NBS4926 EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑
- 公司名稱 上海諾寧生物科技有限公司
- 品牌 NoninBio
- 型號 NBS4926
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2023/12/14 20:27:21
- 訪問次數(shù) 119
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
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EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 |
NBS4926-0.5ml | EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml |
NBS4926-1ml | EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑 | 1ml |
NBS4926-5ml | EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑 | 5x1ml |
產(chǎn)品簡介:
EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑是一款高性能、高品質(zhì)的通用型基因轉(zhuǎn)染試劑，既可用于傳送質(zhì)粒DNA，又具有較強的RNA轉(zhuǎn)染能力。與其它轉(zhuǎn)染試劑相比，具有不受血清影響、毒性低、穩(wěn)定性好、轉(zhuǎn)染簡單易行、重復性好等優(yōu)點。
應用范圍:
EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑可適用于眾多較難轉(zhuǎn)染細胞株的DNA/siRNA轉(zhuǎn)染、瞬時轉(zhuǎn)染及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。適用于多種貼壁細胞，特別適用于各種較難轉(zhuǎn)細胞如L929、NIH3T3、MCF-7和A549等，均可得到較高的轉(zhuǎn)染效率，且重復性好。
保存條件:
2-8℃保存一年
運輸：
常溫運輸
質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染:
以24孔板為例，請參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模調(diào)整，步驟如下:
1 | 細胞接種: 每孔接種0 . 5 ~ 1 . 0 × 105 個細胞，細胞培養(yǎng) 12~24小時，使轉(zhuǎn)染時細胞密度達到60~70%融合度 |
2 | 質(zhì)粒稀釋: 將0.4 µg質(zhì)粒稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中，終體積10 µL |
3 | 復合物制備: 按比例取適量EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中，終體積10µL，室溫孵育5分鐘后與質(zhì)粒稀釋液混勻 |
4 | 室溫靜止20分鐘 |
5 | 每孔20 µL復合物加入細胞培養(yǎng)板中，混勻，37℃培養(yǎng)18~48小時后檢測基因表達，無需更換培養(yǎng)基 |
siRNA的轉(zhuǎn)染:
轉(zhuǎn)染步驟與DNA相同，請參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模進行調(diào)整，所有數(shù)量和體積均是按孔計算。轉(zhuǎn)染高密度細胞可獲得高轉(zhuǎn)染效率、高表達水平和低細胞毒性。
質(zhì)粒DNA和siRNA的轉(zhuǎn)染優(yōu)化:
可通過改變細胞密度、DNA/siRNA濃度及EZ ploy™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑濃度對轉(zhuǎn)染進行優(yōu)化。保證細胞融合度在60%以上，EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑(µL)：DNA (µg)可以在1:1和5:1之間調(diào)整；EZ poly™DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑(µL): siRNA (pmol)可以在0.02:1和0.15:1之間調(diào)整。
表1. 不同培養(yǎng)板所需轉(zhuǎn)染試劑和DNA/siRNA的用量
培養(yǎng)板 | 單孔面積 | 接種 培養(yǎng)基 | Opti-MEM 稀釋后終體積 | DNA轉(zhuǎn)染 | siRNA轉(zhuǎn)染 | ||
試劑用量 | DNA | 試劑用量 | siRNA | ||||
96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 2×5µL | 0.4µL | 0.2µg | 0.5µL | 7.5pmol |
24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 2×10µL | 0.8µL | 0.4µg | 1.0µL | 15pmol |
12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 2×20µL | 1.6µL | 0.8µg | 2.0µL | 30pmol |
6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 2×50µL | 2.0µL | 1.0µg | 4.0µL | 60pmol |
60mm | 20.0cm2 | 5mL | 2×0.1mL | 8.0µL | 4.0µg | 10µL | 100pmol |
100mm | 60.0cm2 | 15mL | 2×0.3mL | 24µL | 12µg | 30µL | 300pmol |
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