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小鼠ELISA試劑盒應(yīng)留意的問(wèn)題2018/05/30
小鼠ELISA試劑盒應(yīng)留意的問(wèn)題:1、封板膜只限一次性運(yùn)用,以避免穿插污染。2、底物請(qǐng)避光保存。3、嚴(yán)厲依照技能說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。4、一切樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按感染物處理。5、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。6、如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。操作時(shí)樣本的制備辦法:A、高值樣本:a)至少選用三個(gè)高濃度樣本,稀釋倍數(shù)應(yīng)為功能標(biāo)明的zui大稀釋倍數(shù)、并適當(dāng)添加或減小稀釋份額。b)選取含被測(cè)物的高值樣本,必要時(shí)可添加被分析物的純品,并計(jì)算出理論值。c)運(yùn)用混
大鼠ELISA試劑盒運(yùn)用留心以下相關(guān)事宜2018/05/28
大鼠ELISA試劑盒運(yùn)用留心以下相關(guān)事宜:1、若不相同批號(hào)試劑盒的不相同組分(A液或酶工作液),或不相同試劑盒的不相同組分進(jìn)行交叉運(yùn)用,有或許出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等現(xiàn)象。2、不相同出產(chǎn)的試劑盒因出產(chǎn)工藝和操作方法略有不相同,有必要依照所用試劑盒嚴(yán)厲操作。3、反應(yīng)時(shí)間的過(guò)失,做許多標(biāo)本時(shí),*孔和zui終一孔以及一些特別標(biāo)本或許影響較大。4、臨界值附近標(biāo)本不堅(jiān)定為正?,F(xiàn)象,任何試劑盒均不可避免,能夠思考將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。5、ELISA試劑盒加樣時(shí)樣品量過(guò)失,對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值
人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)收集的標(biāo)本2018/05/25
人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)收集的標(biāo)本尿液標(biāo)本同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,管形)相對(duì)集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病
小鼠ELISA試劑盒技術(shù)基礎(chǔ)知識(shí)講解2018/05/23
小鼠ELISA試劑盒技術(shù)基礎(chǔ)知識(shí)講解酶免疫技術(shù)是以酶標(biāo)記的抗體或抗原為主要試劑的方法,是標(biāo)記免疫技術(shù)的一種。免疫技術(shù)是利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行的檢測(cè)方法,即應(yīng)用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑,以檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗體或抗原。它的特點(diǎn)是具有高度的特異性和敏感性。如將抗原或抗體用可以微量檢測(cè)的標(biāo)記物(例如放射性核素、熒光素、酶等)進(jìn)行標(biāo)記,則在與標(biāo)本中的相應(yīng)抗體或抗原反應(yīng)后,可以不必測(cè)定抗原抗體復(fù)合物本身,而測(cè)定復(fù)合物中的標(biāo)記物,通過(guò)標(biāo)記物的放大作用,進(jìn)一步提高了免疫技術(shù)的敏感性。這種標(biāo)記免疫技術(shù)一般分
大鼠ELISA試劑盒使用要點(diǎn)2018/05/21
大鼠ELISA試劑盒使用要點(diǎn):1、按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。2、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。3、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。4、標(biāo)本由于冷藏時(shí)IgG聚合成多聚體,F(xiàn)ib非特異性吸附,反復(fù)凍融機(jī)械切力致使蛋白分子受損。5、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。7、加樣時(shí)不準(zhǔn),槍
人ELISA試劑盒具體實(shí)驗(yàn)作用2018/05/16
人ELISA試劑盒具體實(shí)驗(yàn)作用:①:有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。②:是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。③:提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。④:起酸堿度緩沖液作用。⑤:提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。⑥:提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。人ELISA試劑盒糖抗原15-3(CA15-3)ELISA試劑盒,英文名:
小鼠ELISA試劑盒樣本處理和保存方面要考慮以下幾個(gè)方面2018/05/14
小鼠ELISA試劑盒樣本處理和保存方面要考慮以下幾個(gè)方面:(1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過(guò)氧化物的活性,因此,在以hrp為標(biāo)記酶的elisa測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相,從而與后面加入的hrp底物反應(yīng)顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)收集的標(biāo)本2018/05/11
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)收集的標(biāo)本尿液標(biāo)本同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,管形)相對(duì)集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的
人ELISA試劑盒操作時(shí)應(yīng)留心2018/05/09
人ELISA試劑盒操作時(shí)應(yīng)留心:1、底物A應(yīng)蒸發(fā),防止長(zhǎng)期翻開(kāi)蓋子,底物B對(duì)光活絡(luò),防止長(zhǎng)期露出于光下,防止用手觸摸,試驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。2、試驗(yàn)中不必的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保留,防止蛻變。3、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,運(yùn)用前恢復(fù)到室溫,稀釋后的規(guī)范品應(yīng)丟掉,不可保留。4、運(yùn)用一次性的吸頭防止穿插污染,防止運(yùn)用帶金屬的加樣器。5、依照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)刻、加液的量及次序進(jìn)行溫育操作。6、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,不相同批號(hào)的試劑不要混用,保質(zhì)期前運(yùn)用。7、洗刷酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,
小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中注意事項(xiàng)總結(jié)如下2018/05/07
小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中注意事項(xiàng)總結(jié)如下1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過(guò)氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA試劑盒測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。(3)
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物體液采集方法分析2018/05/04
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物體液采集方法分析一、血液的采集常用的采血方法有割(剪)尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈(動(dòng)脈)采血、股動(dòng)脈(靜脈)采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈才學(xué)、后肢小靜脈采血等。二、尿液的采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的尿液常用代謝籠采集,也可通過(guò)其他裝置來(lái)采集。(一)用代謝籠采集尿液代謝籠用于收集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自然排出的尿液,是一種特別設(shè)計(jì)的為采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各種排泄物的密封式飼養(yǎng)籠,有的代謝籠除可收集尿液外,又可收集糞便和動(dòng)物呼出的CO2。一般簡(jiǎn)單的代謝籠主要用來(lái)收集尿液。防在代謝籠
人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作時(shí)的注意事項(xiàng)和要點(diǎn)2018/05/02
人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作時(shí)的注意事項(xiàng)和要點(diǎn)(1)劃分操作區(qū):目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實(shí)現(xiàn)*閉管操作,但無(wú)論是否能夠達(dá)到單人單管,均要求實(shí)驗(yàn)操作在三個(gè)不同的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區(qū)內(nèi)進(jìn)行:①標(biāo)本處理區(qū),包括擴(kuò)增摸板的制備;②PCR擴(kuò)增區(qū),包括反應(yīng)液的配制和PCR擴(kuò)增;③產(chǎn)物分析區(qū),凝膠電泳分析,產(chǎn)物拍照及重組克隆的制備。各工作區(qū)要有一定的隔離,操作器材,要有一定的方向性。如:標(biāo)本制備→PCR擴(kuò)增→產(chǎn)物分析→產(chǎn)物處理。切記:產(chǎn)物分析區(qū)的產(chǎn)物及器材不要拿到其他兩
小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)需要注意哪些問(wèn)題2018/04/28
小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)需要注意哪些問(wèn)題1.樣品稀釋一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過(guò)大量試驗(yàn)確定,以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性.酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽(yáng)性.2.試劑盒平衡Elisa中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上.平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠,樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分.冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘.3.樣品和試劑的混勻在稀釋前、后的樣品必須充分
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中更穩(wěn)定的方法2018/04/27
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中更穩(wěn)定的方法因?yàn)榈鞍踪|(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用,這種物理吸附長(zhǎng)短特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。還有有的包被原可能不是蛋白,對(duì)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被,親和素生物素:先親和素先包被載體,加入生物素化的DNA,這
人ELISA試劑盒使用和處理中的常見(jiàn)問(wèn)題2018/04/25
人ELISA試劑盒使用和處理中的常見(jiàn)問(wèn)題1.保存血清的方法建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。2.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品品質(zhì)受損將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白
小鼠ELISA試劑盒常見(jiàn)樣本采集方法2018/04/23
小鼠ELISA試劑盒常見(jiàn)樣本采集方法:血清:全血在室溫自然凝固30分鐘后,1000g離心30分鐘,小心收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。血漿:根據(jù)試劑盒要求選擇合適的抗凝劑,與全血混合20分鐘后,1000g離心30分鐘,小心收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。細(xì)胞培養(yǎng)上清:將細(xì)胞培養(yǎng)液300g離心10分鐘去除沉淀物,,仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。所有標(biāo)本收集完成后,應(yīng)及時(shí)分裝放在-20℃或-70℃條件下保存,避免反復(fù)凍融。如果在24小時(shí)內(nèi)檢測(cè),樣本可以
大鼠ELISA試劑盒檢測(cè)抗體的方法2018/04/20
大鼠ELISA試劑盒檢測(cè)抗體的方法反響辦法與雙抗體夾心法相似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶聯(lián)絡(luò)物,以檢查相應(yīng)的抗體。與直接法測(cè)抗體的不一樣的地方為以酶標(biāo)抗原替代酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測(cè)定,因而其敏感度相對(duì)高于直接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢查常選用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原構(gòu)造的不一樣,尋找合適的符號(hào)辦法。只需獲得對(duì)于受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶聯(lián)絡(luò)物而樹立此法。如抗體的來(lái)歷為抗血清,包被和酶標(biāo)用的抗體別離取自不一樣種屬的動(dòng)物。如運(yùn)用
人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)記錄書基本要求2018/04/18
人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)記錄書基本要求:1.實(shí)驗(yàn)記錄本首頁(yè)一般作為目錄頁(yè),可在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后陸續(xù)填寫,或在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)統(tǒng)一填寫。2.實(shí)驗(yàn)原始記錄須記載于正式實(shí)驗(yàn)記錄本上,實(shí)驗(yàn)記錄本應(yīng)按頁(yè)碼裝訂;須有連續(xù)頁(yè)碼編號(hào),不得缺頁(yè)或挖補(bǔ)。3.每次實(shí)驗(yàn)須按年、月、日順序在實(shí)驗(yàn)記錄本相關(guān)頁(yè)碼右上角或左上角記錄實(shí)驗(yàn)日期和時(shí)間,也可記錄實(shí)驗(yàn)條件如天氣、溫度、濕度等。4.實(shí)驗(yàn)記錄本應(yīng)作為發(fā)表論文和實(shí)驗(yàn)室科技檔案管理的*文件。研究生應(yīng)在離校前將全部實(shí)驗(yàn)記錄和其他科研資料上繳實(shí)驗(yàn)室保管和存檔,不得隨意處置或丟棄。ELISA試劑
小鼠ELISA試劑盒檢測(cè)要點(diǎn)2018/04/16
小鼠ELISA試劑盒檢測(cè)要點(diǎn)·要點(diǎn)一:血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開(kāi)釋出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。ELISA的操縱因固相載體的形成不同而有所差異,海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點(diǎn)?!ひc(diǎn)二:標(biāo)本的采取和保留可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保留作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血
大鼠ELISA試劑盒操作過(guò)程2018/04/13
大鼠ELISA試劑盒操作過(guò)程:1、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,運(yùn)用前恢復(fù)到室溫。2、實(shí)驗(yàn)中不必的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,避免蛻變。3、不必的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。4、避免長(zhǎng)時(shí)間翻開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光活絡(luò),避免長(zhǎng)時(shí)間露出于光下。5、運(yùn)用一次性的吸頭避免交叉污染,避免運(yùn)用帶金屬部分的加樣器。6、運(yùn)用潔凈的塑料容器裝備洗刷液。運(yùn)用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。7、洗刷酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。8、嚴(yán)峻依照說(shuō)明書的操作方法進(jìn)行操作。說(shuō)明書以英文說(shuō)明書為主。原理
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