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Morris水迷宮實驗2022/07/22

Morris水迷宮實驗morris水迷宮實驗（Morriswatermazetes）t在空間學習記憶能力的研究中較為經典，三十多年來一直被廣泛應用，實驗方法也不斷改進創(chuàng)新，實驗對象初為大鼠，后來擴展到小鼠甚至人類（虛擬迷宮）Morris在方法學的研究進展（Morris水迷宮實驗）Morris水迷宮實驗眾多，國內進行較多的程序是適應性訓練、定位航行實驗和空間探索實驗。適應性訓練是在實驗前一天，不放置平臺，讓大小鼠在水迷宮中自由游泳120s，結束訓練后將其放入溫暖干燥的籠子，以避免大小鼠的應激反應。

小鼠活體成像實驗2022/07/15

小動物活體成像主要采用生物發(fā)光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術。生物發(fā)光是用熒光素酶（Luciferase）基因標記細胞或DNA，而熒光技術則采用熒光報告基團（GFP、RFP,Cyt及dyes等）進行標記。技術應用（小鼠活體成像實驗）通過活體動物體內成像系統(tǒng)，可以觀測到疾病或癌癥的發(fā)展進程以及藥物治療所產生的反應，并可用于病毒學研究、構建轉基因動物模型、siRNA研究、干細胞研究、蛋白質相互作用研究以及細胞體外檢測等領域。具體應用如下：1.標記細胞（1

激光共聚焦實驗2022/07/15

激光掃描共聚焦顯微鏡(laserscanningconfocalmicroscope，LSCM)是在熒光顯微鏡成像基礎上配置激光光源和掃描裝置，在傳統(tǒng)光學顯微鏡基礎上采用共軛聚焦裝置，利用計算機進行圖像處理，對觀察樣品進行斷層掃描和成像，是一種高敏感度與高分辨率的顯微鏡在生命科學領域的組織、細胞和分子水平研究中的應用十分廣泛，主要用于樣品熒光定量檢測，共聚焦圖像分析，三維圖像重建、活細胞動力學參數(shù)分析和細胞間通訊等方面研究激光掃描共聚焦顯微鏡通過對樣品X-Y軸的逐點掃描，形成二維圖像。如果在z軸

抑郁癥模型2022/07/08

動物5周雌性Wistar大鼠100–120g。建模大鼠適應環(huán)境2周后，開始卵巢摘除術1.大鼠常規(guī)麻醉，固定。2.卵巢摘除術：7周雌性Wistar大鼠（200-220g）于最末肋骨下，腋中線和距脊柱外側2cm交叉處剪除長毛，常規(guī)消毒后，切開皮膚和背肌，用眼科鑷夾卵巢，分離脂肪團，結扎血管，切除卵巢，縫合肌層和皮膚。3.術后回復2周。4.慢性不可預知性溫和刺激(CUMS)：在11種壓力源中，每天使用兩種，持續(xù)6周。按隨機順序：連續(xù)通宵照明（12小時），間歇性照明（燈亮1小時和熄滅1小時；3小時），成

煙草煙霧引起的大鼠慢性支氣管炎2022/07/08

SD大鼠，200±20g。建模大鼠適應環(huán)境一周，然后分為四組，每組六只大鼠。對照組大鼠暴露于過濾空氣中。模型組大鼠暴露于不同濃度的煙草煙霧中，煙草煙霧的濃度分別為40%、60%和80%；煙草煙霧組大鼠全身暴露于煙草煙霧1小時/天，連續(xù)4周。模型驗證計數(shù)支氣管肺泡灌洗液中巨噬細胞、中性粒細胞和淋巴細胞，氣管（近端、遠端、末端）和肺實質的病理觀察等。SD大鼠，200±20g。建模大鼠適應環(huán)境一周，然后分為四組，每組六只大鼠。對照組大鼠暴露于過濾空氣中。模型組大鼠暴露于不同濃度的煙草煙霧中，煙草煙霧的

LPS誘導的肺損傷模型2022/07/01

LPS誘導的肺損傷模型肺中性粒細胞增多癥在呼吸窘迫綜合征（ARDS），囊性纖維化（CF）和慢性阻塞性肺疾?。–OPD）等疾病中是一個統(tǒng)一存在的病理表現(xiàn)。據(jù)推測，中性粒細胞的在肺部的聚集和活化導致肺功能障礙癥狀，包括氣道反應增加，肺纖維化和粘液的過度分泌。脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性細菌細胞壁的主要成分。當進入動物肺部組織時，LPS顯示多種肺部損傷的功能，包括肺組織中的白細胞積聚，肺水腫，嚴重的肺部炎癥和高致死率。LPS誘導的急性肺中損傷模型小鼠和大鼠模型的特征是肺中性粒細胞積聚和炎性介質的產生。

高脂飲食誘導大鼠動脈粥樣硬化模型2022/06/18

動物SD大鼠，160–180g，6-7周。建模大鼠適應環(huán)境一周后，8只SD大鼠（雄性：雌性=1:1）作為對照組并正常飲食；8只SD大鼠（雄性：雌性=1:1）用高脂食物喂養(yǎng)，持續(xù)9周至建立動脈粥樣硬化模型。高脂食物成分：基礎日糧81.3%、總膽固醇3%、豬油10%、蔗糖5%、丙基硫氧嘧啶0.2%和膽酸鈉0.5%。在高脂飲食的第一天動脈粥樣硬化組給予維生素（600000IU/kg），正常組腹腔注射等同劑量生理鹽水溶液。在4和6周，向動脈粥樣硬化斑塊組補充劑量為100000IU/kg維生素，而對照組注

上海交通大學藥學院OVA誘導哮喘動物模型介紹2022/06/09

基本介紹哮喘的發(fā)生發(fā)展與遺傳、免疫、環(huán)境和藥物作用等有關，其誘發(fā)因素包括過敏原、病毒感染、刺激物、運動等。其病理特點為Th2淋巴細胞免疫反應強，IL-4、IL-5、IL-13增強，導致嗜酸性粒細胞浸潤增多、粘液分泌增多、支氣管高反應性(BHR)、免疫球蛋白E(IgE)合成和組織重塑。臨床表現(xiàn)為氣喘、胸悶、咳嗽等癥狀，多發(fā)生在夜間或凌晨，因此建立可靠的哮喘動物模型對于探究哮喘的發(fā)病機制，發(fā)現(xiàn)藥物作用靶點具有重要意義。目前哮喘模型選取的動物主要用BALB/c小鼠、C57小鼠、SD大鼠、Wistar大

腫瘤疾病動物模型有哪幾類？2022/06/03

1.自發(fā)性腫瘤（spontaneoustumor）動物模型：指實驗動物未經任何有意識的人工處置，在自然情況下發(fā)生的腫瘤所形成的模型。2.誘發(fā)性腫瘤（inducedtumor）動物模型：是使用致癌因素在實驗條件下誘發(fā)動物發(fā)生腫瘤的動物模型。3.移植性腫瘤（transplanttumor）動物模型：指將動物或人體腫瘤移植同種或異種動物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。1.自發(fā)性腫瘤（spontaneoustumor）動物模型：指實驗動物未經任何有意識的人工處置，在自然情況下發(fā)生的腫瘤所形成的模型。2.誘發(fā)性腫

動物行為學實驗2022/06/03

動物行為學實驗主要是為了研究動物界動物的行為、溝通、情緒以及社交、學習、繁衍等一系列的行為過程的實驗方法，本質上是一種研究動物對環(huán)境和其他生物的互動等問題的學科，在實驗過程中可以獲得的一些重要的動物行為學研究數(shù)據(jù)。在現(xiàn)代，動物行為學實驗已經是研究動物行為的必然手段，在動物行為發(fā)生當時的原因以及機制、發(fā)育或發(fā)生的研究過程中具有十分重要的實踐意義?？梢赃M一步在分子水平上，對研究動物行為對象的相應基因的分離、克隆和轉移上，做一個更為深入的行為學研究。

肝纖維化動物模型的其他造模方法2022/06/03

肝纖維化動物模型化學性損傷法：雄性Wistar大鼠，體重130g左右，用硫代乙酰胺腹腔內注射，第1次20mg/100g體重，從第二次起12mg/100g體重，每周注射2次，共8周。評價:第3周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細胞變性壞死和炎細胞浸潤，炎細胞浸潤、壞死細胞數(shù)和程度超過豬血清模型。6周后出現(xiàn)增生纖維束，纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。肝纖維化動物模型四氯化碳法：180～200gWistar或SD大鼠，皮下注射40%-50%CCl4，油溶液(0.3

大鼠肺缺血再灌注模型2022/06/03

肺缺血再灌注損傷是由于機體組織或器官在缺血再灌注后導致肺組織迅速損傷。缺血再灌注可能發(fā)生在肺，也可能是下肢或腹主動脈等，導致肺泡上皮細胞和肺毛細胞血管內皮細胞受損。究其原因可能與組織炎癥細胞聚集、氧自由基產生和促炎因子釋放等病理生理反應有關。結扎法制備肺缺血再灌注損傷模型多，因其操作簡單、成功率高、實用性強，是研究肺缺血再灌注損傷發(fā)病機制和防治保護的關鍵。制備肺缺血再灌注模型我們選用適齡的SD大鼠，通過結扎手術進行造模。

動物實驗檢測水迷宮實驗目的是什么2022/06/03

動物實驗檢測水迷宮實驗目的是什么在醫(yī)學界，動物實驗檢測的目的就是要通過對動物本身生命現(xiàn)象的研究，進而推用到人類，探索人類的生命奧秘，控制人類的疾病和衰老，延長人類的壽命。而水迷宮實驗是一種強迫實驗動物（大鼠、小鼠）游泳，學習尋找隱藏在水中平臺的一種實驗，主要用于測試實驗動物對空間位置感和方向感（空間定位）的學習記憶能力。應用于學習記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開發(fā)/篩選/評價、藥理學、毒理學、預防醫(yī)學、神經生物學、動物心理學及行為生物學等多個學科的科學研究和計算機輔助教學等領

特殊染色技術2022/05/23

病理組織切片染色技術作為病理實驗室基本方法之一，具有較高的使用價值，也是目前臨床外科病理基本、常見的形態(tài)學檢驗技術。組織切片染色就是利用染料在組織切片上給予不同顏色，使其與組織或者細胞內的某種成分發(fā)生作用，經過透明后通過光譜吸收和折射，使其各種微細結構能顯現(xiàn)不同顏色，這樣在顯微鏡下就可顯示出組織細胞的各種成分。常見的組織染色是HE染色，另外睦科生物還可開展其他特殊染色項目，如masson染色、PAS染色、AB-PAS染色、EVG染色、VG染色、維多利亞藍染色、番紅-固綠染色、甲苯胺藍染色、油紅O

細胞增殖及活性檢測技術2022/05/23

細胞增殖是指細胞在周期調控因子的作用下，通過DNA復制、RNA轉錄和蛋白質合成等復雜反應而進行的分裂系列過程。其中核DNA的復制倍增是整個過程的重要特征。細胞增殖檢測技術廣泛應用于分子生物學遺傳學腫瘤生物學免疫學藥理和藥代動力學等研究領域。檢測細胞存活與增殖的方法主要包括觀察DNA合成含量和檢測細胞代謝活性兩種，前者主要有Brdu、EDU檢測等，后者主要有MTT、CCK8等檢測，客戶可根據(jù)處理藥物數(shù)量等因素選擇合適的檢測方法。

血管形成實驗技術2022/05/23

血管形成體外模型可分為細胞水平的增殖實驗、遷移實驗和管腔形成實驗，以及器官水平的人胎盤血管段培養(yǎng)模型和大鼠動脈環(huán)模型。目前通常所說的血管形成實驗是指管腔形成實驗。管腔形成反映毛細血管的早期過程，是體外檢查內皮細胞功能最完整的指標。血管形成過程中內皮細胞會形成細胞條索，然后形成管腔，體外在特定條件下如基質膠、膠原等培養(yǎng)時也能形成管腔。藥物通過抑制管腔形成或使形成的管腔斷裂來達到抑制血管形成的作用。借助計算機軟件計算小管數(shù)及小管之間的連接數(shù)及小管的長度和面積，可定量分析藥物對管腔形成的影響。

雙熒光素技術2022/05/23

熒光素酶報告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測熒光素酶活性的一種報告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。然后可以通過熒光測定儀（化學發(fā)光儀）測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光。熒光素和熒光素酶這一生物發(fā)光體系，可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達。雙熒光素酶體系，即有兩種熒光素酶，比較常見的組合是螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶，螢火蟲熒光素酶作用于甲蟲

細胞凋亡誘導技術2022/05/19

【實驗方法與步驟】（1）細胞凋亡的誘導：HeLa細胞常規(guī)傳代培養(yǎng)至對數(shù)生長期(見細胞傳代培養(yǎng)）。實驗組細胞加入順鉑溶液（生理鹽水配置）至終濃度為20μmo1/L,37℃，5%CO2條件下繼續(xù)培養(yǎng)。空白實驗對照加入等體積的生理鹽水，同樣條件繼續(xù)培養(yǎng)。24h后進行染色及形態(tài)學觀察。（2）胰酶消化細胞，將培養(yǎng)基上清及消化下來的細胞一同轉入離心管中600~800r/min離心10min。（3）吸去上清，用1mLPBS重懸細胞沉淀，并轉入1.5mL微量離心管中，600~800r/min離心10min。（4

Transwell實驗技術2022/05/19

微孔濾膜培養(yǎng)小室及雙室聯(lián)合培養(yǎng)系統(tǒng)（Transwell實驗）：應用微孔濾膜培養(yǎng)小室，進行膠質瘤細胞與內皮細胞的聯(lián)合培養(yǎng)，可以更接近體內環(huán)境，模擬瘤細胞對血管內皮細胞的作用，濾膜上8μm的微孔可允許內皮細胞穿過到達膜的下面，這些穿越遷移的內皮細胞可粘附于膜的下面，通過計數(shù)濾膜下面的細胞可基本反映細胞的遷移情況。Transwell的基本原理是將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內稱為上室，培養(yǎng)板內稱為下室，上室內添加上層培養(yǎng)液，下室內添加下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以膜相隔。將細胞種在上室內，由于

活力染色技術2022/05/19

一、實驗原理各種細胞操作，包括傳代、凍存和原代組織的分離，均能導致細胞死亡。為了確定群體細胞中的存活細胞數(shù)，可采用臺盼藍染料排斥實驗（Phillips1973)。正常的健康細胞能排斥染料，但細胞膜完整性喪失后臺盼藍可彌散入細胞內。染料排斥實驗是一種粗糙的估計細胞活力的方法，無法區(qū)別10%~20%的活力差異。除此之外，排斥染料的細胞有可能不貼壁或不能較長時問生存或繁殖。二、實驗方法1)胰蛋白酶處理細胞，無菌狀態(tài)下取0.5ml細胞用PBS稀釋至每毫升2X105~4X105。2)向另一管中無菌加人0.