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上海達(dá)為科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
CDE飲食誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型2024/02/29
1、CDE飲食誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型造模原理該模型致病機(jī)制可能是膽堿缺乏及乙硫氨酸干擾使細(xì)胞膜磷脂的合成障礙,使腺泡細(xì)胞外放作用受阻,出現(xiàn)溶酶體和外分泌小泡共定位,導(dǎo)致和雨蛙素類似的腺泡細(xì)胞內(nèi)消化酶激活和自我消化而發(fā)病。2、CDE飲食誘導(dǎo)的急性胰腺炎模型造模方法小鼠標(biāo)準(zhǔn)飲食條件下適應(yīng)環(huán)境7天。然后,給模型組小鼠喂食膽堿/蛋氨酸缺乏(CDE)飲食,補(bǔ)充0.5%DL-乙硫氨酸或生理鹽水,為期3天;為了確保所有動(dòng)物的暴露量相等,每24小時(shí)換新鮮的CDE飼料。對(duì)照組小鼠正常飲食,腹腔注射生理鹽水,為期3天
TNBS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎模型2024/02/29
1、TNBS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎模型造模原理TNBS它是一個(gè)小分子,本身不具有抗原性,但與宿主蛋白結(jié)合后會(huì)引起免疫反應(yīng),因此屬于半抗原。TNBS處理小鼠可建立模擬臨床克羅恩氏?。–D)的臨床前模型,其產(chǎn)生的免疫反應(yīng)是Th1介導(dǎo)的,特征在于CD4+T細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)。形成橫向進(jìn)展的炎癥,導(dǎo)致透壁結(jié)腸炎。2、TNBS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎模型造模方法大鼠禁食48小時(shí),然后用戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉(40mg/kg,i.p.)。將鈍套管插入大鼠肛丨門(mén),尖丨端向前推進(jìn)約8cm。TNBS(100
蓖麻油誘導(dǎo)的腹瀉模型2024/02/29
1、蓖麻油誘導(dǎo)的腹瀉模型造模原理蓖麻油的輕瀉作用可能引起腸道過(guò)度刺激,導(dǎo)致腸道蠕動(dòng)加速,水分無(wú)法被充分吸收,從而導(dǎo)致腹瀉的發(fā)生。2、蓖麻油誘導(dǎo)的腹瀉模型造模方法(1)成年Swissalbino大鼠,重量120–150g(2)模型組大鼠口服蓖麻油1ml,然后把它們放在裝有吸附紙的籠子里,觀察4小時(shí)是否有特征性腹瀉。對(duì)照組大鼠口服0.9%生理鹽水(2ml/kg)3、蓖麻油誘導(dǎo)的腹瀉模型觀察指標(biāo)觀察并記錄小鼠體重、飲水量、攝食量、精神狀態(tài)等一般體況;依據(jù)布里斯托對(duì)糞便的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)觀察小鼠糞便形態(tài),分別計(jì)
小鼠腦缺血再灌注損傷模型2024/02/26
1.體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠,用5%異氟醚深度麻醉小鼠,然后2.5%異氟醚維持麻醉。2.在頸部中線切開(kāi)一個(gè)切口。3.分離右側(cè)的頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)。4.右側(cè)的頸總動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎。5.分離右側(cè)的頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,右側(cè)的頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎;右側(cè)的頸外動(dòng)脈頭端結(jié)扎,近心端掛線備用。6.隨后,用無(wú)菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動(dòng)脈上做一個(gè)小洞,然后插入線栓,近心端掛線適度的系牢插入右側(cè)頸外動(dòng)脈的線栓,以防止血從小洞中流出;松開(kāi)右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)的結(jié)扎線,輕輕送入線栓到大腦中動(dòng)脈,當(dāng)感覺(jué)到阻力時(shí)
Binder C170 CO2培養(yǎng)箱細(xì)胞培養(yǎng)技巧2024/01/25
BinderC170CO2培養(yǎng)箱細(xì)胞培養(yǎng)技巧在科學(xué)研究的世界中,有許多看似微不足道的工具,卻在默默無(wú)聞中發(fā)揮著重要的作用。其中,CO2培養(yǎng)箱就是這樣一種工具。它可能不像顯微鏡、離心機(jī)那樣引人注目,但它卻是實(shí)驗(yàn)室中重要的一部分,為各種生物實(shí)驗(yàn)提供了穩(wěn)定的環(huán)境。BinderC170CO2培養(yǎng)箱是一種能夠控制并維持內(nèi)部二氧化碳濃度的培養(yǎng)設(shè)備。它的工作原理是通過(guò)加熱和冷卻系統(tǒng),以及精確的二氧化碳控制系統(tǒng),來(lái)模擬細(xì)胞生長(zhǎng)的理想環(huán)境。這種環(huán)境對(duì)于許多類型的細(xì)胞來(lái)說(shuō)至關(guān)重要,因?yàn)樗鼈冃枰囟ǖ臏囟群投趸紳?
大中小型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的動(dòng)物飼養(yǎng)管理技巧2024/01/25
大中小型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的動(dòng)物飼養(yǎng)管理技巧在科學(xué)研究中,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是一種常見(jiàn)的方法,用于驗(yàn)證假設(shè)、研究疾病機(jī)制以及評(píng)估藥物療效等。然而,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的成功與否很大程度上取決于動(dòng)物的飼養(yǎng)管理技巧。本文將介紹一些在該實(shí)驗(yàn)中常用的動(dòng)物飼養(yǎng)管理技巧,以期提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。1.對(duì)于大小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō),合適的飼養(yǎng)環(huán)境是至關(guān)重要的。動(dòng)物需要一個(gè)干凈、安靜、溫度適宜的環(huán)境來(lái)保持其生理和心理健康。因此,在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)施時(shí),應(yīng)考慮到這些因素,并確保動(dòng)物能夠獲得足夠的空間和舒適的生活條件。此外,定期清潔和消毒設(shè)施也是必
基于質(zhì)譜成像技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中的應(yīng)用2024/01/21
近年來(lái),隨著質(zhì)譜成像技術(shù)的不斷發(fā)展和成熟,其在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中得到了廣泛的應(yīng)用。在細(xì)胞表型實(shí)驗(yàn)中,質(zhì)譜成像技術(shù)是重要的工具之一。本文將介紹基于質(zhì)譜成像技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究在細(xì)胞表型實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用。質(zhì)譜成像技術(shù)是一種結(jié)合了質(zhì)譜分析和成像技術(shù)的新型技術(shù),它可以對(duì)樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行定量和定位分析。與傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)組學(xué)方法相比,質(zhì)譜成像技術(shù)具有更高的分辨率和靈敏度,可以同時(shí)檢測(cè)到數(shù)千種蛋白質(zhì),并且可以實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)的空間分布和相對(duì)豐度的精確測(cè)量。在實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中,質(zhì)譜成像技術(shù)的應(yīng)用非常廣泛。其中常見(jiàn)的應(yīng)用是對(duì)細(xì)胞
蛋白實(shí)驗(yàn)檢測(cè)原理、方法與應(yīng)用2024/01/21
蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要執(zhí)行者,對(duì)于理解生物過(guò)程和疾病機(jī)制至關(guān)重要。因此,蛋白實(shí)驗(yàn)檢測(cè)在生物醫(yī)學(xué)研究中占有重要地位。下面將介紹檢測(cè)的基本原理、常用方法以及應(yīng)用領(lǐng)域。蛋白質(zhì)是由氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成的大分子,其結(jié)構(gòu)復(fù)雜且多樣。蛋白質(zhì)的檢測(cè)主要包括定性和定量?jī)蓚€(gè)方面。定性主要是確定蛋白質(zhì)的存在與否,而定量則是確定蛋白質(zhì)的數(shù)量。這需要通過(guò)對(duì)蛋白質(zhì)的物理或化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行測(cè)定來(lái)實(shí)現(xiàn)。目前,常用的蛋白質(zhì)檢測(cè)方法主要有電泳、免疫印跡、質(zhì)譜分析等。電泳是一種根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和電荷進(jìn)行分離的方法,包括凝膠電泳和毛細(xì)管
類器官培養(yǎng)技術(shù)交流會(huì)2024/01/12
類器官的培養(yǎng)可以利用體細(xì)胞、成體干細(xì)胞(包括祖細(xì)胞)或多能干細(xì)胞。2009年,腸道器官模擬技術(shù)取得突破,研究人員發(fā)現(xiàn),成人腸道干細(xì)胞可以在體外增殖和自發(fā)組織化。其特征是能夠表達(dá)LGR5,這是一種編碼Wnt激動(dòng)劑R-spondin受體的基因,同時(shí)需要特定的分子圍繞在旁(如Wnt、KGF和noggin)。以此為理論基礎(chǔ),研究人員開(kāi)發(fā)了一種三維培養(yǎng)體系,能夠在體外重建腸道干細(xì)胞的適宜環(huán)境,并從腸道上皮細(xì)胞或單個(gè)LGR5+干細(xì)胞分化出具有自我更新能力、保持腸道腺窩絨毛狀結(jié)構(gòu)的類器官。該模型可以持續(xù)擴(kuò)增達(dá)
類器管發(fā)展史學(xué)習(xí)交流會(huì)2024/01/12
類器官(Organoids)指利用成體干細(xì)胞或多能干細(xì)胞進(jìn)行體外三維(3D)培養(yǎng)而形成的具有一定空間結(jié)構(gòu)的組織類似物。盡管類器官并不是真正意義上的人體器官,但能在結(jié)構(gòu)和功能上模擬真實(shí)器官,能夠更大程度地模擬體內(nèi)組織結(jié)構(gòu)及功能并能夠長(zhǎng)期穩(wěn)定傳代培養(yǎng)。類器官的起源可以追溯到1907年,當(dāng)時(shí)44歲的美國(guó)貝克羅萊那大學(xué)教授威爾遜(H.V.Wilson)發(fā)現(xiàn)通過(guò)機(jī)械分離的海綿(sponge)細(xì)胞可以重新聚集并自組織成為新的具有正常功能的海綿有機(jī)體,他的研究結(jié)果于1910年發(fā)表。威爾遜的研究證明了成年的有機(jī)
腫瘤細(xì)胞體外傳代培養(yǎng)及保種2023/12/21
一.細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細(xì)胞于37℃水浴,快速溶化,用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細(xì)胞懸液,于1500轉(zhuǎn)/分,離心3分鐘。棄上清,再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細(xì)胞沉淀,再1500轉(zhuǎn)/分,離心3分鐘,棄上清,細(xì)胞沉淀用1.0ml培養(yǎng)基混勻,備用。另取一個(gè)75cm2方瓶,加入14.0ml培養(yǎng)基質(zhì),將上述制備的含腫瘤細(xì)胞懸液(1.0ml)加入此方瓶中,于37℃,5%CO2孵育箱中培養(yǎng)。若此腫瘤細(xì)胞懸浮生長(zhǎng),大約3-4天細(xì)胞基質(zhì)會(huì)變黃,5.0ml細(xì)胞懸液可傳代一個(gè)方瓶培養(yǎng),可用3
組織切片的免疫熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)2023/12/21
免疫熒光標(biāo)記技術(shù)(immunofluorescencetechnique)是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素,當(dāng)與其相對(duì)應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時(shí),在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見(jiàn)發(fā)出熒光的抗原抗體結(jié)合部位,檢測(cè)出抗原或抗體。實(shí)驗(yàn)材料組織樣品試劑、試劑盒PBS抗體儀器、耗材玻片加濕盒實(shí)驗(yàn)步驟1.將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒,由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片,放入玻片盒中(每邊放6片),或故濕盒中(載玻片勿相互接觸)。2.待載玻片達(dá)室濕且未干時(shí),鋪加PBS于切片
免疫熒光實(shí)驗(yàn)方法中需要注意的環(huán)節(jié)2023/12/21
免疫熒光方法中的重要環(huán)節(jié):1、冰凍切片制備:建議用新鮮組織,否則組織細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)破壞,易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等,防止裂片和脫片嚴(yán)重。2、組織切片固定:切好片風(fēng)干后立即用冰丙酮等固定液進(jìn)行固定5-10min,尤其要較長(zhǎng)時(shí)間保存的白片,一定要及時(shí)固定和適當(dāng)保存。3、血清封閉:為防止內(nèi)源性非特異性蛋白抗原的結(jié)合,需要在一抗孵育前先用血清(與二抗來(lái)源一致)封閉,減弱背景著色。血清封閉的時(shí)間是可以調(diào)整的,一般10-30min。4、一抗孵育條件:在免疫組化反應(yīng)中最重要,包括孵育
多重 PCR 擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)2023/12/21
試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環(huán)儀實(shí)驗(yàn)步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用;作者發(fā)現(xiàn)Roche公司的Taq聚合酶可以滿足大多數(shù)需要.如果需要提高PCR產(chǎn)物的特異性,應(yīng)該使用熱啟動(dòng)聚合酶。使用Tag聚合酶本身附帶的緩沖液。2.核酸和寡核苷酸(1)溶于水的DNA如果DNA在TE中,應(yīng)該在PCR反應(yīng)混合物中添加MgCl2.如果用從石蠟包埋的組織中純化的DNA做模板,選擇的STR標(biāo)記的大小應(yīng)該是78~250bp,因?yàn)檫@些DNA模板的完整性不定。參照D
細(xì)胞黏附技術(shù)2023/12/21
細(xì)胞黏附性是維持組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的基本條件,也是細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和發(fā)揮功能的調(diào)節(jié)因素,并且對(duì)細(xì)胞的增殖、分化有重要影響。通??煞譃閮深悾醇?xì)胞與細(xì)胞黏附和細(xì)胞與基質(zhì)黏附。機(jī)體內(nèi)許多細(xì)胞,如上皮細(xì)胞,需要牢固地定在某處發(fā)揮功能;另一些細(xì)胞,如白細(xì)胞,活躍運(yùn)動(dòng),就需要不斷調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附。細(xì)胞黏附性的改變?cè)谀[瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中也發(fā)揮著重要作用。體外測(cè)定細(xì)胞粘附性實(shí)驗(yàn)方法的建立,為粘附分子的發(fā)現(xiàn)、細(xì)胞間粘附影響的研究提供了極為有效的方法。公司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在現(xiàn)在的意義2023/12/21
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)(又名動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或者動(dòng)物研究),當(dāng)今有爭(zhēng)議的話題之一,是指在科學(xué)研究中使用動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。雖然使用動(dòng)物來(lái)研究人類成為流行是在1859年查爾斯.達(dá)爾文提出進(jìn)化論之后,但是文獻(xiàn)記載早在公元前4世紀(jì),希臘杰出古典哲學(xué)家亞里士多德就已經(jīng)開(kāi)始使用活體動(dòng)物做試驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)(AnimalExperiment)指在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),為了獲得有關(guān)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等方面的新知識(shí)或解決具體問(wèn)題而使用動(dòng)物進(jìn)行的科學(xué)研究。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)必須由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的、具備研究學(xué)位或?qū)I(yè)技術(shù)能力的人員進(jìn)行或在其指導(dǎo)下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)發(fā)展的終目的,就
大鼠腦缺血再灌注損傷模型2023/12/20
大鼠腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦缺血再灌注損傷模型:麻醉大鼠,然后在頸部中線切開(kāi)一個(gè)切口,暴露頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,用無(wú)菌縫合線結(jié)扎,血管夾夾住頸內(nèi)動(dòng)脈。隨后在頸總動(dòng)脈上切口,然后插入線栓。2h后,大鼠進(jìn)行再灌注。模型大鼠成功構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn):大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱,對(duì)側(cè)前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評(píng)分在1-3分,48小時(shí)內(nèi)沒(méi)有死亡,就認(rèn)為模型成功。文獻(xiàn)上用的是2-3分的模型。大鼠腦缺血再灌注損傷模型優(yōu)點(diǎn):無(wú)需開(kāi)顱,創(chuàng)傷較??;缺血部位相對(duì)固定,可控性好;可實(shí)現(xiàn)腦缺血后再灌注,是理想的標(biāo)準(zhǔn)局灶性腦缺血?jiǎng)?
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的小鼠為啥總不能生?2023/12/20
1生不出來(lái)一般小鼠生不出幼崽存在以下幾個(gè)原因:1、周齡太長(zhǎng)。一般小鼠最適配種周齡6-8周,不會(huì)超過(guò)3月齡。超過(guò)3月齡配種,容易影響繁育能力。2、遺傳因素導(dǎo)致胚胎發(fā)育到一定階段后死亡。3、雌鼠生殖系統(tǒng)有問(wèn)題,比如雙陰道、陰道閉鎖等導(dǎo)致無(wú)法生育。4、雄鼠不給力,比如生殖器異常,無(wú)法完成交配行為等。5、營(yíng)養(yǎng)狀況:過(guò)度肥胖和過(guò)度瘦弱的雌鼠,都不能有效哺乳幼崽。順帶一提,肥胖雄鼠不能進(jìn)行正常的爬跨和交配,質(zhì)量也不好。2已生育但是成活率低小鼠幼崽成活率低主要是因?yàn)檫@幾個(gè)頗有“戲劇性"的原因。一、母性差。小鼠
達(dá)為科動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心經(jīng)典模型目錄2023/12/20
我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物化學(xué)、病理檢測(cè)、基因檢測(cè)等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過(guò)高度細(xì)分、較好的服務(wù)平臺(tái),為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。我們的目標(biāo)是為了使您的工作更輕松、更快捷。為了實(shí)現(xiàn)一站式服務(wù)我們不斷更新實(shí)驗(yàn)方法和引進(jìn)新的產(chǎn)品,控制和降低各種成本,為您的研究加油。這既是一項(xiàng)長(zhǎng)期而艱巨的工作,又是一項(xiàng)光榮的
MPTP誘導(dǎo)的帕金森氏模型技術(shù)服務(wù)2023/12/20
藥品:1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine(MPTP)是一種廣泛使用的化學(xué)物質(zhì),用于在動(dòng)物體內(nèi)誘導(dǎo)類似于PD的狀態(tài),注射MPTP的小鼠已被廣泛接受為PD模型。動(dòng)物:成年雌性Balb/c小鼠,10周齡。造模:成年雌性Balb/c小鼠,連續(xù)7天給予MPTP(15mg/kg/天),腹腔注射。模型的評(píng)價(jià):1.曠場(chǎng)活動(dòng)測(cè)試(Openfieldlocomotionactivitytest):曠場(chǎng)(45cm×45cm×25cm)準(zhǔn)備好,將小鼠放入盒子中,熟悉
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