工配制乳對于無菌大鼠的培養(yǎng)至關(guān)重要。深度水解蛋白的無乳糖奶粉,便于嬰幼兒吸收,減少了各種消化不良和過敏反應(yīng),那么在無菌大鼠使用的奶中加入這種奶粉是否會(huì)對無菌大鼠的培育有積極的作用,并且檢測飼養(yǎng)成功的無菌大鼠的生化指標(biāo)。方法使用清潔級(jí)的SD大鼠,確定臨產(chǎn)期,摘除*宮后,在隔離器內(nèi)剝離大鼠幼崽,使用人工方法哺乳至22d離乳,記錄體重和生存率。使用的配方奶中,加入深度水解蛋白無乳糖奶粉的為實(shí)驗(yàn)組,對照組中加入全價(jià)配方奶粉。對培育成功的無菌大鼠在第8周時(shí)檢測血生化指標(biāo)

異丙腎上腺素誘導(dǎo)大鼠特異性心肌缺血模型2021/01/12: 目的觀察皮下注射不同天數(shù)異丙腎上腺素（1mg/kg體質(zhì)量）誘發(fā)大鼠特異性心肌病所引起心肌組織切片HE染色、VEGF（血管內(nèi)皮生長因子）、FCF（成纖維細(xì)胞生長因子）表達(dá)及心電圖T波的變化。方法除空白組外各組大鼠皮下多點(diǎn)注射異丙腎上腺素（1mg/kg），分別為連續(xù)皮下多點(diǎn)注射異丙腎上腺素（1mg/kg）2d組、連續(xù)皮下多點(diǎn)注射異丙腎上腺素（1mg/kg）4d組、連續(xù)皮下多點(diǎn)注射異丙腎上腺素（1mg/kg）6d組。給藥1周后，大鼠麻醉，測心電圖，取心臟，采用HE染色觀察大鼠心肌細(xì)胞損傷程度的變化，采

LPS誘導(dǎo)SD大鼠膝關(guān)節(jié)成纖維樣滑膜細(xì)胞炎癥模型建立2021/01/12: 目的建立SpragueDawley(SD)大鼠的正常膝關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞原代培養(yǎng)方法及脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)誘導(dǎo)成纖維樣滑膜細(xì)胞(fibroblast-likesynoviocytes,FLS)炎癥模型。方法選取80~120gSPF級(jí)幼年SD大鼠,分離其滑膜組織,原代培養(yǎng)至第3代,用組織化學(xué)染色法和EdU法檢測FLS蛋白標(biāo)志物vimentin和增殖功能。同時(shí),用滑膜組織作對照,檢測第3代至第8代原代培養(yǎng)FLS的特征蛋白表達(dá),篩選具有生理功能的高純度且可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的F

慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的研究2021/01/12: 目的：通過煙熏法、蛋白酶滴注及兩者相結(jié)合的方法構(gòu)建大鼠慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydisease,COPD)模型,并從炎癥水平、影像及病理等方面評價(jià)造模效果,對三種建模方法進(jìn)行比較。方法使用煙熏、蛋白酶滴注及兩者相結(jié)合的方法進(jìn)行COPD大鼠造模,每組大鼠分別為60只、30只、30只,同時(shí)設(shè)置對照組20只。每周對大鼠進(jìn)行體重測量。煙熏組及對照組大鼠于造模24h,1、2、4、8、12、16、20、24周,蛋白酶組及蛋白酶+煙熏組大鼠于造模24h,1、2、4

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的重要性2020/12/31: 動(dòng)物試驗(yàn)（又名動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或者動(dòng)物研究），當(dāng)今有爭議的話題之一，是指在科學(xué)研究中使用動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。雖然使用動(dòng)物來研究人類成為流行是在1859年查爾斯.達(dá)爾文提出進(jìn)化論之后，但是文獻(xiàn)記載早在公元前4世紀(jì)，希臘杰出古典哲學(xué)家亞里士多德就已經(jīng)開始使用活體動(dòng)物做試驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)(AnimalExperiment)指在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，為了獲得有關(guān)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等方面的新知識(shí)或解決具體問題而使用動(dòng)物進(jìn)行的科學(xué)研究。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)必須由經(jīng)過培訓(xùn)的、具備研究學(xué)位或?qū)I(yè)技術(shù)能力的人員進(jìn)行或在其指導(dǎo)下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)發(fā)展的終目的，就

建立小鼠學(xué)習(xí)記憶損傷模型的有效方法2020/12/30: 目的通過避暗和Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)研究建立小鼠學(xué)習(xí)記憶損傷模型的有效方法。方法分別在小鼠避暗電*訓(xùn)練之前20min腹腔注射東莨菪堿1mg/kg體質(zhì)量，電*訓(xùn)練結(jié)束之后立即皮下注射亞硝酸鈉90mg/kg和下次電*測試之前15min給小鼠灌服35%乙醇0.1mL/10g，建立記憶獲得、記憶鞏固和記憶再現(xiàn)障礙模型，測定各組小鼠在電*訓(xùn)練后6h、24h、30h，48h后的避暗潛伏期、錯(cuò)誤次數(shù)和探頭次數(shù)等多項(xiàng)指標(biāo)，評價(jià)三種記憶障礙模型方法各指標(biāo)的敏感性和合適測試時(shí)間。小鼠分別腹腔注射東莨菪堿1mg/kg

人類疾病模型制作原則2020/12/30: 一、人類疾病動(dòng)物模型應(yīng)具有的特點(diǎn)建立疾病模型的目的是為了防治人類疾病。因此，疾病模型研究結(jié)果的可靠程度取決于模型與人類疾病的相似或可比擬的程度。一個(gè)好的疾病模型應(yīng)具有以下特點(diǎn)：①能夠再現(xiàn)所要研究的人類疾病，動(dòng)物疾病表現(xiàn)應(yīng)該與人類疾病相似；②動(dòng)物能重復(fù)產(chǎn)生該疾病，要能在兩種動(dòng)物體內(nèi)復(fù)制該??；③動(dòng)物背景資料完整，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格，生命周期要滿足實(shí)驗(yàn)需要；④動(dòng)物要價(jià)廉、來源充足、便于運(yùn)送；⑤盡可能選用小動(dòng)物。如果復(fù)制出現(xiàn)率不高，則人類疾病動(dòng)物模型價(jià)值不高；若一種方法可復(fù)制多種模型，無專一性，也會(huì)降低該模型

如何寫出高質(zhì)量的論文討論部分？2020/12/30: 討論是一篇*的一部分，也是一篇的核心部分。通常來說，討論部分是審稿專家和讀者重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容，所以，寫好討論部分十分重要。那么，如何寫一個(gè)高質(zhì)量的討論部分呢？1、以本研究結(jié)果為依據(jù)討論的核心是用自己研究得到的結(jié)果，輔以引用同行的研究結(jié)果來闡述自己的觀點(diǎn)、論點(diǎn)。因此要緊緊圍繞相關(guān)的學(xué)術(shù)觀點(diǎn)，以研究結(jié)果(results)為依據(jù)，通過科學(xué)的推理闡述自己的觀點(diǎn)，得出科學(xué)的結(jié)論(conclusion)。引證別人的觀點(diǎn)、結(jié)果是十分的，但是決不能喧賓奪主，本末倒置，把自己的主要觀點(diǎn)淹沒于旁征博引之中。在這個(gè)過程

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