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上海達(dá)為科生物科技有限公司
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腦定位建模步驟2021/12/31
藥品:6-OHDAHCl:16μg溶解在4μLACSF中。ACSF:0.15MNaCl,2.75mMKCl,1.2mMCaCl2,and0.85mMMgCl2。動物:雄性Wistar大鼠,重量300-400g。建模:1.大鼠常規(guī)麻醉,然后固定在立體定位儀上。2.暴露大鼠顱骨,在右側(cè)內(nèi)側(cè)前腦束(medialforebrainbundle,MFB)上方鉆孔,孔的坐標(biāo):(AP),-1.9mm,(ML),-1.9mm,(DV),-7.2mm。3.0.5μL/min,注射4ul,為避免藥物回流,每次輸液完
肝纖維化動物模型的其他造模方法有哪些?2021/12/24
肝纖維化動物模型化學(xué)性損傷法:雄性Wistar大鼠,體重130g左右,用硫代乙酰胺腹腔內(nèi)注射,第1次20mg/100g體重,從第二次起12mg/100g體重,每周注射2次,共8周。評價:第3周,在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞變性壞死和炎細(xì)胞浸潤,炎細(xì)胞浸潤、壞死細(xì)胞數(shù)和程度超過豬血清模型。6周后出現(xiàn)增生纖維束,纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。肝纖維化動物模型四氯化碳法:180~200gWistar或SD大鼠,皮下注射40%-50%CCl4,油溶液(0.3
水迷宮行為學(xué)檢測操作步驟2021/12/24
.將水迷宮加入適當(dāng)?shù)乃?,水溫控制?5±1℃。2.實驗前把動物帶入實驗室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.第一階段:(定位航行)將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進(jìn)行實驗(所有大鼠需全部做完后換下一象限)。若動物在60s內(nèi)登上平臺區(qū)域,則錄像結(jié)束。若動物在60s內(nèi)未登上平臺區(qū)域,則用木棍指引大鼠游上平臺,并停留30s。每只小鼠每天訓(xùn)練4次,訓(xùn)練天數(shù)為5天。5.每只動物實驗結(jié)束后需用干毛巾擦拭,必要時需要使用電吹風(fēng)吹干。6.第二階段(空間探索):待第一到第四象限全部做完后,將水迷宮中的平臺撤走,將
大鼠腦缺血再灌注損傷模型步驟2021/12/17
大鼠腦缺血再灌注損傷模型模型:麻醉大鼠,然后在頸部中線切開一個切口,暴露頸外動脈和頸內(nèi)動脈,用無菌縫合線結(jié)扎,血管夾夾住頸內(nèi)動脈。隨后在頸總動脈上切口,然后插入線栓。2h后,大鼠進(jìn)行再灌注。模型大鼠成功構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn):大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱,對側(cè)前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評分在1-3分,48小時內(nèi)沒有死亡,就認(rèn)為模型成功。文獻(xiàn)上用的是2-3分的模型。優(yōu)點:無需開顱,創(chuàng)傷較??;缺血部位相對固定,可控性好;可實現(xiàn)腦缺血后再灌注,是理想的標(biāo)準(zhǔn)局灶性腦缺血動物模型。動物選擇:目前多選用SD大鼠??紤]大
達(dá)為科實驗中心建模目錄2021/12/17
科研實驗優(yōu)勢:1.獨立實驗室和動物中心:實驗室面積600多平方米,動物中心1000平方米,公司目前具備較好的的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù);2.專業(yè)的技術(shù)人員:技術(shù)團(tuán)隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人;科研實驗介紹:1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SI
淺析Masson染色的原理及染色步驟2021/12/03
染色原理:所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理不陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān):分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍(lán)色(苯胺藍(lán)),主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。Masson染色特點:1、染色穩(wěn)定2、分化時間短,1~2s3、色彩清晰鮮艷4、適用范圍廣,適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染
PCR反應(yīng)混合物的分子實驗檢測步驟介紹2021/12/03
進(jìn)行分子實驗檢測時需要先準(zhǔn)備PCR反應(yīng)混合物:根據(jù)DNA樣本的數(shù)量來確定除了DNA外其他混合物的體積(額外增加一份來確保有足夠的PCR反應(yīng)混合物),將擴(kuò)增每一個遺傳標(biāo)記并且在每一個PCR反應(yīng)管內(nèi)分19.5uL的反應(yīng)混合物。配制膠溶液:將25g尿素、7.5mL40%丙烯酰胺:PDA(19:1)加入到250mL的錐形瓶中。加蒸餾水至50mL,充分混勻來溶解尿素(見注釋4)。準(zhǔn)備制膠板:把膠板洗干凈,確保上面沒有灰塵,用硅化玻璃板。根據(jù)各個廠家的不同把玻璃板夾在一起并且用膠條封住底部(這一過程根據(jù)設(shè)備
石蠟切片基本技術(shù)操作2021/11/26
石蠟切片(paraffinsection)組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的方法。不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法,而且也已相當(dāng)廣泛地用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中。教學(xué)中,光鏡下觀察切片標(biāo)本多數(shù)是石蠟切片法制備的。活的細(xì)胞或組織多為無色透明,各種組織間和細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區(qū)別出;組織離開機(jī)體后很快就會死亡和產(chǎn)生組壞死,失去原有正常結(jié)構(gòu),因此,組織要經(jīng)固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細(xì)胞
胎鼠皮層神經(jīng)元原代培養(yǎng)2021/11/26
一、背景大腦皮層是調(diào)節(jié)軀體運(yùn)動的高級中樞。它由初級感覺區(qū)、初級運(yùn)動區(qū)和聯(lián)合區(qū)三部分構(gòu)成。人類大腦皮層的神經(jīng)細(xì)胞約有140億個,面積約2200平方厘米,主要含有錐體形細(xì)胞、梭形細(xì)胞和星形細(xì)胞(顆粒細(xì)胞)及神經(jīng)纖維。體外原代培養(yǎng)神經(jīng)元作為神經(jīng)科學(xué)研究的有力手段,越來越受到廣大科研工作者的重視。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,動物出生后很少分裂,相對于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。二、實驗步驟1.無菌條件下,從懷孕18天的SD大鼠腹
胎鼠皮層神經(jīng)元的原代培養(yǎng)2021/11/16
一、背景大腦皮層是調(diào)節(jié)軀體運(yùn)動的高級中樞。它由初級感覺區(qū)、初級運(yùn)動區(qū)和聯(lián)合區(qū)三部分構(gòu)成。人類大腦皮層的神經(jīng)細(xì)胞約有140億個,面積約2200平方厘米,主要含有錐體形細(xì)胞、梭形細(xì)胞和星形細(xì)胞(顆粒細(xì)胞)及神經(jīng)纖維。體外原代培養(yǎng)神經(jīng)元作為神經(jīng)科學(xué)研究的有力手段,越來越受到廣大科研工作者的重視。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,動物出生后很少分裂,相對于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。二、實驗步驟1.無菌條件下,從懷孕18天的SD大鼠腹
胎鼠海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)2021/11/16
一、背景海馬是大腦顳葉內(nèi)側(cè)的一個解剖結(jié)構(gòu),因為形狀類似海馬稱為海馬體。海馬體的主要組成基本單位是神經(jīng)元,海馬神經(jīng)元的生理功能與人的記憶密切相關(guān)。一些疾病會使海馬神經(jīng)元出現(xiàn)損傷,比如常見的阿爾茲海默病、單純皰疹病毒性腦炎、自身免疫性腦炎等等,如果這些疾病出現(xiàn),就會導(dǎo)致記憶障礙,甚至癡呆的表現(xiàn)。神經(jīng)細(xì)胞是近代神經(jīng)學(xué)科中研究重點之一,神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)是指在體外模擬建立體內(nèi)生長條件,使神經(jīng)細(xì)胞或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在其生存和生長并維持其形態(tài)和功能的方法。神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)已成為當(dāng)今神經(jīng)科學(xué)研究中的主要方法之一
達(dá)為科生物E15天胎鼠脊髓神經(jīng)元的原代培養(yǎng)2021/11/11
一、背景神經(jīng)元原代培養(yǎng)是將胚胎哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分組織,如大腦皮層、海馬、脊髓等腦組織直接取出,再接種培養(yǎng)的方法。目前國內(nèi)、外有關(guān)神經(jīng)元培養(yǎng)的方法較多,但在原代培養(yǎng)中神經(jīng)元的純度和產(chǎn)量方面還存在一些亟待解決的問題。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,相對于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)是研究神經(jīng)源性疾病的發(fā)病機(jī)制、進(jìn)程的一個重要工具,能很好的、直觀的反映離體神經(jīng)元的發(fā)育狀況和生理活性,如何建立一個穩(wěn)定成
小動物活體成像技術(shù)介紹2021/11/11
服務(wù)領(lǐng)域:癌癥與抗癌藥物研究;免疫學(xué)與干細(xì)胞研究;細(xì)胞凋亡;病理機(jī)制及病毒研究;基因表達(dá)和蛋白質(zhì)之間相互作用;轉(zhuǎn)基因動物模型的構(gòu)建;腫瘤研究;新藥研發(fā)及藥效評價等;服務(wù)流程:1.將小動物裝籠運(yùn)輸?shù)轿夜净蛘哂晌覀児咎峁嶒瀯游铮凑沼脩粢笞⑸湎鄳?yīng)的標(biāo)記發(fā)光系統(tǒng)的藥物、細(xì)胞以及慢病毒注射到小動物體內(nèi)。2.根據(jù)客戶要求對小動物進(jìn)行活體成像,或者根據(jù)要求將具體的組織器官取出,體外進(jìn)行成像。其它技術(shù)服務(wù):1.熒光素酶或熒光報告基團(tuán)標(biāo)記質(zhì)粒的構(gòu)建、擴(kuò)增及轉(zhuǎn)染;2.熒光素酶或熒光報告基團(tuán)標(biāo)記質(zhì)粒轉(zhuǎn)染成
動物行為學(xué)實驗技術(shù)2021/11/11
動物行為學(xué)實驗主要是為了研究動物界動物的行為、溝通、情緒以及社交、學(xué)習(xí)、繁衍等一系列的行為過程的實驗方法,本質(zhì)上是一種研究動物對環(huán)境和其他生物的互動等問題的學(xué)科,在實驗過程中可以獲得的一些重要的動物行為學(xué)研究數(shù)據(jù)。在現(xiàn)代,動物行為學(xué)實驗已經(jīng)是研究動物行為的必然手段,在動物行為發(fā)生當(dāng)時的原因以及機(jī)制、發(fā)育或發(fā)生的研究過程中具有十分重要的實踐意義。可以進(jìn)一步在分子水平上,對研究動物行為對象的相應(yīng)基因的分離、克隆和轉(zhuǎn)移上,做一個更為深入的行為學(xué)研究。
E15天胎鼠脊髓神經(jīng)元的原代培養(yǎng)2021/11/10
一、背景神經(jīng)元原代培養(yǎng)是將胚胎哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分組織,如大腦皮層、海馬、脊髓等腦組織直接取出,再接種培養(yǎng)的方法。目前國內(nèi)、外有關(guān)神經(jīng)元培養(yǎng)的方法較多,但在原代培養(yǎng)中神經(jīng)元的純度和產(chǎn)量方面還存在一些急待解決的問題。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,相對于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)是研究神經(jīng)源性疾病的發(fā)病機(jī)制、進(jìn)程的一個重要工具,能很好的、直觀的反映離體神經(jīng)元的發(fā)育狀況和生理活性,如何建立一個穩(wěn)定成
抑郁癥應(yīng)激動物模型技術(shù)2021/11/05
(一)行為絕望(behavioraldespair)模型行為絕望模型具有簡單、快速、敏感等特點,常用于抗抑郁藥物的快速篩選。主要包括兩種動物模型。一是大鼠、小鼠強(qiáng)迫游泳實驗:大鼠、小鼠被迫在一局限的空間游泳,它們首先拼命地泳動試圖逃跑,隨后處于一種漂浮的不動狀態(tài),僅露出鼻孔維持呼吸,四肢偶爾劃動以保持身體不至于沉下去,這種狀態(tài)被稱為不動狀態(tài),實際是動物放棄逃脫的希望,屬于“行為絕望”。二是小鼠懸尾實驗:懸尾小鼠為克服不正常體位而掙扎活動,但活動一定時間后,出現(xiàn)間斷性不動,顯示“絕望”狀態(tài),多數(shù)抗
大鼠心梗模型構(gòu)建技術(shù)2021/11/04
心梗是嚴(yán)重危害人類健康的一種心血管疾病,在心血管疾病的研究中,動物模型被廣泛用于發(fā)病機(jī)制和藥物治療的研究。心梗動物模型的有效建立對研究急、慢性心肌梗死的病理演變過程、診斷及治療均有重要意義。一、造模原理心梗模型的造模原理是通過各種手段使目的冠狀動脈閉塞,造成該冠狀動脈供血區(qū)的心肌細(xì)胞發(fā)生缺血、缺氧,促使心肌細(xì)胞發(fā)生壞死。二、實驗方法將大鼠用戊巴比妥麻醉后,經(jīng)左側(cè)3-4肋間剪開皮膚,鈍性分離肌肉組織,打開胸腔并剪開心包膜,擠壓出心臟,結(jié)扎左冠狀動脈前降支(于分支的起點處約1-2mm),用生理記錄儀
免疫學(xué)檢測方法與免疫技術(shù)2021/02/03
免疫學(xué)檢測方法與免疫技術(shù)免疫學(xué)檢驗方法和免疫化學(xué)技術(shù)主要包括:抗原抗體的制備、純化和鑒定,免疫擴(kuò)散、免疫電泳、免疫凝集試驗、補(bǔ)體結(jié)合試驗,免疫細(xì)胞分離、純化和鑒定,免疫功能檢測,細(xì)胞因子檢測,放射免疫檢測,免疫酶標(biāo)檢測,熒光和發(fā)光免疫技術(shù),免疫組化實驗方法,原位雜交免疫組化,免疫PCR技術(shù),免疫微球的應(yīng)用,免疫電鏡技術(shù),細(xì)胞凋亡的檢測方法,膜受體分析,胞內(nèi)鈣鎂濃度的測定和細(xì)胞間通訊,流氏細(xì)胞儀技術(shù)及應(yīng)用等。從上述內(nèi)容可以看出,免疫技術(shù)是免疫學(xué)和物理、化學(xué)及電子信息和分子生物學(xué)理論和技術(shù)的結(jié)合產(chǎn)物
化學(xué)方法建立的慢性腎功能衰竭模型2021/02/03
1.阿霉素誘導(dǎo)模型(1)復(fù)制方法體重250g左右成年大鼠,經(jīng)腹腔按30mg/kg體重劑量注射戊巴bi妥鈉麻醉,麻醉后大鼠仰臥固定于手術(shù)板上,腹部手術(shù)區(qū)常規(guī)消毒、去毛,沿右腹旁切口切開皮膚,暴露右側(cè)腎臟,結(jié)扎腎蒂后,切除右腎,常規(guī)手術(shù)縫合切口,關(guān)閉腹腔。15d后,按5mg/kg體重的劑量經(jīng)大鼠尾靜脈注射阿霉素(adriamycin,ADR),12周后即可復(fù)制出CRF模型;如長期造模則需要觀察28~48周。造模前后將模型大鼠置于代謝籠收集24h尿液,測定24h尿液量及尿蛋白量;按實驗預(yù)定時間取靜脈血
免疫組化試劑盒的檢查原理2021/02/03
免疫組化試劑盒的檢查原理:檢查試劑盒LAB-SA(也叫做鏈親和素-生物素放大體系)被*為是免疫組化較好的監(jiān)測方法。LAB-SA的方法學(xué)已經(jīng)在基礎(chǔ)研究和平常的試驗中廣泛應(yīng)用。免疫組化試劑盒的特點:1.簡易:以簡單的一步反應(yīng)取代常規(guī)法的五個步驟。2.快捷:以1個小時取代常規(guī)法的3-5個小時。3.通用:適合于絕大多數(shù)一級抗體,而且不需要二級抗體反應(yīng)。4.靈敏:具有與常規(guī)法相似的靈敏度。5.重現(xiàn)性好:實驗結(jié)果重現(xiàn)性好。6.經(jīng)濟(jì):抗體和試劑可重復(fù)使用4-5次。尊敬的客戶:本公司有核酸化系列產(chǎn)品,SILAC
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