上海達沃醫(yī)藥科技有限公司擁有多名行業(yè)內(nèi)*專家，使用*的確認測試設(shè)備，具有CMA資質(zhì)，驗證確認服務(wù)客戶近三百家。

滅菌器溫度驗證除了對設(shè)備的基本要求外，藥廠一般需要針對滅菌器做以下的一些測試來確保滅菌器的使用是否符合要求。

一、溫度分布：溫度分布一般分為空載溫度分布和負載溫度分布，負載溫度分布又根據(jù)實際滅菌情況一般會進行zui小負載以及滿載兩種情況（視實際滅菌情況而定，不同藥廠需求不一樣，測試條件也就不一樣）

二、熱穿透實驗：一般情況下分為濕熱滅菌和干熱滅菌兩種，由此會涉及到一些基本概念，滅菌效果衡量F值

F值：在z值條件下，一個溫度為T，時間為t的滅菌程序，等效于T_ref時所需要的時間。

F₀值：（濕熱滅菌效果衡量）

      在Z=10℃條件下，一個溫度為T，時間為t的滅菌程序，等效于T_ref=121.1℃時所需要的時間。

F_H值：（干熱滅菌效果衡量）

      在Z=20℃條件下，一個溫度為T，時間為t的滅菌程序，等效于T_ref=170℃時所需要的時間

      干熱出熱原效果衡量F_H值T_ref=170℃ Z=54℃

注釋：①滅菌溫度系數(shù)Z值：某微生物的D值下降為之前的1/10所需要升高的溫度

          ②微生物耐熱參數(shù)D_T值：在溫度為T的條件下，使得微生物減少90%所需要的時間

不同藥廠根據(jù)所需要滅菌的物品的不同，所要求的F0值或Fh值也不同，這個要根據(jù)具體情況而定。

舉例：上海某藥廠驗證某臺高壓蒸汽滅菌器，所需驗證程序有115℃ 30min ；121℃ 20min 和115℃ 30min 是該藥廠用來滅培養(yǎng)基的溫度設(shè)定程序，121℃ 20min一般所滅菌的物品為玻璃器皿、潔凈服、和廢棄菌種這些可以過渡滅殺的物品。這兩個程序都需要驗證空載溫度分布、zui小負載熱穿透以及zui大負載熱穿透，其中空載溫度分布是驗證該滅菌器在空載運行狀態(tài)下在滅菌階段時其腔體內(nèi)部是否能夠滿足溫度分布的要求，負載熱穿透（zui大負載以及zui小負載）時，其滅菌效果是否能夠達到藥廠所要求的滅菌效果（具體的就是以F0值來體現(xiàn)）

的方法如下：

一、空載熱分布測試

1.至少選擇10個溫度探頭，（較大的滅菌器可以選擇15~20個探頭），編號后固定在水平向和垂直向有代表性的空間內(nèi)，幾何中心和角落應(yīng)有代表性點，另外在與溫度控制傳感器相連的冷凝水排放口（低溫點）放置探頭。

2.連續(xù)重復3次測試應(yīng)符合要求。

注意:

(1)測溫探頭*不能與滅菌腔的金屬表面接觸，連接線應(yīng)與設(shè)備密封完好。通常情況下，冷凝的排水口是可能的zui冷點。

(2)驗證過程中無論使用有線傳感器還是無線溫度探頭，探頭必須校正。通常在驗證前和驗證后全部探頭在恒溫爐中進行測試。通?？梢赃M行0℃、125℃兩個條件的測試，各探頭校準偏差應(yīng)小于±0.5℃(驗證設(shè)備有特殊要求時，可依據(jù)相關(guān)要求進行校準）。

(3)探頭數(shù)量依據(jù)滅菌器托盤而定，但為保證熱分布測試的代表性，探頭必須覆蓋被分化成大致體積*的整個空間，生產(chǎn)操作中三點必須要求：zui冷點的產(chǎn)品探頭、設(shè)備本身附帶的溫度探頭、冷凝排水口探頭。

二、滿載熱分布和熱穿透試驗

1.過度殺滅法：測試時，通常只考慮連續(xù)進行3次熱穿透試驗，以確保測試點持續(xù)到達足夠的殺滅效力。熱穿透溫度探頭可以根據(jù)熱分布數(shù)據(jù)放置在zui難穿透點的滅菌物中。

A 同一物品滅菌時探頭應(yīng)均一分布；多種物品混裝滅菌時控頭放置點應(yīng)有代表性，獲得的溫度數(shù)據(jù)可以確定難于滅菌的位置。對于熱穿透探頭數(shù)量沒有硬性規(guī)定，但zui小F0值必須大于12分鐘。

B 每個循環(huán)從開始到滅菌的時間應(yīng)該*的，可重現(xiàn)的。就重要性而言，通常只關(guān)注熱穿透數(shù)據(jù)，而對于熱分布溫度沒有硬性標準。熱分布數(shù)據(jù)多用于考察隨著使用時間延長設(shè)備本身的性能變化。實施熱穿透測試時，如果同時進行熱分布測試，則熱穿透探頭數(shù)量和溫度分布探頭的*比例為5:1。設(shè)備負荷應(yīng)該考慮一定靈活性，以便生產(chǎn)作業(yè)時部分裝載。

對均一滅菌物（如膠塞）而言，負載中的冷點非常容易識別。因此部分裝載往往視為已驗

=證的整體裝載的一部分。注意：負載的冷點因待滅菌物的包裝方式、結(jié)構(gòu)、滅菌物類型而

不同。實施熱穿透試驗前，首先應(yīng)明確裝載布置圖。

2.殘存概率法：對于該滅菌方式，滿載熱分布和熱穿透測試應(yīng)分別實施，并制定詳細的溫度探頭分布圖。滿載熱分布溫度探頭分布與空載*。每種裝載的連續(xù)3次測試應(yīng)能夠證實溫度分布的重現(xiàn)性。熱分布的溫度要求為同一時刻各點之間的差值應(yīng)不超過2℃。熱穿透測試探頭通常隨著滅菌器容積大小而變化。典型的裝載托盤或裝載車至少配置10只探頭，全部插入相應(yīng)的產(chǎn)品容器，將容器固定在難于穿透的位置進行測試。通過驗證試驗確認熱點、冷點、選擇的溫度控制點之間的關(guān)系。熱穿透數(shù)據(jù)可以證實負載內(nèi)所獲取的zui高溫度和zui大F0值，應(yīng)不影響產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定性，同時確保冷點達到足夠的殺滅效果。

三、微生物挑戰(zhàn)性試驗

1.在過度殺滅法中，通常選擇菌種G.stearothermophilus或其芽孢，也可采用其他對濕熱滅菌耐熱性強的微生物。

2.在殘存概率法中典型的生物指示劑包括：Clostridium sporogenes (生梭芽抱桿菌）、Bacillus smithii(史密氏桿菌）和Bacillus subtilis (枯草芽孢桿菌5230)。

生物指示劑可以放置在溫度探頭的測試點附近，滅菌后的生物指示劑通過復活、相關(guān)的微生物測試程序，應(yīng)證實滅菌程序可以實現(xiàn)低于10^-6的存活概率。

四、氣密性試驗

將絕壓變送器安裝在滅菌腔室上，抽真空，至內(nèi)室壓力為7kpa（或以下），關(guān)閉全部與滅菌室相連的閥門、真空泵，觀察時間t和壓力p1 至少等待300秒，但不得超過600秒，讓滅菌器的冷凝水汽化，然后記錄時間t2和p2 。600秒±100秒之后，再記錄一次t3和p3 計算600秒內(nèi)的升壓速率=（P3-P2)/(T3-T2)

判定標準：不應(yīng)超出1.3kpa/10min。

依據(jù)標準：

2010版GMP及指南

ISO 17665 : 《Sterilisation of health care products - moist heat.》

《衛(wèi)生保健品滅菌-蒸汽滅菌》

EN 285：2015 : 《 sterilises  Steam sterilisers – Big sterilisers》

《滅菌 蒸汽滅菌 大型滅菌設(shè)備》

GB 8599-2008《 大型蒸汽滅菌器技術(shù)要求自動控制型》

藥品GMP指南2010

YY 0646-2015 《小型蒸汽滅菌器 自動控制型》

JBT 20001-2011《注射劑滅菌器》

現(xiàn)行版中國藥典