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Collagen,Type I，大有可為！2023/09/15

膠原蛋白（Collagen）是結締組織和內臟器官外基質的主要成分，比如I型膠原在骨、跟腱、皮膚、血管壁中含量豐富；II型膠原在透明軟骨中含量豐富；III型膠原在皮膚、血管內膜、腸道中含量豐富，彈性較好；IV型在晶狀體中含量豐富；V型主要分布在皮膚和血管壁中等。膠原蛋白在結構和遺傳學上有不同類型，膠原蛋白由三個自身按左螺旋排列的多肽鏈構成，三條相互獨立的膠原蛋白肽鏈依靠甘氨酸之間形成的氫鍵維系三股螺旋相互纏繞的結構[1]。商業(yè)上有天然和人工合成兩種不同的生產路徑，在醫(yī)療、美容、醫(yī)學和科學研究領域有

復制型慢病毒（RCL）的不同檢測方案解析2023/09/15

復制型病毒（RCR/RCL）復制型病毒/病毒載體回復突變（ReplicationCompetentVirus,RCV），可產生于病毒載體制造過程中的所有步驟當中。并且，RCV感染宿主細胞后能隨宿主細胞在培養(yǎng)液中增殖、擴增對人體健康具有嚴重的隱患，是免疫細胞治療類產品，如CAR-T產品的主要安全性風險之一。近年來，CAR-T細胞制備過程中，伴隨載體的不斷升級優(yōu)化，重組產生的復制型逆轉錄病毒/慢病毒(ReplicationCompetentRetrovirus/Lentivirus,RCR/RCL)

新品上市 | 通用型高靈敏一步RT-qPCR試劑，省時高效！2023/09/15

一步法RT-qPCR是常用的RNA分析方法之一。在一步RT-qPCR中，反轉錄酶和DNA聚合酶預混于同一管內，從而使得在單個反應中就可同時進行反轉錄和DNA擴增。相比于進行完反轉錄，準備試劑配制熒光定量反應的兩步法而言，一步RT-qPCR更加簡單快速，移液步驟更少，污染的風險大大降低，對于高通量實驗應用十分適宜。Hifair®AdvancedOneStepRT-qPCRSYBRGreenKit是一款基于SYBRGreenI染料進行熒光定量的試劑盒。對于RNA樣本，試劑盒采用耐熱Hifair®VR

無毒、無臭、無需避光的預混RNA建庫試劑盒重磅推出！2023/09/15

你在進行RNA建庫時，是否遇到過這樣的困擾：RNA實驗時，有些試劑打開一股臭味襲來，尤其是樣本很多時，這酸爽簡直能把人帶走，讓人不得不懷疑這試劑是不是有毒性；建庫試劑要求避光，總不能全程黑燈熄火操作吧？這個毒性以及需要避光的罪魁禍首就是放線菌素D。那么，建庫試劑盒中為什么要加放線菌素D呢？相關資料顯示，放線菌素D(ActinomycinD)又稱更生霉素，分子中含有一個苯氧環(huán)結構，通過它連接兩個等位的環(huán)狀肽鏈。此肽鏈可與DNA分子的脫氧鳥嘌呤發(fā)揮特異性相互作用，使放線菌素D嵌入DNA雙螺旋的小溝中

精品推薦 | 無需RNA提取，從細胞板直接獲得基因表達分析結果2023/09/13

精品推薦|無需RNA提取，從細胞板直接獲得基因表達分析結果如果你想要快速、簡便的進行細胞水平基因功能批量驗證；如果你的細胞珍貴不易獲取，想一次性針對多目標基因表達分析；如果你的起始細胞樣本稀少，希望樣本不被提取、避免損失；如果你的細胞目的基因表達水平低，希望多增加上樣量、提高成功率！Hieff®FastCellDirectProbeRT-qPCRKit針對細胞水平基因表達分析研究瓶頸設計，適用于對各種動物細胞直接進行RT-qPCR表達分析，用時短，操作簡單，出錯率低，最短只需1.5小時就可高效完

基因編輯在免疫細胞治療中的應用2023/09/13

基因編輯在免疫細胞治療中的應用1.基因編輯是什么？基因編輯是通過人工核酸酶技術將靶基因或轉錄產物進行敲除，插入等精確修飾的基因工程技術。目前基因編輯已經在多個領域中有著重要的應用，在腫瘤治療中主要與免疫治療相結合，尤其在免疫細胞治療上有巨大的發(fā)展前景。2.基因編輯的分類？目前的基因編輯技術有可編程的核酸酶技術和BE（Baseeditors)及PE（Primeeditors）技術（圖1）。圖1.基因編輯技術分類[1]可編程核酸酶主要包括鋅指核酸酶(ZFNs)和轉錄激活因子樣效應核酸酶(TALENs

漲知識 | qPCR專場五：如何分析熒光定量數據？2023/09/13

漲知識|qPCR專場五：如何分析熒光定量數據？熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產物的累積情況，從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的，并且可以通過數據分析計算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經常是差之毫厘謬以千里，所以在實驗過程中，我們需要注意諸多細節(jié)，謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實驗，拿到實驗結果，發(fā)表高分文章，走上人生呢？熒光定量PCR可

蛋白酶抑制劑/磷酸酶抑制劑2023/09/13

蛋白酶抑制劑/磷酸酶抑制劑為何清除蛋白中的蛋白酶及磷酸酶？在平衡狀態(tài)下內源性蛋白質產生并降解，因此其細胞水平是穩(wěn)定的。當在體外從細胞和組織中提取蛋白質時，與蛋白一起釋放出來的還有許多能夠降解提取物中的蛋白質的內源酶，例如磷酸酶和蛋白酶。此時由于蛋白質產生被顯著抑制，降解繼續(xù)，因此這些酶可以快速降解提取物中的蛋白。為了防止蛋白純化過程中目的蛋白不受蛋白酶的破壞，需要加入蛋白酶抑制劑對其進行活性抑制。另外，細胞中蛋白的磷酸化和去磷酸化是信號轉導、細胞增殖、細胞分化和細胞凋亡等許多重要的生物學活動的調

蛋白免疫印跡技術大揭秘！近距離防踩坑~2023/09/12

蛋白免疫印跡技術大揭秘！近距離防踩坑~蛋白免疫印跡技術是分子生物學中常用的三種印記技術之一，具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優(yōu)點，是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種的方法，如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。被廣泛應用于蛋白質相互作用、疾病診斷和藥物研發(fā)等領域。為助力解決蛋白免疫印跡技術中出現(xiàn)的問題，提高科研工作者的基礎技能水平，山東大學齊魯醫(yī)院（第一臨床學院）學生黨總支研究生第九黨支部聯(lián)合翌圣生物，于9月12日（本周二）舉辦“新學期，新征程——蛋白免疫印跡

新一代的凝膠過濾層析系列產品上線2023/09/12

凝膠過濾層析(GelFiltrationChromatography)也稱為分子篩或體積排阻層析(SizeExclusionChromatography)，是根據分子大小和形狀的差異進行分離的一種簡單可靠的層析技術。凝膠過濾層析屬于非吸附類層析。分離原理凝膠過濾填料為三維立體網狀結構，由于凝膠網孔大小的限制，大分子將不能進入凝膠顆粒內部（即被凝膠排阻在外），僅能在凝膠顆粒間隙移動，并隨緩沖液一起從柱底先行洗脫。小分子可以自由進入并擴散到凝膠顆粒內部，小分子歷經的路徑更長，將較晚從柱上洗脫。由于樣

干貨│從原理到應用，帶你全方面了解T4 gene 32 protein2023/09/12

T4噬菌體基因32編碼蛋白(T4gene32protein，gp32)是一種單鏈DNA（ssDNA）結合蛋白，為T4噬菌體DNA復制和修復所必需。它被廣泛地用于穩(wěn)定和標記ssDNA區(qū)域，以便用電子顯微鏡觀察細胞內DNA的結構、促進限制性內切酶的消化反應、提高RT-PCR中反轉錄的效率、增強T4DNA聚合酶的活性和提高PCR的產量等。T4gene32protein的結構T4gene32protein由301個氨基酸組成，大小為34kDa，包含三個不同的結構域：核心結構域、N端結構域（NTD）和C端

干貨│酶切實驗的這些坑，你肯定遇到過！2023/09/12

分子克隆作為分子生物學的一項成熟技術，幾乎每個實驗室都或多或少的會涉及。在分子克隆實驗中，限制性內切酶是克隆產品，但大家也常常因為限制性內切酶的各種問題而感到煩擾。比如小翌常被問到的：1.限制性內切酶種類這么多，不知道如何選擇；2.酶切不完或出現(xiàn)亂切、錯切的情況；3.酶切速度慢，需要1h甚至過夜酶；4.多酶切還需要選擇多款酶切緩沖液?！槍Φ?個問題，小翌會簡單介紹一下什么是限制性內切酶，不同內切酶的分類如何，讓您對限制性內切酶有一個更全面的認識。針對第2~4個問題，翌圣FuniCut®系列快

干貨 | 病毒滴度檢測，除了空斑試驗還有更好的選擇2023/09/12

什么是病毒滴度呢？就像重組蛋白合成以后需要檢測純度一樣，病毒包裝后的效力如何，如何定量，也是必須要檢測的，專業(yè)術語稱為：病毒滴度的測定。病毒滴度是指單位體積液體中具有生物活性的病毒顆粒數，是衡量病毒數量和毒力的一個重要指標。病毒滴度測定是指確定給定樣品中病毒顆粒的濃度的過程。它是評估病毒產品，如疫苗、基因治療載體或診斷試劑的質量和效力的一個重要參數。病毒滴度檢測方法比較病毒滴度的測定方法有多種，主要分為物理方法和生物方法兩大類。物理方法是通過測定病毒顆粒的大小、形態(tài)、數量、電荷、光學性質等，來推

CUT&Tag優(yōu)于ChIP-Seq的關鍵竟是它？2023/08/31

CUT&Tag優(yōu)于ChIP-Seq的關鍵竟是它？前面幾期，小翌介紹過“翌圣轉座酶系列產品助力NGS文庫構建”（戳鏈接了解詳情）。本期，小翌重點聊聊pG-Tn5。什么是pG-Tn5pG-Tn5(pG-Tn5Transposase)是將ProteinG(pG)與經過改造的Tn5轉座酶進行融合，形成的同時具備轉座酶與ProteinG活性的新型融合酶。ProteinG能特異性與抗體結合，從而使得pG-Tn5具備更高的靶向性。Tn5是一種細菌轉座子,經改造的Tn5能夠高效地切割DNA,同時連接上特定的接頭

巨噬細胞清除操作及文獻實例分析2023/08/30

01巨噬細胞清除簡介巨噬細胞是體內每個器官中都存在的細胞，存在于表皮、角膜和沒有血管的關節(jié)內部，其體內生物學研究的重要方法之一是巨噬細胞耗竭。清除巨噬細胞，可以全面了解巨噬細胞在病理條件下的功能。目前，巨噬細胞清除的主要方法包括構建巨噬細胞缺失動物模型和使用藥物（氯膦酸鹽脂質體）去除法，但是，構建巨噬細胞缺失動物模型價格昂貴，周期長，因此，氯膦酸鹽脂質體（ClodronateLiposomes）是目前最為成熟、方便、經濟的一種巨噬細胞清除工具，可以有效的清除動物體內包括肝臟，脾臟，肺部，血液等多

精彩回顧 | 四企聯(lián)動，共話病原快檢——高通量測序技術助力病原快檢與防控2023/08/29

精彩回顧|四企聯(lián)動，共話病原快檢——高通量測序技術助力病原快檢與防控8月24日下午，由華大智造、吉因加、金匙醫(yī)學和翌圣生物聯(lián)合主辦的“四企聯(lián)動，共話病原快檢——高通量測序技術助力病原快檢與防控”的云聽會落幕，這場齊聚設備商、服務商和原料商的研討會，從不同的視覺角度，為賦能病原領域的診斷和監(jiān)測等角度提供不同的病原快檢與防控見解，思想的碰撞為大家?guī)砹瞬≡鞕z前沿的新設備、新興技術和優(yōu)質試劑。四企聯(lián)動賦能病原快檢與防控華大智造DNBSEQ測序平臺加速病原檢測。華大智造帶來了全球同等通量測序儀中速度最

新品 | 翌圣GMP級別RNA合成酶原料：BsaI2023/08/25

mRNA合成的關鍵步驟之一是將質粒DNA進行線性化，這一步需要使用限制性內切酶，IIs型內切酶是質粒線性化的內切酶，因為它們在識別位點下游切割DNA，可確保所設計的poly(A)尾的完整性，線性化后的DNA模板上不會留下“疤痕”，IVT過程中也不會添加不需要的核苷酸。BsaI是常見的IIs型內切酶之一，在mRNA合作中起著重要作用。圖1.BsaI識別位點及切割序列翌圣GMP級別BsaI翌圣的BsaI由大腸桿菌重組表達，GMP標準生產，酶切效率高、星號活性低、末端完整性良好，可用于mRNA疫苗生產

新品 | 無氯仿的總RNA抽提試劑來了！2023/08/25

說到RNA提取，總是避不開Trizol（此處指總RNA抽提試劑，下同），作為總RNA提取的方法，裂解能力強，適用范圍廣，適用動植物組織還有小量樣本及難提取的組織，例如皮膚，結締組織，還可以用于細菌真菌等微生物的總RNA提取，優(yōu)點顯而易見，缺點也是不容忽視，Trizol它離不開氯仿啊！氯仿早在2017年就被世衛(wèi)癌癥研究機構列入2B類致癌清單了，吸入，食入，皮膚吸收，主要作用于中樞神經，有麻醉作用，對心、肝、腎有損害，還有提取伴侶β-巰基乙醇也是危險品，刺激眼睛、呼吸道粘膜，引起慢性咽炎，經皮膚、吞

常用報告基因有哪些種類？一文讀懂！2023/08/25

常用報告基因有哪些種類？一文讀懂！什么是報告基因？報告基因(reportergene)是一種編碼在內源蛋白背景下易被檢測出來的蛋白質或酶的基因。報告基因與目的基因或調控序列相連，通過間接或直接檢測報告基因編碼產物的信號，比如報告蛋白、mRNA、酶等，直觀反映細胞內基因的轉錄活性或表達水平。一般報告基因的特點是無毒、無免疫原性、易于檢測、具有一定的特異性。報告基因編碼產物的半衰期是比較關注的一個關鍵點。編碼產物半衰期和報告基因的應用領域息息相關。[1]那么報告基因該如何選擇呢？在選擇報告基因時一般

漲知識|qPCR專場四：問題圖表分析及實驗案例2023/08/25

漲知識|qPCR專場四：問題圖表分析及實驗案例熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產物的累積情況，從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的，并且可以通過數據分析計算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經常是差之毫厘謬以千里，所以在實驗過程中，我們需要注意諸多細節(jié)，謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實驗，拿到實驗結果，發(fā)表高分文章呢？在熒光定量PCR實驗中，難