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Pull-down靶蛋白質譜鑒定檢測技術服務詳情介紹

在生物體的生命活動中,蛋白質的功能是通過蛋白質與蛋白質之間的相互作用來實現(xiàn)的。因此,研究新的蛋白互作可以為研究蛋白質的潛在功能提供新的方向。在諸多蛋白互作鑒定實驗中,Pull-down常用于體外蛋白互作檢驗,以及幫助發(fā)現(xiàn)新的互作蛋白。Pull-down實驗利用高度純化且富集的誘餌蛋白捕獲在細胞中相互作用較弱或豐度低的靶蛋白,大幅度提高發(fā)現(xiàn)新靶蛋白的效率。Pull-down實驗的具體步驟為:表達純化GST、polyHis或Biotin標記的誘餌蛋白,使用固定化親和配體將誘餌蛋白與固相基質穩(wěn)定結合,再將誘餌蛋白與待測細胞裂解液進行混合孵育,在這一過程中,誘餌蛋白與目標蛋白相互作用并結合在一起,通過清洗除去非特異性結合的雜蛋白,即可獲得與誘餌蛋白相互作用的目標蛋白,再通過質譜分析對目標蛋白進行鑒定。 百泰派克公司利用進口的GST pull-down試劑盒,能夠快速準確的完成蛋白互作實驗,結合公司優(yōu)良的UPLC-MS質譜平臺,推出基于pull down的蛋白分析一站式技術服務,靈敏度高、分辨率準確。我們既可以為您pull down實驗后的蛋白樣品進行檢測,也可以您寄來樣品,我們從pull down實驗到樣品質譜分析一站式解決。您只需要將您的需求和樣品寄給我們,我們會負責項目后續(xù)所有事宜,包括樣品前處理、pull down、質譜分析、質譜原始數(shù)據(jù)分析。



Pull-down蛋白質鑒定流程

Pull-down蛋白質鑒定流程


關于樣品

1D SDS PAGE /2D PAGE gels樣品: 1. Coomassie Blue, SYPRO Ruby以及Silver stain樣品均可進行蛋白的鑒定試驗; 2. 銀染的樣品有可能與后續(xù)的質譜分析不兼容,我們推薦您使用下面的產(chǎn)品或者實驗步驟進行銀染實驗: ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2) Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480) 3. 銀染的樣品請不要進行脫色處理 液體樣品(In solution format): 1. 如果您洗脫的樣品需要跑膠,請按照1D SDS PAGE樣品準備要求準備樣品即可; 2. 假如樣品中蛋白量>10ug,我們對樣品的緩沖體系沒有要求; 3. 假如樣品中蛋白量<10ug,樣品準備過程中盡量減少SDS等表面活性劑的使用,并注意降低鹽濃度; 4. 提交樣品過程中,請同時提供樣品的緩沖體系和樣品中蛋白的預估含量; 樣品運輸: 我們推薦您將樣品凍干后進行運輸,凍干樣品中蛋白非常穩(wěn)定; 液體樣品推薦干冰運輸,短途運輸冰袋也可以; 注意: 利用質譜進行蛋白樣品的鑒定,在樣品準備過程中需佩戴手套和頭套,盡量避免自身角蛋白(keratin)對樣品的污染。

















中/英文項目報告

在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括: 1. 實驗步驟(中英文) 2. 相關的質譜參數(shù)(中英文) 3. 質譜圖片 4. 原始數(shù)據(jù) 5. 鑒定的蛋白質詳細信息







Pull-down靶蛋白質譜鑒定一站式服務

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-數(shù)據(jù)分析-項目報告



百泰派克生物科技特色項目


一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對蛋白質序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對蛋白質的氨基酸組成分析,N端測序,C端測序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質,提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。


※服務優(yōu)勢:

1.采用目前世界上優(yōu)良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、蛋白質組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。


※服務優(yōu)勢:

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。



三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數(shù)據(jù)轉換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。


※服務優(yōu)勢:

1.技術優(yōu)良,*技術空白

采用金屬標記抗體技術,避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質。



百泰派克生物科技七大檢測平臺




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質譜多組學優(yōu)質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;

2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務;

3.業(yè)務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;

4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;

5.服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質的生物質譜分析服務!



Pull-down靶蛋白質譜鑒定檢測技術服務詳情介紹


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