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上海聯(lián)碩生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年
你所不了解的過(guò)氧化氫酶(CAT)2024/09/23
過(guò)氧化氫酶是一種普遍存在于幾乎所有生物體內(nèi)的一種抗氧化酶,主要分布于植物的葉綠體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、動(dòng)物的肝和紅細(xì)胞中。它是過(guò)氧化物酶體的標(biāo)志酶,約占過(guò)氧化物酶體酶總量的40%。過(guò)氧化氫酶是由四個(gè)多肽鏈組成的同源四聚體,每一個(gè)亞基含有超過(guò)500個(gè)氨基酸殘基,且每個(gè)亞基的活性位點(diǎn)都含有一個(gè)卟啉血紅素基團(tuán),用于催化過(guò)氧化氫的反應(yīng)。過(guò)氧化氫酶的最適pH接近7,最適溫度則因物種而異。過(guò)氧化氫酶的主要作用是催化過(guò)氧化氫分解為水和氧氣,清除體內(nèi)的過(guò)氧化氫,從而使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害,是生物防御體系的關(guān)鍵
標(biāo)準(zhǔn)溶液如何配置2024/09/20
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過(guò)程標(biāo)準(zhǔn)溶液是指已知準(zhǔn)確濃度的試劑溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液包括鐵、錳、鎳、銅、硅、釩等金屬、非金屬還有石油類、陰離子、標(biāo)準(zhǔn)樣品及標(biāo)準(zhǔn)溶液(單標(biāo)及混標(biāo)共100多種)。標(biāo)準(zhǔn)溶液有兩種配制方法:(1)直接配制法準(zhǔn)確稱取一定量的基準(zhǔn)試劑,溶解后定量轉(zhuǎn)入容量瓶中,加試劑水稀釋至刻度,充分搖勻,根據(jù)稱取基準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量和容瓶體積,計(jì)算其準(zhǔn)確濃度。(2)間接配制法間接配制法又稱標(biāo)定法,是指將要配制的溶液先配制成近似于所需濃度的溶液,然后再用基準(zhǔn)物或標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定出它的準(zhǔn)確濃度。注意事項(xiàng)(1)稱樣時(shí)要準(zhǔn)確稱量,且
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)2024/09/18
1、細(xì)胞復(fù)蘇將細(xì)胞凍存管從干冰中取出,立即放置37°水浴速融1min,見無(wú)冰晶即可不再水浴(用鑷子拿?。⒓?xì)胞凍存液加入10~15ml完培中,吹打混勻,減少DMSO對(duì)細(xì)胞毒性,800rpm離心5min棄上清,細(xì)胞沉淀進(jìn)行下一步傳代。2、細(xì)胞傳代試劑與材料(貼壁細(xì)胞):細(xì)胞:4T1乳腺癌細(xì)胞;基礎(chǔ)培養(yǎng)基:1640培養(yǎng)基(含有生物素、維生素B12、對(duì)氨基苯甲酸PABA、高濃度的維生素肌醇和膽堿;不含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或生長(zhǎng)因子);血清:胎牛血清FBS(細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)液:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子
重組蛋白可分為哪幾種2024/09/14
重組蛋白的產(chǎn)生是應(yīng)用了重組DNA或重組RNA的技術(shù)從而獲得的蛋白質(zhì)。體外重組蛋白的生產(chǎn)主要包括四大系統(tǒng):原核蛋白表達(dá),哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá),酵母蛋白表達(dá)及昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)。生產(chǎn)的蛋白在活性和應(yīng)用方法方面均有所不同。根據(jù)自身的下游運(yùn)用選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng),提高表達(dá)成功率。按功能分,可分為以下幾種:1.白細(xì)胞介素(Interleukin,IL)由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子。由于最初是由白細(xì)胞產(chǎn)生且又在白細(xì)胞間發(fā)揮作用,所以得名,現(xiàn)仍沿用此名。2.干擾素(interferon,IFN
ECL化學(xué)化學(xué)發(fā)光底物(超敏)的操作步驟2024/09/11
ECL化學(xué)化學(xué)發(fā)光底物(超敏)可為使用辣根過(guò)氧化物酶(HRP)偶聯(lián)物的免疫印跡實(shí)驗(yàn)提供明亮的信號(hào)和低皮克級(jí)檢測(cè)靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液,以出色性能、通用性和高性價(jià)比,滿足用戶的免疫印跡應(yīng)用需求。操作步驟:1、執(zhí)行常規(guī)SDS-PAGE、轉(zhuǎn)模和WesternBlot步驟。注意用HRP標(biāo)記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。2、WesternBlot最后一次洗模的同時(shí)配置發(fā)光工作液:分別取等體積的A液和B液,放入干凈容器中混合(注意吸取A液和B液的吸頭一定
凍存管為什么會(huì)爆炸?如何避免?2024/09/09
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中我們可能會(huì)用到凍存管對(duì)樣品進(jìn)行凍存,但是在用液氮進(jìn)行凍存的時(shí)候經(jīng)常會(huì)發(fā)生凍存管爆炸的事件,這不僅會(huì)使實(shí)驗(yàn)樣品損失,甚至可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員造成傷害,那么該如何避免這種情況發(fā)生呢?原因:首先,凍存管都是不能直接放到液氮的液相中進(jìn)行保存的。因?yàn)槌R妰龃婀艿墓苌砗凸苌w材質(zhì)不一樣,在進(jìn)行冷凍時(shí)產(chǎn)生的熱脹冷縮速率也不同。如果將凍存管直接放到液相之中,就可能會(huì)讓液氮流到管內(nèi)。在下一次將樣品進(jìn)行復(fù)蘇時(shí),把凍存管放入37℃的水浴當(dāng)中,管內(nèi)的液氮迅速氣化膨脹,但是氣體不能及時(shí)從管內(nèi)跑出去,所以導(dǎo)致凍存管爆
什么是抗體?抗體的主要功能是什么?2024/09/02
定義:抗體(antibody)是指機(jī)體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的蛋白質(zhì)。它(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。抗體是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白??贵w按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體等。按抗體產(chǎn)生的來(lái)源分為正??贵w(天然抗體),如血型ABO型中的抗A和抗B的抗體,和免疫抗體如抗微生物的
養(yǎng)好的細(xì)胞如何凍存?2024/08/30
在不附加任何保護(hù)劑下直接凍存細(xì)胞時(shí),細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細(xì)胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑,可使冰點(diǎn)降低。在緩慢的凍結(jié)條件下,能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞。貯存在﹣130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。細(xì)胞凍存時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái),待復(fù)蘇時(shí)重新進(jìn)入生長(zhǎng)分裂周期。實(shí)驗(yàn)開始前,將凍存管、15毫升離心管、移液管、移液槍、槍頭等放入無(wú)菌超凈工作臺(tái),以紫外線照射30分鐘。采用通風(fēng)機(jī)通風(fēng)3分鐘。以
木聚糖酶活性測(cè)定方法分享2024/08/23
木聚糖是一種存在于植物細(xì)胞壁中的多糖類物質(zhì),是植物半纖維素的主要成分。木聚糖酶分布廣泛,可以從動(dòng)物、植物及微生物體內(nèi)獲得。檢測(cè)原理:木聚糖酶可以將底物木聚糖降解為寡糖和單糖,具有還原性的寡糖和單糖在沸水浴的條件下,能夠和DNS試劑發(fā)生顯色反應(yīng)。通過(guò)反應(yīng)溶液的顏色的變化,來(lái)確定還原糖的含量。因?yàn)檫€原糖的生成量和反應(yīng)液的木聚糖活力是成正比的,通過(guò)分光光度法可以測(cè)定,計(jì)算出樣品中的木聚糖酶活力。檢測(cè)所用的試劑:乙酸溶液、乙酸鈉溶液、氫氧化鈉溶液、乙酸-乙酸鈉緩沖溶液、木糖溶液、木聚糖溶液、DNS試劑。
各種細(xì)胞培養(yǎng)基的區(qū)別2024/08/19
現(xiàn)代的細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)具有固定的培養(yǎng)基配方,如DMEM、RPMI1640。它們大多屬于經(jīng)典培養(yǎng)基。它們是如何發(fā)展起來(lái)的?許多人做實(shí)驗(yàn)只養(yǎng)一兩種細(xì)胞,也許只遇到一兩種培養(yǎng)基。但在歷*積累起來(lái)的經(jīng)典培養(yǎng)基實(shí)際上已至少有十幾種。回顧這些培養(yǎng)基,也許能看到前人為發(fā)展細(xì)胞培養(yǎng)而做出的一些努力。zui早的經(jīng)典培養(yǎng)基是BME,是由美國(guó)生理學(xué)家HarryEagle(1905-1992)在1955年開發(fā)的,用于培養(yǎng)HeLa細(xì)胞和小鼠成纖維細(xì)胞。他發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞體外生長(zhǎng)所必需的zui低營(yíng)養(yǎng),這就是BME的配方。它由氨基酸、
牛血清中球蛋白的作用2024/08/12
1、球蛋白定義球蛋白(G或GLB)是多種蛋白質(zhì)的混合物,包括具有防御作用而且含量較多的免疫球蛋白和補(bǔ)體、多種糖蛋白。2、球蛋白分類通過(guò)電泳的方法,球蛋白可分為α1,α2,β和γ球蛋白。它們大部分都是由肝臟合成。α1-球蛋白又分為α1-酸性糖蛋白和α脂蛋白。α1-酸性糖蛋白參與運(yùn)輸氨基己糖,α脂蛋白參與運(yùn)輸脂類。α2-球蛋白包括α2糖蛋白、纖溶酶原、凝血酶原、結(jié)合珠蛋白、銅藍(lán)蛋白和α2微球蛋白等。纖溶酶原、凝血酶原參與凝血。結(jié)合珠蛋白能和游離的血紅蛋白結(jié)合,防止血紅蛋白和鐵流失。銅藍(lán)蛋白參與銅代謝
保存血清時(shí)遇突發(fā)問(wèn)題怎么辦?2024/08/05
1.保存血清的方法是怎樣的呢?我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。2.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品品質(zhì)受損?我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白
瓊脂和瓊脂糖有何相似之處?2024/08/02
瓊脂和瓊脂糖的區(qū)別瓊脂和瓊脂糖之間的主要區(qū)別在于,瓊脂是從紅藻中獲得的凝膠狀物質(zhì),而瓊脂糖是從瓊脂或紅海藻中純化的線性聚合物。瓊脂和瓊脂糖是來(lái)自紅藻或海藻的兩種多糖產(chǎn)品。它們?cè)诟鱾€(gè)領(lǐng)域都非常有用,從廚房(如食物)到化學(xué)實(shí)驗(yàn)室(作為細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)物)。因此,這些資源的種植具有商業(yè)價(jià)值,并且正在亞洲和美國(guó)的部分地區(qū)進(jìn)行。在結(jié)構(gòu)上,瓊脂糖是一種線性聚合物,由交替的D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖單元組成。另一方面,瓊脂是瓊脂糖和瓊脂膠的混合物。什么是瓊脂?瓊脂或瓊脂-瓊脂是從江蘺和石花菜等紅藻中提
針式過(guò)濾器的特點(diǎn)2024/07/29
操作簡(jiǎn)便結(jié)構(gòu)緊湊:針頭過(guò)濾器結(jié)構(gòu)緊湊,易于安裝和拆卸,使用起來(lái)非常方便。這種設(shè)計(jì)特別適用于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境,方便研究人員快速完成樣品過(guò)濾。顏色代碼:許多針頭過(guò)濾器的外殼上配有顏色外圈條,用于清楚地標(biāo)明內(nèi)部濾膜的類型,便于用戶識(shí)別和選擇適合的過(guò)濾器。高效可靠高效過(guò)濾:針頭過(guò)濾器能夠非常有效地去除流體中的微小雜質(zhì),如顆粒物、細(xì)菌等,從而提高流體的純度和清潔度。在生物制藥、電子行業(yè)、化學(xué)工業(yè)等領(lǐng)域中,這種高效的過(guò)濾能力至關(guān)重要??煽啃愿撸横橆^過(guò)濾器的制造過(guò)程通常在可控制的環(huán)境和自動(dòng)過(guò)程中進(jìn)行,確保了產(chǎn)品的穩(wěn)
聯(lián)碩生物AMEKO助力科研,論文獎(jiǎng)勵(lì)金等您來(lái)拿!2024/07/23
聯(lián)碩生物旗下AMEKO品牌擁有完整試劑庫(kù),覆蓋整個(gè)生命科學(xué)研究領(lǐng)域。產(chǎn)品包含分子生物研究試劑、蛋白研究試劑、細(xì)胞研究試劑、免疫學(xué)研究試劑等,提供ELISA試劑盒、重組蛋白、細(xì)胞培養(yǎng)、標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑、基礎(chǔ)溶液等一系列產(chǎn)品,深受眾多科研工作者的支持與信賴。一:申領(lǐng)條件:聯(lián)碩生物鄭重聲明,只要使用產(chǎn)品屬于聯(lián)碩生物獎(jiǎng)勵(lì)范圍內(nèi)的產(chǎn)品類別,并在國(guó)際或國(guó)內(nèi)期刊上發(fā)表文章,且文章中明確注明所使用產(chǎn)品購(gòu)自聯(lián)碩生物(ShanghaiLianShuoBiotechnologyCo.,Ltd.)的所有國(guó)內(nèi)外科研人員均
如何選擇細(xì)胞培養(yǎng)板2024/07/22
培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384孔等。平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板區(qū)別和選擇不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致。因此做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí),無(wú)論是貼壁和懸浮細(xì)胞,一般選用平底板。測(cè)吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別注意材質(zhì),標(biāo)示“TissueCulture(TC)Treated”是養(yǎng)細(xì)胞用的。U型或V型板,一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí),需要二者相互接觸刺激,
電泳緩沖液有何作用?2024/07/15
電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個(gè)重要組成,是電泳場(chǎng)中的導(dǎo)體,也是維持電泳系統(tǒng)恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的作用:1.緩沖液在電泳過(guò)程中的一個(gè)作用是維持合適的pH。電泳時(shí)陽(yáng)極與陰極都會(huì)發(fā)生電解反應(yīng),陽(yáng)極發(fā)生的是氧化反應(yīng)(4OH--4e-2H2O+O2),陰極發(fā)生的是還原反應(yīng)(4H++4e-2H2),長(zhǎng)時(shí)間的電泳將使陽(yáng)極變酸,陰極變堿。一個(gè)好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)有較強(qiáng)的緩沖能力,使溶液兩極的pH保持基本不變。2.電泳緩沖液的另一個(gè)作用
PVDF膜有什么特性2024/07/12
PVDF膜是一種用于各種實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)應(yīng)用的膜,用于過(guò)濾、分離和純化生物和化學(xué)樣品。PVDF代表聚偏二氟乙烯,它是一種具有高化學(xué)和熱穩(wěn)定性的合成聚合物,使其適用于廣泛的應(yīng)用。PVDF膜通常用于蛋白質(zhì)和核酸轉(zhuǎn)移、蛋白質(zhì)印跡以及其他需要高蛋白質(zhì)結(jié)合能力和低背景干擾的應(yīng)用。PVDF膜材具有熱軟度高不易發(fā)生破裂、性價(jià)比高、制作周期短、施工速度快的優(yōu)點(diǎn)。近年來(lái)經(jīng)過(guò)工藝及材料的不斷改進(jìn),其耐候性及防污性得到進(jìn)一步提高,自潔性高的PVDF膜材的耐用年限可達(dá)15年以上,該材料目前是國(guó)內(nèi)使用量較大的膜材。特性:PV
超濾離心管的使用方法2024/07/10
超濾離心管是一種采用優(yōu)化過(guò)濾結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)方式,減少濃差極化,降低了膜易污染堵塞機(jī)率,加快了離心速度,縮短了離心所需的時(shí)間;超濾離心管還可用的膜表面面積提供快速樣品處理。超濾離心管具體用法:(1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。(2)新買來(lái)的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量過(guò)膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過(guò)管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需
電泳緩沖液的特點(diǎn)是什么?2024/07/08
電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個(gè)重要組成,是電泳場(chǎng)中的導(dǎo)體,也是維持電泳系統(tǒng)恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的特點(diǎn):1.TAE是使用廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對(duì)分子質(zhì)量(TBE中電泳時(shí)測(cè)出的相對(duì)分子質(zhì)量會(huì)大于實(shí)際分子質(zhì)量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時(shí)用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時(shí)也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的
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