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心肌球源性心肌干細胞聯(lián)合心室肌細胞外基質(zhì)治療大鼠急性心肌梗死效果2022/04/17: 目的：擬研究心室肌細胞外基質(zhì)能否促進植入心肌梗死心肌組織內(nèi)的心肌球源性心肌干細胞（CDC）向心肌細胞，血管內(nèi)皮及血管平滑肌細胞分化，改善大鼠心肌梗死后的心臟結(jié)構(gòu)及功能。方法：心肌組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)CDC，脫細胞法配置ECM，結(jié)扎Wistar大鼠前降支建立急性心肌梗死模型。分別向心肌梗死心肌組織內(nèi)注入IMDM（I組），ECM懸液（E組），含106CDCs的IMDM溶液（IC組），含106CDCs的ECM懸液（EC組），每組心肌梗死大鼠6只。3周后心臟彩超評估心臟功能，Masson染色分析心肌纖維化陽

觀察運輸對新西蘭兔血液常規(guī)和生化指標的影響。2022/04/15: 目的：觀察公路運輸對新西蘭兔血液常規(guī)和生化指標的影響。方法：選用12只健康普通級新西蘭兔進行2h公路運輸，分別在運輸前，運輸后0、24、48、72、96h采集血液獲得檢測樣本。通過血液分析儀檢測血常規(guī)指標：白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白量（HGB）、紅細胞壓積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板（PLT）。通過全自動生化分析儀檢測：肝功能指標：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、白蛋白（ALB）、總蛋白（T

不同階段幼齡SD大鼠血液指標差異的探討2022/04/15: 目的本研究旨在采集不同發(fā)育階段幼齡SD大鼠的血液指標，建立相應(yīng)的背景數(shù)據(jù)，為開展兒科藥物安全性評價提供參考。方法分別收集3、6、8、12和16周齡共計約200余只幼齡SD大鼠的血樣，采用全自動血球計數(shù)儀、生化分析儀、測定相應(yīng)指標。結(jié)果從各指標參數(shù)結(jié)果看，6周齡組大鼠的血液指標與16周齡大鼠相比RBC、HGB、TP、BUN等大部分指標存在一定差別，12周齡組大鼠的血液指標與16周齡大鼠相比WBC、HGB、BUN等大部分指標無差異。結(jié)論結(jié)果表明不同周齡階段的幼齡SD大鼠的血液指標具有一定的時間相關(guān)性

小鼠慢性肝損傷周期性病變研究2022/04/15: 目的研究四氧化碳（CCL4）誘導(dǎo)的小鼠慢性肝病模型肝損傷變化特征，并探討其在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用。方法正常BALB/c小鼠常規(guī)飼養(yǎng)1周后，腹腔注射0.5%CCL4溶液（10μL/g，1次/3天，持續(xù)10周）。注射第2、4、6、8、10周后，取小鼠血清檢測ALT、AST，同時取肝臟固定后進行HE、Masson染色，觀察小鼠肝臟損傷變化。結(jié)果CCL4溶液注射2周時，肝細胞損傷以變性為主，出現(xiàn)大量炎性細胞浸潤和少量膠原蛋白沉積，ALT、AST輕度升高;4周時，肝細胞損傷以壞死為主（P結(jié)論低劑量CCL4誘導(dǎo)

腦卒中后抑郁癥模型2022/03/25: 動物：雄性SD大鼠，體重210–250g建模：MCAO（大腦中動脈阻塞）+CMS（慢性溫和性刺激）1.先做MCAO模型，參照大鼠腦梗模型；2.9種不同的應(yīng)激源，連續(xù)18天的晝夜隨機順序如下：食物和水剝奪（20小時，然后進行蔗糖偏好試驗）、水分剝奪（18小時，然后1小時面對空瓶子），45?保持架傾斜（17小時），通宵照明（燈亮共36小時）、污籠（200毫升水，100克鋸屑墊層，21小時），在4?C水中游泳（5分鐘）、足部電擊（持續(xù)時間為每分鐘5秒，持續(xù)30分鐘）、夾尾（1分鐘）、成對關(guān)在籠中（2小

更年期抑郁癥模型2022/03/25: 大鼠適應(yīng)環(huán)境2周后，開始卵巢摘除術(shù)1.大鼠常規(guī)麻醉，固定。2.卵巢摘除術(shù)：7周雌性Wistar大鼠（200-220g）于最末肋骨下，腋中線和距脊柱外側(cè)2cm交叉處剪除長毛，常規(guī)消毒后，切開皮膚和背肌，用眼科鑷夾卵巢，分離脂肪團，結(jié)扎血管，切除卵巢，縫合肌層和皮膚。3.術(shù)后回復(fù)2周。4.慢性不可預(yù)知性溫和刺激(CUMS)：在11種壓力源中，每天使用兩種，持續(xù)6周。按隨機順序：連續(xù)通宵照明（12小時），間歇性照明（燈亮1小時和熄滅1小時；3小時），成對籠（每個籠中2-3只動物；3小時），空籠飼養(yǎng)（1

小鼠EAE模型制備2022/03/18: 適應(yīng)性喂養(yǎng)實驗小鼠自購回后保持其自由飲水、進食,溫度23-25°C,動物房12h-12h晝夜交替,適應(yīng)性喂養(yǎng)-周后進入實驗。EAE造模實驗鼠稱重,腹腔注射3.5%水合氯醛麻醉(0.5m/100g),背部備皮,酒精棉球消毒后各小鼠分別于背部中線兩側(cè)皮下4點注射抗原乳劑(MOG35-55)0.2ml.免疫當(dāng)天(第0d)及48h(第2d)分別給模型各組小鼠腹腔注射PTX每只500ng(0.2ml)。誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生EAE。模型評價:抑郁模型可用于抗抑郁藥物的篩選及抑郁病理生理機制的研究因其采用的刺激因子類

裸鼠成瘤模型2022/03/18: 動物適應(yīng)性喂養(yǎng)動物房12h~12h晝夜交替,保持動物自由飲水、進食,保持室溫23~25C,-周后進入實驗。裸鼠皮下接種對接種環(huán)境消毒,用注射器進行細胞重懸,酒精棉球?qū)β闶笞⑸洳课幌竞?取對數(shù)生長期的細胞,制成濃度為1x107/ml的細胞懸液,按照分組進行接種，織裸鼠于右腋皮下緩慢接種150μl細胞懸液。拔針后迅速用針頭將細胞聚集,防止細胞液外漏。成瘤觀察與測量皮下接種后,每天觀察裸鼠健康狀態(tài)及腫瘤生長情況;待成瘤后,每2天測量腫瘤長徑與短徑并計算腫瘤體積(腫瘤體積=0.52x長徑x短徑2)。

脂多糖（LPS）致膿毒血癥急性肺損傷大鼠模型2022/03/11: 動物模型名稱：脂多糖（LPS）致膿毒血癥急性肺損傷大鼠模型動物的種屬、品系：SD大鼠動物性別：雄性動物年齡：成年動物體重：160~200g模型制備信息制備環(huán)境：屏障環(huán)境制備方法：脂多糖（LPS）誘導(dǎo)。用碘伏消毒大鼠腹部皮膚，用棉花擦除碘伏，按10mg/kg體重一次腹腔注射LPS藥液。制備周期：1周判定指標：①炎癥因子含量增加；②肺組織含水量增加；③肺臟組織病理學(xué)改變：膿毒癥6小時：肺泡壁毛細血管擴張、充血，肺泡擴張不均勻，部分肺泡萎陷，肺泡壁明顯增厚，間質(zhì)見多形核細胞浸潤。膿毒癥12小時：肺泡壁

戊四氮點燃小鼠癲癇模型簡介2022/03/04: 戊四氮（Pentylenetetrazole，PTZ）是一種高度敏感的化合物，有毒物質(zhì)；小心處理。1.將2mg/mLPTZ溶解在無菌0.9%（w/v）NaCl中。在使用當(dāng)天準備PTZ。2.對于野生型C57BL/6小鼠，試驗建議劑量為30-35mg/kg。對PTZ的敏感性取決于使用的小鼠品系，注射劑量因?qū)嶒災(zāi)康亩悺?.服用PTZ后觀察動物行為30分鐘，并對異常行為進行分類和評分。如果可能，觀察動物24小時，或注射后至少再觀察6-10小時，特別是在癲癇發(fā)作嚴重時得分達到3分或以上。4.每隔一天注射

束縛應(yīng)激引起的抑郁模型2022/03/04: 動物雄性成年C57BL/6小鼠（8-16周齡；體重約20g）；造模在50ml塑料管上開幾個孔以保持氣流，將動物置于這樣的塑料管中，從而使動物暴露于慢性束縛應(yīng)激中。實驗從上午11:00開始，每天4-8小時，整個過程持續(xù)14天，而對照組則在同一時間無束縛地剝奪食物和水。在慢性束縛的最后一天測量每只小鼠的體重。模型評估1.蔗糖偏好試驗小鼠單獨飼養(yǎng)，無任何應(yīng)激條件下，給予1%蔗糖溶液和水2天；1%蔗糖溶液和水的瓶子位置在24小時切換。之后，小鼠被剝奪食物和水12小時；在黑暗環(huán)境下，同時暴露于1%蔗糖溶液

大黃酸對大鼠創(chuàng)傷性腦損傷的抗氧化作用與大黃相似2022/02/25: 背景：顱腦外傷（TBI）是世界范圍內(nèi)威脅生命的疾病。大多數(shù)中國人由于運動受傷，辦公室或家中意外摔倒以及摩托車受傷而患有TBI。由于社會對疾病的了解不多，因此TBI被稱為“沉默流行病”。TBI后繼發(fā)性腦損傷引起病理，生理和生物學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致腦功能障礙。生物和化學(xué)過程通常觸發(fā)連鎖反應(yīng)，可導(dǎo)致炎癥細胞，能量缺乏，興奮性毒性，細胞凋亡和氧化應(yīng)激。氧化應(yīng)激在上述過程中起重要作用。氧化會增強炎癥和其他反應(yīng)，因此促進炎癥和其他反應(yīng)會加劇氧化應(yīng)激并形成惡性循環(huán)。氧化應(yīng)激在TBI后一小時發(fā)生，并立即成為病理反應(yīng)。因

低氧預(yù)處理對大鼠子宮內(nèi)膜異位病灶形成的影響2022/02/25: 目的：理解低氧預(yù)處置對子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型異位病灶構(gòu)成的影響，藉此進一步說明EMs發(fā)作開展的分子機制，從而為其防治供新思緒。辦法：Lewis雌性大鼠隨機分為兩組，分別給予HPC（8%O2）和常壓常氧（21%O2）處置8h，隨即取其子宮組織移植至正常大鼠腹壁。術(shù)后14d記載移植灶體積，并采用ELISA、免疫組化、Westernblot、RT-PCR和Tunnel法，對血清和腹腔液以及移植前子宮組織和移植病灶停止檢測。結(jié)果：HPC可顯著上調(diào)大鼠子宮血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）mRNA（P結(jié)論：HP

細胞技術(shù)及活力測定2022/02/18: 一、原理培養(yǎng)的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好，所以要進行細胞計數(shù)。計數(shù)結(jié)果以每毫升細胞數(shù)表示。細胞計數(shù)的原理和方法與血細胞計數(shù)相同。在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞，總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力，由組織中分離細胞一般也要檢查活力，以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用。復(fù)蘇后的細胞也要檢查活力，了解凍存和復(fù)蘇的效果。用臺盼蘭染細胞，死細胞著色，活細胞不著色，從而可以區(qū)分死細胞與活細胞。利用細胞內(nèi)某些酶與特定的試劑發(fā)生顯色反應(yīng)，也可測定細胞相對數(shù)和相對活力。二、儀器

細胞劃痕實驗2022/02/18: 材料：6孔板marker筆直尺20微升槍頭（滅菌）無血清培養(yǎng)基PBS準備：所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內(nèi)）流程：1、先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻地劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2、在空中加入約5X105個細胞，具體數(shù)量因細胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。3、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不要傾斜。4、用PBS洗細胞3次，去除劃下的細胞，加入無血清培養(yǎng)基。5、放

初代細胞培養(yǎng)實驗2022/02/18: 初代培養(yǎng)或原代培養(yǎng)，是從供體獲取組織后的培養(yǎng)。組織和細胞剛剛離體，生物性狀尚未發(fā)生很大的變化，具有二倍體遺傳性狀，在供體來源充分、生物條件穩(wěn)定的情況下（年齡、性別），在一定程度上能反映體內(nèi)狀態(tài)。實驗方法原理消化培養(yǎng)法合成培養(yǎng)基胰蛋白酶消化培養(yǎng)法，能把組織塊分散成細胞團或單個細胞，便于細胞從培養(yǎng)液中攝取營養(yǎng)和排出代謝產(chǎn)物，細胞能較快地長成單層。本法尤適用于培養(yǎng)大量組織，細胞產(chǎn)量高；但用于經(jīng)常性小量培養(yǎng)工作稍顯繁瑣，無菌操作不良時且易污染。實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養(yǎng)液胰蛋白酶儀器、耗材吸

腦出血模型簡介2022/01/14: 原理：腦實質(zhì)內(nèi)注射膠原酶，膠原酶破壞血管的基底層，導(dǎo)致滲漏血液流入周圍組織。動物：雄性SD大鼠，年齡10-12周，體重300-350g。麻醉期間，大鼠體溫維持在37度，體溫維持直到從麻醉狀態(tài)蘇醒，恢復(fù)正常運動為止。建模：大鼠麻醉，固定立體定位儀上，在頭皮上做1cm長的中線切口。用棉簽除去覆蓋在大鼠頭皮上的軟組織，確認顱骨上的Bregma點位置。右側(cè)鉆孔的位置：Bregma點前0.6mm，側(cè)面2.9mm，微量注射器進入基底節(jié)，深度距顱骨平面5.5mm。以0.1ul/min速度注射1ul七型膠原酶，

6-羥基多巴胺誘導(dǎo)的帕金森病模型簡介2022/01/14: 藥品：6-OHDAHCl：16μg溶解在4μLACSF中。ACSF：0.15MNaCl,2.75mMKCl,1.2mMCaCl2,ａnd0.85mMMgCl2。動物：雄性Wistar大鼠，重量300-400g。建模：1.大鼠常規(guī)麻醉，然后固定在立體定位儀上。2.暴露大鼠顱骨，在右側(cè)內(nèi)側(cè)前腦束（medialforebrainbundle,MFB）上方鉆孔，孔的坐標:(AP),-1.9mm,(ML),-1.9mm,(DV),-7.2mm。3.0.5μL/min，注射4ul，為避免藥物回流，每次輸液完

關(guān)于細胞株的構(gòu)建，這些你可能需要了解一下2022/01/04: 1，什么是瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染？瞬時轉(zhuǎn)染：外源片段的表達時間短暫。這主要是因為外源導(dǎo)入的裸露的載體整合入基因組的幾率非常低，所以以染色體外(episomal)形式存在，不能隨細胞分裂而一同復(fù)制導(dǎo)致最后拷貝數(shù)被稀釋導(dǎo)致的。而且考慮到細胞分裂會稀釋質(zhì)粒的量，所以起初轉(zhuǎn)染的質(zhì)?？截悢?shù)*。這就導(dǎo)致瞬時轉(zhuǎn)染呈現(xiàn)一個高拷貝到低拷貝迅速降低的過程，且無法在這個系統(tǒng)上實現(xiàn)可誘導(dǎo)表達。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：是相對瞬時轉(zhuǎn)染而言，進入細胞的質(zhì)粒整合入細胞基因組中，并能隨細胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。在這個系統(tǒng)中，質(zhì)粒表達穩(wěn)定，拷貝數(shù)低，且

動物肢體缺血模型原理2021/12/31: 肢體缺血動物模型是進行缺血損傷機制、血管新生等研究的基礎(chǔ)，成功制作一種效果確切、重復(fù)性強的肢體缺血模型是保證實驗研究能夠順利進行的關(guān)鍵。當(dāng)前缺血性疾病患者日漸增多，以糖尿病肢體動脈閉塞癥（DAO）、閉塞性動脈硬化癥（ASO）和血栓閉塞性脈管炎（TAO）為主的下肢缺血性疾病發(fā)病率逐年增加。國外資料顯示，70歲以上老年人群中僅動脈硬化閉塞癥患病率即可達15%~20%。而患病人群范圍可覆蓋至青壯年，其高發(fā)生率和廣泛累及率已嚴重危害著人們的身心健康和生存質(zhì)量，亟待探索其發(fā)生機制、預(yù)防措施及治療方法。建立

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